普瑞邦自动化免疫亲和操作仪Auto IPS-6060

普瑞邦根据国家修订的标准与实施细则，通过与实践结合，为大家总结出一套实用型解决方案，能够有效消除杂质、颜色等外来因素的干扰，快速高效地确定游离甲醛含量，欢迎参考与指导。

食品中赭曲霉毒素A的检测，有两个标准方法：GB5009.96-2016《食品中赭曲霉毒素检测》和SNT4675.10-2016《出口葡萄酒中赭曲霉毒素A的测定液相色谱-质谱/质谱法》。二种方法均需要使用免疫亲和柱或净化柱对样品进行纯化，再用仪器进行检测。青岛普瑞邦生物工程有限公司专门研发了针对咖啡和红酒复杂基质的专用免疫亲和柱。 该产品原理是抗原抗体反应，赭曲霉毒素A抗体固定于柱内凝胶上，样品中的赭曲霉毒素A经过提取，过滤，稀释，然后将样品提取液缓慢的通过赭曲霉毒素A免疫亲和层析柱，在柱内赭曲霉毒素A与抗体结合，之后洗涤免疫亲和柱，除去未结合的其他物质。用乙酸甲醇洗脱赭曲霉毒素A，注入到分析仪器中进行检测。

本文依据GB5009.22-2016《食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》的第三法，试样经纯甲醇或者纯乙腈提取，提取液经离心稀释后，使用全自动免疫亲和柱操作仪净化，使用全自动标液配制仪配制标准曲线，进样高效液相色谱检测。结果为常见调味品酱油和醋中黄曲霉毒素B1的加标回收率在89%-100%之间，相对标准偏差小于5%。

在食品方面的研究领域中，对麦角生物碱的研究，常见的方法有：比色分析法（Colorimetry），但此方法只适合总碱含量测定，不能区分麦角生物碱的差向异构体；薄层色谱分析法（Thinlayerchromatography，TLC）分析方法简便、快速、成本低，但灵敏度低、重现性差，因此目前多用于定性分析及半定量分析；酶联免疫吸附法（ELISA），具有检测时间短、特异性强、仪器设备和样品前处理简单的特点，适用于大批量样品筛查与现场检测，然而也存在酶标记抗体保存时间有限且用量大，交叉反应；气相色谱法（Gas Chromatography，GC）一般要求被分析物在一定温度下易气化且在气化温度下较稳定。采用GC检测肽型麦角生物碱时，肽型麦角生物碱在进样口温度（250~300℃）下不稳定、易分解，肽型麦角生物碱会发生热分解，产生缩氨酸部分。利用质谱法（Mass spectrometer，MS）可以区分肽型麦角生物碱和其他麦角生物碱，但对于肽型麦角生物碱的差向异构体，如：麦角胺和麦角胺宁，则不能进行区分；高效液相色谱分析法（High performance liquid chromatography，HPLC），该方法具有分析效率高、重现性好、专一性强、灵敏度高等优点，是目前常用的一种麦角生物碱的检测方法，该方法不宜鉴定新化合物、区分特征麦角生物碱及其异构体；综合来说，液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS）应用广泛，这种方法能定量分析麦角生物碱的同时确定麦角生物碱的相对分子质量，还可能得到新的化合物。本方案参考GB 2715-2016《食品安全国家标准 粮食》采用液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS）。

提起真菌毒素，大家首先想到的是强致癌物黄曲霉毒素。但毒素种类繁多，菌属不同产生的毒素不同。有研究表明，交链孢霉分布广泛，其有毒代谢产物——交链孢毒素污染农作物的情况相当普遍。虽然食用含痕量毒素的食品不会引起急性中毒，但是长期食用可能引起慢性中毒，严重威胁人和动物健康安全，已经引起了国际范围的高度关注。 欧盟已经就食品与饲料中交链孢毒素对人畜的健康风险发布了科学意见，我国《国家食品污染物和有害因素风险监测工作手册》2020版也专门对谷物及其制品（小麦粉、挂面、饼干、面包、馒头等）、番茄及其制品（番茄酱、番茄沙司等）、樱桃、车厘子和植物油中交链孢霉毒素测定的标准操作程序进行了指导性公示。本解决方案参考此方法进行前处理，采用固相净化柱净化，高效液相色谱检测，实现了果蔬（番茄）中五种交链孢毒素同时检测。

样品中的黄曲霉毒素经提取净化后，经液相色谱分离，在在254nm紫外灯照射下，黄曲霉毒素B1和G1与水反应分别生成黄曲霉毒素B2a和G2a（见式（1）），荧光检测器检测，根据保留时间定性，外标法定量。 样品中的伏马毒素经提取后，免疫亲和柱净化，液相色谱分离，柱后邻苯二甲醛衍生，荧光检测器检测，外标法定量。