K5500微量分光光度计测定DS-DNA的浓度及纯度 用K5500微量分光光度计测量DS-DNA的浓度，评价DS-DNA的纯度。 实验原理：K5500微量分光光度计对DS-DNA进行紫外吸收扫描，给出扫描图；测量DS-DNA在260nm，280nm，230nm处的吸光值，由软件计算DS-DNA的浓度值，260nm与280nm处的吸光度的比值（A260/A280）及260nm与230nm处的吸光度的比值（A260/A230）来评价DS-DNA的纯度。多次测量，求测量的重复性。 样品：双链DNA（DS-DNA）样品 仪器：K5500微量分光光度计、移液枪 操作步骤： 空白对照 1 先用溶解核酸的溶剂作空白对照，以移液枪吸取溶剂（1～2µL）滴加到检测平台上。 2 放下取样臂。 3 点击软件界面上的“Blank”按钮，程序会自动记录空白值。 4用干净的吸水纸擦去上下检测平台上的溶剂。 样品测量 1 以移液枪吸取样品（1～2µL）滴加到检测平台上。 2 放下取样臂。 3 点击软件界面上的“Measure”按钮，即可得出样品参数（吸光度和浓度）和图表。 4 用干净的吸水纸擦去上下检测平台上的样品。 5 如需保存图表，可点击“Save Graph”按钮。 6 待全部样品测定结束后，点击“Show Report”按钮，已测样品的测定数据将出现在Excel表格中。 双链DNA的紫外吸收光谱图 得到双链DNA的紫外吸收光谱图如下： 双链DNA紫外吸收光谱图 样品在260nm处吸光度为3.5213Abs，浓度值为176.07ng/μL 黑色区域的波线图为双链DNA的吸收光谱图，在260nm处有最高吸收值，吸收值为3.5213（黄色框）。浓度值为176.07（绿色框），单位为ng/ul。260/280的比值为1.7749，用于评价核酸的纯度。 重复性：重复测量该样品5次，测得的浓度值分别为：176.07，174.56，177.42，175.43，176.10。 Δc＝max|ci－1 / 5 Σci | /（1 / 5 Σci ） = (177.42-175.92) / 175.92 = 0.85%

色谱柱：Zorbax ODS C18(250mm×4.6mm)，保护柱：Zorbax ODS (20mm×2.0mm)；流动相：甲醇-氯仿-水（0.5∶0.012∶100）；流速：0.5ml/min；检测波长：224nm；柱温：35℃。

[色谱条件] 色谱柱：HypersilODS C18(250mm×4.6mm，5μm)；流动相：甲醇-氯仿-水（0.5∶0.012∶100）；流速：1.0ml/min；检测波长：320nm；柱温：24℃。 [供试品的制备] 取本品粉末（过三号筛）约0.5g，精密称定，加甲醇30ml，加热回流1h，残渣分别用甲醇10ml洗涤2次，合并提取液，蒸干，用甲醇定容于10ml量瓶中。按本法色谱条件进行测定，结果见下图。

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 6682-1992 分析实验室用水规格和试验方法

建立盐酸曲马多和盐酸氯吡格雷2种手性药物的分离方法。方法：通过探讨环糊精的种类、浓度，缓冲液的pH值、浓度、电压以及温度对分离的影响，选择手性分离的最佳条件。结果：该2种手性药物的光学异构体得到基线分离。结论：所建立的手性分离方法可用于盐酸曲马多及盐酸氯吡格雷的手性研究。

色谱条件］ 色谱柱:Symmetry C18柱 (250mm×4.6mm, 5um); 流动相:甲醇-水(60:40);流速:1.0m1/min;检测波长:280nm; 柱温:室温. ［供试品的制备］ 取本品,研细,取0.7g,精密称定,用冰醋酸30m1分3次超声,每次20min, 滤过,滤液移至分液漏斗中,用30m1石油醚分3次萃取液,合并萃取液,挥干,残渣用甲醇溶解,置10m1量瓶中,稀释至刻度.按本法色谱条件进行测定.