摘要:本实验采用高效液相色谱 (HPLC) 法结合紫外检测器,并选择 Venusil○R ASB C18(3 µm,
150 Å;4.6 × 100 mm)色谱柱对脑伤乐生样品中的皂苷类成分进行了测定。结果表明:在波长为
203 nm,流动相为 0.1%磷酸溶液-乙腈梯度洗脱时,测得的两皂苷类化合物分离效果较好,但
与其周围杂质未达到基线分离。
关键词:高效液相色谱法;紫外检测器;皂苷;Venusil○R ASB C18 色谱柱
前言
三七总皂苷是三七提取的活性成分,主要成份包括人参皂苷 Rb1,人参皂苷 Rg1,
三七皂苷 R1。其药理作用主要有降低机体的耗氧量,提高机体对缺氧的耐受力;扩张
脑血管,使脑血流量增加;抗血栓和抗凝血作用等。
实验部分
仪器、试剂与材料
试剂材料
屈臣氏水;乙腈为色谱纯;磷酸为色谱纯;
脑伤乐生样品:由某药品公司提供;皂苷类标准品:由某药品公司提供;
高效液相色谱柱:Venusil○ R ASB C18;3 µm,150 Å;4.6 × 100 mm。
样品制备
脑伤乐生样品溶液:准确量取样品 0.5 mL,加水 0.5 mL 稀释,混匀,0.45 μm
滤膜过滤,取续滤液即得;
皂苷类标准品:准确量取该标准品 0.5 mL,加水 0.5 mL 稀释,混匀,0.45 μm
滤膜过滤,取续滤液即得。
色谱条件
色谱柱:Venusil○ R ASB C18;3 µm,150 Å;4.6 × 100 mm;
流 速:1.0 mL/min;
波 长:203 nm;
柱 温:30℃;
进样量:10 µL;
梯 度:
表1.梯度表
结果与讨论
本实验采用 Venusil○ R ASB C18 色谱柱对脑伤乐生中人参皂苷与三七皂苷进行了测
定,由表 2 及图 2 可知,在上述色谱条件下,待测物分离效果相对较好。
表 2. 脑伤乐生中皂苷类成分测试结果
图 1. 皂苷类标准品高效液相色谱图
图 2. 脑伤乐生样品溶液高效液相色谱图(下图为上图的横、纵坐标局部放大)
结论
本实验按客户提供的标准方法,采用 Venusil○ R ASB C18 色谱柱(3 μm,150 Å,4.6 ×
100 mm)对脑伤乐生样品溶液中的皂苷类成分进行了测定。结果表明两皂苷类化合物分
离效果较好,但与其周围杂质未达到基线分离。
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