【飞诺美色谱】草乌药材中乌头碱分析报告

摘要：本实验采用高效液相色谱 (HPLC) 法结合紫外检测器，并选择 Venusil® XBP C18(L)(5 μm，

150 Å，4.6 × 250 mm)色谱柱对草乌药材提取物中乌头碱进行了测定。结果表明：在波长为 235 nm，

流动相 A 为乙腈︰四氢呋喃=25︰15(v/v)；流动相 B 为 0.11 mol/L 醋酸铵溶液，梯度洗脱时，测得

的乌头碱与相邻杂质峰分离度为 2.41，能够满足检测要求。

关键词：高效液相色谱法；紫外检测器；乌头碱；草乌；Venusil® XBP C18(L)色谱柱；

前言

草乌又名断肠草，为双子叶植物纲毛茛科植物乌头(野生种)、北乌头或其他多种同

属植物的俗名。乌头各部分含生物碱，其中主为乌头碱。乌头碱水解后生成乌头原碱、

醋酸及苯甲酸。

表 1. 乌头碱化学信息

实验部分

仪器、试剂与材料

试剂材料

异丙醇、乙酸乙酯、三氯甲烷、醋酸铵、冰醋酸、乙腈、四氢呋喃为色谱纯；

氨试液：取浓氨溶液 400 mL，加水稀释至 1000 mL，即得.

草乌药材：灰色粉末，由某设备仪器公司提供；

高效液相色谱柱：Venusil® XBP C18(L)；5 μm，150 Å，4.6 × 250 mm。

样品制备

取本品 2.0 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加氨试液 3.0 mL，加入异丙醇-乙酸乙

酯（1︰1）混合溶液 50 mL，称定重量，超声处理 30 分钟，放冷，再称定重量，用异

丙醇—乙酸乙酯（1︰1）混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过。量取续滤液 25 ml，

40 ℃以下减压回收溶剂至干。残渣精密加入异丙醇—三氯甲烷（1︰1）混合溶液 3 mL

溶解，密塞，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品试液。

色谱条件

色谱柱：Venusil® XBP C18(L)；5 μm，150 Å，4.6 × 250 mm；

流动相 A：乙腈︰四氢呋喃=25︰15（v/v）；

流动相 B：0.1 mol/L 醋酸铵溶液（每 1000 mL 加冰醋酸 0.5 mL）；

检测波长：235 nm；

流速：1.0 mL/min；

柱温：30℃；

进样量：10 μL；

梯度：

表 2.液相色谱梯度条件

结果与讨论

本实验采用 Venusil® XBP C18(L)色谱柱对草乌药材中乌头碱进行了测定，由表 3

及图 1 可知，流动相 A 使用乙腈︰四氢呋喃=25︰15(v/v)；流动相 B 为 0.11 mol/L 醋酸

铵溶液，梯度洗脱时，乌头碱峰形、分离效果良好。

表 3. 草乌药材供试品溶液测试结果

图 1.草乌药材供试品溶液高效液相色谱图

图 2.草乌药材供试品溶液高效液相色谱图(纵坐标局部放大)

结论

本实验按照客户提供的测试方法，采用 Venusil® XBP C18(L)色谱柱(5 μm，150 Å，

4.6 × 250 mm)分离草乌药材中的乌头碱。结果表明色谱柱对草乌药材供试品溶液中乌头

碱与相邻杂质峰分离度为 2.41>1.5，能够满足检测要求。

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