【飞诺美色谱】Cleanert PCX 用于动物性食品中噻苯达唑、氟苯达唑及其标示残留物残留量的检测

博纳艾杰尔产品应用案例

AF10070

应用及技术服务部

摘要：本实验重现了动物性食品中噻苯达唑、氟苯达唑及其标示残留物残留量检测的待颁布农业部

标准，样品经乙腈提取，Cleanert PCX 固相萃取柱净化，Venusil MP C18 色谱柱（4.6 × 250 mm，5

µm，100Å）分离，0.02 mol/L 乙酸铵溶液和乙腈为流动相进行梯度洗脱，外标法进行定量。结果

表明，氟苯达唑、噻苯达唑及其标示残留物添加量为 0.02 mg/kg、0.1 mg/kg 时，回收率在 60% ~ 110%

之间，能够满足检测要求。

关键词：氟苯达唑；噻苯达唑；Cleanert PCX 固相萃取柱；Venusil MP C18 色谱柱

前言

氟苯达唑、噻苯达唑属于苯并咪唑类驱虫药,对牛、羊的肝片吸虫、大片形吸虫及

前后盘吸虫均有良好的杀灭效果,且毒性较小。已开始广泛应用于畜牧业养殖中。噻苯

达唑对大部分胃肠道蠕虫，尤其是成虫及特定的幼虫有很好地驱虫效果；氟苯达唑属

于抗蠕虫药，具有广谱、高效等特点。但是，氟苯达唑和噻苯达唑的广泛使用会对人

类身体健康造成危害，所以要对氟苯达唑和噻苯达唑残留量进行检测，以确保人类对

动物性食品消费的安全。

实验部分

仪器、试剂与材料

主要仪器设备

Agilent 1100 高效液相色谱仪；

博纳艾杰尔 12 位负压 SPE 装置；

博纳艾杰尔卓睿全自动固相萃取仪。

试剂材料

甲醇、乙腈、异辛烷、正丙醇、乙醇均为色谱纯；实验用水为超纯水；乙酸铵、

碳酸钠、氨水、甲酸、盐酸均为分析纯；

噻苯达唑、氟苯达唑及其标示残留物混合标准品（纯度 99%）；

0.1 mol/L 盐酸溶液：量取浓盐酸 0.9 mL，加水溶解并稀释至 100 mL，混匀；

30%酸化乙醇溶液：量取 0.1 mol/L 盐酸溶液 30 mL，用乙醇溶解并稀释至 100 mL，

混匀；

2%碳酸钠溶液：称取碳酸钠 2 g，加水溶解并稀释至 100 mL，混匀；

2%甲酸水溶液：量取甲酸 2 mL，加水溶解并稀释至 100 mL，摇匀；

5%氨化甲醇溶液：量取氨水 5 mL，加甲醇溶解并稀释至 100 mL，摇匀；

0.02 mol/L 乙酸铵溶液：称取乙酸铵 1.54 g，用水溶解并稀释至 1000 mL。

一次性无菌注射器；针式过滤器(0.45 µm，直径 13 mm)；

Cleanert PCX 固相萃取柱：60 mg/3 mL。

样品制备

样品提取

猪肉、鸡肉、羊肾：称取 2 g 均质好的样品，置于 50 mL 离心管中，加入 0.5 mL 2%

碳酸钠水溶液，8 mL 乙腈，5 mL 异辛烷，涡旋 1 min，超声提取 10 min，5000 rpm 离

心 5 min，取下层清液置于 100 mL 鸡心瓶中，剩余残渣加入 0.5 mL 2%碳酸钠水溶液，

8 mL 乙腈重复提取一次，合并两次下层清液，加 5 mL 正丙醇，50℃旋蒸至干，用 8 mL

30%酸化乙醇溶解，作为待净化液。

牛奶：称取 2 g 样品，置于 50 mL 离心管中，加入 0.5 mL 2%碳酸钠水溶液，8 mL

乙腈，10 mL 异辛烷，涡旋 1 min，超声提取 10 min，8000 rpm 离心 5 min，取下层清

液置于 100 mL 鸡心瓶中，剩余残渣加入 0.5 mL 2%碳酸钠水溶液，8 mL 乙腈重复提取

一次，合并两次下层清液，50℃旋蒸至干，加 5 mL 正丙醇，用 8 mL 30%酸化乙醇溶

解，作为待净化液。

样品净化

先将 Cleanert PCX (60 mg/3 mL)小柱依次用 3 mL 甲醇，3 mL 2%甲酸水溶液活化

平衡；然后将待净化液过柱；用 3 mL 2%甲酸水溶液和 3 mL 甲醇洗柱，弃去全部流出

液，小柱用真空泵抽干；最后用 3 mL 5%氨化甲醇洗脱。收集洗脱液于 50℃氮气吹干，

用 1 mL 流动相（0.02 mol/L 乙酸铵溶液︰乙腈 = 80︰20，V/V）溶解残留物，过 0.45 µm

尼龙针式过滤器后待测。其中猪肉、鸡肉加标实验用博纳艾杰尔卓睿全自动固相萃取

仪操作，羊肾、牛奶加标实验用 12 位负压 SPE 装置手动操作。

实验条件

液相条件

色谱柱：Venusil MP C18，5 µm，100 Å，4.6 × 250 mm

流动相：A相-0.02 mol/L乙酸铵溶液，B相-乙腈

柱 温：40℃

进样量：20 µL

梯度洗脱：见表1

结果与讨论

实验结果

由表 2 可知，采用固相萃取结合液相色谱法检测噻苯达唑、氟苯达唑加标回收率

在 60% ~ 110%之间，能够满足标准要求。

结论

本实验重现动物性食品中氟苯达唑、噻苯达唑及标示残留物的残留量检测的农业

部标准，并结合高效液相色谱对 4 种基质中氟苯达唑、噻苯达唑及其标示残留物的含

量进行了测定。对于加标量为 0.02 mg/kg、0.1 mg/kg 的样品进行了检测，回收率在 60%

~ 110%之间，符合国标要求。