【飞诺美色谱】酒中甜蜜素的分析方法

摘要 ：本实验采用固相萃取结合高效液相色谱串联质谱的方法，建立了酒中环己基氨基磺酸钠（甜蜜素）的检测方法。样品经水提取，Cleanert ® PWAX 固相萃取柱净化，Venusil XBP ® C8 色谱柱（3.0× 50 mm，5 µm，150 Å）分离，0.01 mol/L 乙酸铵水溶液和乙腈为流动相梯度洗脱，外标法定量。结果表明：甜蜜素添加量为 200.0 mg/kg 时，回收率为 106.7%，变异系数小于 2.0%，能够满足检测要求。

关键词: 环己基氨基磺酸钠；甜蜜素；Venusil ® XBP C8 色谱柱；Cleanert ® PWAX

前言

甜蜜素（Sodium cyclamate） 化学名称为环己基氨基磺酸钠，是一种人工合成的甜味剂，味道清甜，为无营养甜味剂。甜蜜素的甜度约为蔗糖的 30~40 倍，其作为国际通用的食品添加剂中可用于清凉饮料、果汁、冰激凌、糕点及蜜饯等食品中。由于人工合成甜味剂产生的热量少，对肥胖、高血压、糖尿病、龋齿等患者有益，加之又具有高效、经济等优点，因此在食品工业中被广泛应用。但是人工合成甜味剂的安全性已受到了广泛质疑，消费者如果经常食用甜蜜素含量超标的糕点、饮料或其他食品，就会因摄入过量对人体的肝脏和神经系统造成危害，特别是对代谢排毒的能力较弱的老人、孕妇、小孩危害更明显。

本实验建立了固相萃取结合高效液相色谱串联质谱检测酒中甜蜜素的方法。

实验部分

仪器、试剂与材料

主要仪器设备

AB SCIEX API 4000+质谱仪；

博纳艾杰尔 12 位负压 SPE 装置。

试剂材料

甲醇为色谱纯，实验用水为超纯水，氨水为分析纯，乙腈为质谱纯，乙酸铵，甜蜜素标准物质纯度99.9%。

一次性无菌注射器；Nylon 针式过滤器（0.22 µm，直径 13 mm）；

Cleanert ® PWAX 固相萃取柱：150 mg/6 mL。

样品制备

样品提取

称取 5.00 g 样品于 40 mL 样品瓶，60℃水浴上加热 30 min，残渣全部转移至 50 mL容量瓶中，用纯净水定容至刻度，摇匀待净化。

样品净化

先将小柱用 5 mL 甲醇，5 mL 水活化平衡，取 1 mL 待净化液上 SPE 柱，分别用 5mL 水和 5 mL 10%甲醇水溶液（V/V，体积比）淋洗，抽干小柱，用 5 mL 2%的氨化甲醇溶液（V/V，体积比）洗脱，并收集洗脱液，用超纯水定容到 10 mL，过 0.22 µm Nylon针式过滤器后待测。

以上净化步骤可用卓睿全自动固相萃取仪完成。

实验条件

液相条件

色谱柱：Venusil ® XBP C8，5 µm，150 Å，3.0 × 50 mm

流动相：A：0.01 mol/L乙酸铵水溶液；B：乙腈；

流 速：0.4 mL/min

柱 温：30℃

进样量：5 µL

流动相梯度见表1：

质谱条件

离子源：ESI-；电喷雾电压：-4500 V；雾化气压力：50 psi；气帘气压力：35 psi；辅助气压力：50 psi；离子源温度：500℃； 监测方式：多反应监测（MRM）定性离子对、定量离子、碎裂电压和碰撞能量见表 2：

结果与讨论

实验结果

由表 3 可知，采用固相萃取结合液相色谱串联质谱法检测食品中甜蜜素，酒基质加标回收率 106.7%，变异系数小于 2.0%，能够满足检测标准要求。

结论

本实验建立了酒中甜蜜素的检测方法，并结合高效液相色谱串联质谱对酒中甜蜜素的含量进行测定。加标量为 200.0 mg/kg 回收率为 106.7%，变异系数小于 2.0%，符合实验要求。

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