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【飞诺美色谱】化妆品中对羟基苯甲酸酯类化合物的分析方法

艾杰尔飞诺美

2024/04/03 11:54

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摘要 : 本实验采用高效液相色谱(HPLC)法建立了化妆品中对羟基苯甲酸酯类化合物的检测方法。样品中对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯采用甲醇提取,Venusil ® XBP C18 (L)色谱柱(5 μm,150 Å,4.6 × 250 mm) 分离,0.05 mol/L 磷酸二氢钠(含 0.002 mol 十六烷基三甲基溴化铵,磷酸调节 pH 至 3.5)︰甲醇︰乙腈=50︰30︰15 (V/V/V)为流动相进行等度洗脱。结果表明,本方法对化妆品中对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯的最低检出浓度分别为 0.0010 μg/mL和 0.0025 μg/mL,能够满足检测要求。

关键词: HPLC 法;对羟基苯甲酸甲酯;对羟基苯甲酸乙酯;Venusil ® XBP C18 (L)色谱柱

前言

对羟基苯甲酸甲酯,又称尼泊金甲酯,英文名称 Methyl 4-hydroxybenzoate,主要用作有机合成、食品、化妆品、医药的杀菌防腐剂,也用作于饲料防腐剂。有资料显示,如果长期大量食用对羟基苯甲酸甲酯,可能会造成肠胃不适,皮肤、黏膜发炎和产生女性荷尔蒙。对羟基苯甲酸乙酯,中文别名:尼泊金乙酯;羟苯乙酯;4-羟基苯甲酸乙酯,英文名称 Ethyl 4-hydroxybenzoate;常用作食品、化妆品的防腐剂,也用于制药、皮革等行业;对真菌的抑菌效果较强,但对细菌的抑菌效果较弱。用作抑菌防腐剂。

本实验使用 Venusil ® XBP C18 (L)液相色谱柱,测试市售化妆品中对羟基苯甲酸酯类成分,主要测试对象为对羟基苯甲酸甲酯与对羟基苯甲酸乙酯。

实验部分

仪器、试剂与材料

主要仪器设备

Agilent 1260 高效液相色谱系统,紫外检测器

试剂材料

甲醇、乙腈、十二烷基二甲基溴化铵均为色谱纯;磷酸二氢钠为分析纯;实验用水为超纯水;

防腐剂储备液(0.5 mg/mL):准确称取对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯标准品 5 mg,置于 10 mL 容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,备用;

一次性无菌注射器;尼龙针式过滤器(0.45 μm,直径 13 mm);

样品制备

准确称取试样 1 g 置于 50 mL 离心管中,加甲醇 10 mL,涡旋混匀,超声提取15 min,离心。上清液经 0.45 μm 滤膜过滤,取续滤液作为样品试液。

液相色谱 条件

色谱柱:Venusil ® XBP C18 (L),5 μm,150 Å,4.6 × 250 mm;

流动相:0.05 mol/L磷酸二氢钠(含0.002 mol十六烷基三甲基溴化铵,磷酸调节pH至3.5) ︰甲醇︰乙腈=50︰30︰15 (V/V/V);

波 长:254 nm;

柱 温:25℃;

流 速:1.5 mL/min

进样量:5 μL。

结果与讨论

线性关系和检出限

量取对羟基苯甲酸酯类标准储备液,分别用甲醇稀释至 50 μg/mL、40 μg/mL、30 μg/mL、20 μg/mL 和 10 μg/mL 的标准溶液,按照上述检测条件依次进样,以浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,拟合标准曲线方程,结果见表 2:

稳定性测试

市售化妆品检测

由图 3 - 5 可看出,Venusil ® XBP C18 (L)色谱柱能够将化妆品中两种苯甲酸酯类物质较好的分离开,满足检测要求。

结论

本实验采用高效液相色谱(HPLC)法建立了化妆品中对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸乙酯的检测方法。样品中两种待测物采用甲醇提取,Venusil® XBP C18 (L)色谱柱(5 μm,150 Å,4.6 × 250 mm) 分离,结果表明,本方法对化妆品中对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯的最低检出浓度分别为 0.0010 μg/mL 和 0.0025 μg/mL,能够满足检测要求。

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