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微量凯氏定氮法测定蛋白质总含量
2016/07/07 12:34
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方案摘要：
产品配置单：
来亨L-805A全自动凯氏定氮仪
型号： L-805A
产地： 北京
品牌： 来亨
¥5万 - 10万
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方案详情：
一、实验原理
天然有机物（如蛋白质和氨基酸等化合物）的总氮量通常用微量凯氏定氮法（micro-kjeldahl method）来测定。
当被测的天然含氮化合物与浓硫酸共热时分解出氨，氨与硫酸反应生成硫酸铵，此过程称为消化。由于消化过程进行缓慢，实验中常添加硫酸钾和硫酸铜的混合物来促进，硫酸铜是催化剂，硫酸钾可提高消化液的沸点。氧化剂过氧化氢也能加速反应。消化完成后，在凯氏定氮仪中加入强碱碱化消化液，使碳酸铵分解出氨。用水蒸汽蒸馏法将氨蒸入无机酸溶液中，然后再用标准酸溶液进行滴定。
上述过程的化学反应如下：
详情见附件！化学方程式到这里就乱了，请见凉！
在微量凯氏定氮法中，常用硼酸-指示剂混合液收集氨，氨与溶液中氢离子结合生成铵离子，使溶液中氢离子浓度降低，指示剂颜色发生改变，然后用标准无机酸滴定，直至恢复溶液中原来氢离子浓度，即指示剂变回原来颜色为止。所用无机酸的摩尔数即相当于样品中氨的摩尔数，本法适用范围约为0.2~1mg氨。
因为蛋白质含氮量通常在16%左右，所以将凯氏定氮法测得的含氮量乘上系数6.25，便得到该样品的蛋白质含量。
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