粗脂肪的定量测定-传统索氏标准法
一、实验原理
脂肪是丙三醇(甘油)和脂肪酸结合成的脂类化合物,能溶于脂溶性有机溶剂。
本实验用重量法,利用脂肪能溶于脂溶性溶剂的这一特征,用脂溶性溶剂将脂肪提取出来,借蒸发除去溶剂后的称量。整个提取过程均在索氏提取器中进行。通常使用的脂溶性溶剂为乙醚或沸为30~60℃的石油醚。用此法提取的脂溶性物质除脂肪外,还含有游离脂肪酸、磷脂、固醇、芳香油及某些色素等,故称为“粗脂肪”。
二、实验用品
(一)器材
(1)水浴锅。
(2)烘箱。
(3)索氏提取器一套,研钵一个。
(4)脱脂滤纸及脱脂棉花。
(5)分析天平。
(二)试剂
无水乙醚(AR)
(三)材料
样品(芝麻、花生、大豆或玉米)。
三、实验程序
(一)操作方法
1.装置索氏脂肪提取器
2.样品的制备
将样品置80~100℃真空烘箱烘至恒重,放冷后研成粉末,精确称取样品3.00g,放入干燥滤纸筒内,以脱脂棉花盖之。
3. 提取
将盛有样品的滤纸筒放入索氏提取器内,注意勿使筒内样品高出提取器的虹吸管加入乙醚约占提取管容积1/3,以浸湿样品,同时向已知重量的提取瓶内加入约占其容积1/3的乙醚。将仪器各部连接如下图,夹稳,并置于恒温水浴锅上,使提取瓶底部浸入水中,开启自来水,使水从冷凝器下孔流入,上孔流出,然后开启水浴锅开关,加热水浴。当温度上升至乙醚沸点时,乙醚开始沸腾,并形成蒸汽由连接管上升至冷凝器,蒸气遇冷而成液体,滴入提取管内将样品浸泡,样品的脂肪将逐渐溶于其中,当液面超过虹吸管上端时,溶有脂肪的乙醚经虹吸管流入提取瓶。调节水浴温度至50~60℃,使乙醚每小时循环3~5次,提取时间视样品性质而定,通常要12~16h。
4.干燥及称重
提取完毕后,卸下的提取瓶,在水浴上蒸馏回收乙醚(避免着火)。清洗提取瓶外壁,最后把提取瓶置104℃恒温烘箱中烘至恒重。
5.结果处理
粗脂肪(%)=(m2-m1)×100/m
式中:m——风干试样重量,
ml——已恒重的抽提瓶重量,
m2——已恒重的盛有脂肪的抽提瓶重量,
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