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利用 LC/MS/MS 定量测定人血清中的一组内源性类固醇
2021/04/01 17:12
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方案摘要：
产品配置单：
Agilent 1290 Infinity II 液相色谱系统
型号： 1290 Infinity II
产地： 德国
品牌： 安捷伦
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方案详情：
Agilent Chem Elut S 固相支持液液萃取 (Chem Elut S) 使用合成填料，比传统硅藻土具有更出色的一致性和更高的持水容量。本研究展示了采用 Chem Elut S 2 mL 96 孔板对人血清中的一组共 15 种内源性类固醇进行 LC/MS/MS 定量测定。使用固相支持液液萃取 (SLE) 对血清样品进行前处理，以提取目标分析物，并去除基质干扰物质，如盐、蛋白质和部分磷脂。整个样品处理在 96 孔板中作为一个批处理进行，首先将水溶液样品加载到 SLE 吸附剂上，然后使用与水不混溶的溶剂进行重力洗脱。与传统的液液萃取 (LLE) 相比，Chem Elut S 的板内工作流程可大大节省时间和人力。针对血清中目标类固醇浓度为 5–10000 pg/mL 的宽校准范围（雌二醇和睾酮的校准范围为 10–10000 pg/mL，氢化可的松、17-羟基孕烯醇酮和孕酮的校准范围为 20–10000 pg/mL），对建立的 SLE 方法进行验证，该方法表现出优异的方法分析物准确度 (80%–120%) 和重现性 (RSD < 15%)。还对方法选择性和交叉污染进行了评估，五种分析物定量限 (LOQ) 升高归因于方法在血清基质中的选择性。此外，在给定的样品萃取溶剂下，合成的 SLE 吸附剂与基于硅藻土的 SLE 以及传统 LLE 相比，能够更好地去除生物体液基质中的磷脂。
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