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使用 Agilent 1200 系列液相色谱系统进行杂质分析 第 3 部分：方法开发的快速条件筛选
2018/11/27 09:42
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方案摘要：
产品配置单：
Agilent 1260 Infinity II 液相色谱系统
型号： 1260 Infinity II
产地： 德国
品牌： 安捷伦
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Agilent 1290 Infinity II Multisampler
型号： 1290 Infinity II Multisampler
产地： 德国
品牌： 安捷伦
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OpenLAB 软件
型号： OpenLAB
产地： 美国
品牌： 安捷伦
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方案详情：
摘要
方法开发是当今的药物分析实验室最耗时的工作之一。通常，条件筛选是第一步，然后是对已发现的最佳参数组合进行微调。本文介绍了采用安捷伦快速分离高通量色谱柱和Agilent 1200 系列快速分离液相色谱(RRLC) 系统加速整个分析过程的一种途径。本文论证了如何在一天半的时间内，对定量分析活性药物成分中非对映异构体和位置异构体杂质的分离条件进行筛选和方法微调，最终获得了一种耐用的方法。最终的分析方法不仅比类似的传统方法要快得多，而且可以节省大量的溶剂。
前言
开发和验证新的分析方法昂贵且耗时。因此，对于整个分析过程来说，任何可以减少单次分析运行时间的手段都是有益的，但不能影响分离度、灵敏度，尤其是稳定性。如今，填装亚2 μm填料色谱柱的问世加上液相色谱仪的高性能，已能满足超过以往1000 倍应用方法的需求，还能极大提升方法开发的速度。开始时常常要对一些分离条件如固定相、流动相参数（%B、缓冲液、pH 和溶剂），以及操作参数如梯度陡度、温度等进行宽范围筛选，以找到微调的最佳起始点。本文论证了采用Agilent 1200 系列快速分离液相色谱(RRLC) 系统和多种安捷伦ZORBAX RRHT 色谱柱，寻求每次分析运行时间低于4 min 的分离条件，以及分离非对映化合物和位置异构体的效率。
结论
通过亚2 μm颗粒色谱柱进行条件筛选和方法微调，可显著缩短活性药物成分中非对映异构体和位置异构体杂质分离方法开发的时间。由于仅需相当短的筛选运行周期时间(4.5 min)，大量条件可以在短短一天内完成测试（包括重复实验和空白实验）。进一步的微调另需半天时间，因此只要一天半，即可提供方法进行随后的方法验证，时间也可大大缩短，因为最终方法的单次分析的运行时间很短，只有4.0 min。还要记住很多随后在制造业QA/QC 实验室进行的分析。在多年的化合物生产中，分析时间还可以减少为传统方法所需时间的一小部分，从而不断缩短产品的发布时间，节省中间产品的储存成本，为其它产品的开发生产获得更早的市场反馈，并节省了每次分析的溶剂，因为每次分析仅需要8.8 mL 的流动相。
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