从 Agilent 1260 Infinity 生物惰性液相色谱仪到 Agilent 1260 Infinity II 生物惰性液相色谱仪的无缝方法转移——利妥昔单抗创新药物和生物仿制药的电荷异构体分析

摘要

监测生物药物的电荷异质性对于生产安全有效的药物至关重要，因为电荷分布的改变可能会引起不良免疫反应。本应用简报展示了对利妥昔单抗创新药物及其生物仿制药的电荷异构体的分析。电荷异构体在峰型模式方面表现出相似性，但是创新药物与生物仿制药的单峰的强度则存在明显差异。从 Agilent 1260 Infinity 生物惰性液相色谱仪转换为 Agilent 1260 Infinity II 生物惰性液相色谱仪，所获得的分析结果相当。结果还表明保留时间具有优异的一致性，最大偏差小于 0.5%。两种系统在保留时间和峰面积方面获得了高精度的结果。

前言

仪器间的方法转移对不同行业的实验室而言都是一项重要课题。对于制药及生物制药行业中经验证的方法，由于实验室现代化的发展等因素，必须实现从一台仪器到另一台仪器的等效方法转换。

随着生物制药行业的发展，出现了许多昂贵的新兴单克隆抗体 (mAb) 药物，这导致了低价生物仿制药的不断开发。对创新药物与生物仿制药的比较研究对于评估生物仿制药 mAb 的安全性和有效性至关重要。这些广泛的研究包括重要的质量属性，例如滴度分析、聚集研究、电荷异构体和糖基化分析、肽谱分析等。两种最重要的质量属性是聚集研究以及电荷异构体分布的分析。本应用简报中使用的 mAb 为利妥昔单抗的创新药物及生物仿制药，此类药物与多药化疗法一起用于治疗弥漫大 B 细胞淋巴瘤。

本应用简报使用弱阳离子交换色谱法 (WCX) 分析了利妥昔单抗创新药物及生物仿制药的电荷异构体分布情况。对两种不同的生物惰性系统（Agilent 1260 Infinity 生物惰性液相色谱仪和Agilent 1260 Infinity II 生物惰性液相色谱仪）进行比较以证明所测试的两种系统的等效性。

结论

利用弱阳离子交换色谱对利妥昔单抗创新药物和生物仿制药进行电荷异构体分析。利用安捷伦缓冲液顾问软件计算得到 pH 6.2 至 7.2 的梯度进行方法开发/pH 筛选后，选择 pH 6.8 在磷酸盐缓冲体系中使这些样品获得最佳分离度。对创新药物与生物仿制药的电荷异构体分布进行比较后，发现峰型形状相似，但是单峰的强度存在明显差异。采用 Agilent 1260 Infinity 生物惰性液相色谱仪和 Agilent 1260 Infinity II 生物惰性液相色谱仪在 pH 6.8 环境下进行分离。观察到保留时间具有优异的一致性，最大偏差小于 0.5%，证明了两套生物惰性系统的等效性。此外，两种系统在保留时间和峰面积方面获得了高精度结果。