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2D-LC/MS/MS 在药物生物分析中的优势 避免基质效应 ― 提高检测灵敏度
2018/08/23 17:29
阅读：577
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方案摘要：
产品配置单：
Agilent 1290 Infinity II 二维液相色谱解决方案
型号： 1290 2D-LC
产地： 德国
品牌： 安捷伦
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Agilent 6495B 三重四极杆液质联用系统
型号： 6495B
产地： 新加坡
品牌： 安捷伦
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OpenLAB 软件
型号： OpenLAB
产地： 美国
品牌： 安捷伦
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Agilent 1290 Infinity II Multisampler
型号： 1290 Infinity II Multisampler
产地： 德国
品牌： 安捷伦
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方案详情：
摘要
本应用简报展示将 Agilent InfinityLab 二维液相色谱解决方案与 Agilent 6495 三重四极杆液质联用系统结合使用，分析药代动力学研究中的药物及其代谢物。二维液相色谱可避免出现共洗脱，因此能够减少信号抑制以及交叉干扰风险，这些问题可能存在于复杂样品的一维分析中。通过以更适合的洗脱方式将分析物引入质谱离子源，2D-LC/MS/MS 分析方法的第二维可用于提高质谱检测的信号强度。
前言
在过去十年间，LC/MS/MS 已成为了药代动力学研究中用于分析药物及其代谢物的一项成熟技术。这项技术除高选择性、高分析灵敏度以及在峰归属或分子量信息等方面具有明显优势以外，也遇到了一些众所周知的困难，如难以对血浆或细胞培养基等基质复杂的生物样品进行分析。另外，还存在同质异位素共洗脱或代谢物源内碎裂导致的交叉干扰，以及基质组分共洗脱导致的信号抑制等挑战。信号抑制的问题在低浓度分析物定量时尤为突出，可能造成定量限不达标。
就如何将 Agilent InfinityLab 二维液相色谱解决方案与 Agilent 6495 三重四极杆液质联用系统结合在生物分析研究环境中克服上述难题，本应用简报详细列举了两个示例，分别是：
• 二维分离方案如何避免出现共洗脱，以及如何在处理复杂分析物混合物时降低交叉干扰风险或减少信号抑制
• 如何利用第二维通过改变洗脱条件提高质谱检测的信号强度，从而以更适合的洗脱液将分析物引入质谱离子源，大幅提高定量限
结论
在药代动力学研究中将 2D-LC/MS/MS 技术用于药物及其代谢物的应用引入了第二维分离，因此可避免出现共洗脱，并消除上述复杂样品中的交叉干扰风险。从体外细胞悬液测定细胞上清液的分析中已经证实了这种可能性。二维液相色谱卓越的分离能力实现了在 35 分钟的总运行时间内对 16 种目标代谢物的分析，与采用六种不同方法对目标代谢物进行 1D-LC/MS/MS 分析的方法相比，这种方法能够节省大量时间和样品。
2D-LC/MS/MS 方法中第二维的使用成功提高了质谱检测的信号强度。在该方法设置中，第一维采用能够分离目标分析物的条件，而在第二维中选择有助于达到绝佳质谱检测灵敏度的条件。以更适合的洗脱液将分析物引入质谱离子源的方式大大提高了定量限。
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