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使用亲水相互作用色谱 (HILIC) 与 LC/MS/MS 分析胆碱代谢物
2018/08/16 11:28
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产品配置单：
Agilent 1290 Infinity II 液相色谱系统
型号： 1290 Infinity II
产地： 德国
品牌： 安捷伦
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Agilent Ultivo 三重四极杆液质联用系统
型号： Ultivo
产地： 新加坡
品牌： 安捷伦
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Agilent 1290 Infinity II Multisampler
型号： 1290 Infinity II Multisampler
产地： 德国
品牌： 安捷伦
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OpenLAB 软件
型号： OpenLAB
产地： 美国
品牌： 安捷伦
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方案详情：
摘要
使用 Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z 和 Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-OH5 色谱柱分析胆碱及其代谢物。与 Poroshell 120 HILIC-OH5 相比，Poroshell 120 HILIC-Z 色谱柱可提供更好的峰形和略高的灵敏度，但是保留性能较弱。本文使用 Poroshell 120 HILIC-Z 色谱柱考察不同流动相添加剂的影响。结果发现，在流动相中添加 10 mmol/L 乙酸铵可以获得最佳峰形。
前言
胆碱及其代谢物甜菜碱、乙酰胆碱和甘油磷酰胆碱属于小分子强极性季胺化合物，无法在反相色谱柱上保留。新开发的 HILIC 化学键合相采用表面多孔颗粒填料技术，是保留这类化合物的理想选择。在本应用简报中，使用 InfinityLab Poroshell 120 HILIC-OH5 和 Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z 化学键合相色谱柱对胆碱及其代谢物进行分离。使用 Poroshell 120 HILIC-Z 色谱柱考察不同流动相添加剂的影响。Agilent 6460 三重四极杆液质联用系统用于低浓度样品的检测。
结论
总体来说，在中性 pH 值条件下使用添加乙酸铵的流动相以及 InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z 色谱柱可以实现胆碱及其代谢物的最佳分离。对另一种不同的 HILIC 化学键合相（即 InfinityLab Poroshell 120 HILIC-OH5）也同样进行了分离性能的评估。甜菜碱的灵敏度在 HILIC-OH5 色谱柱上得到了提高，然而乙酰胆碱和胆碱的峰形和灵敏度在 HILIC-Z 色谱柱上更出色。
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