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当前位置: 安捷伦 > 解决方案 > 重组蛋白表征——电荷异构体分析

重组蛋白表征——电荷异构体分析

2018/08/02 16:03

阅读:1147

分享:
应用领域:
生物产业
发布时间:
2018/08/02
检测样品:
其他
检测项目:
电荷异构体
浏览次数:
1147
下载次数:
参考标准:
暂无

方案摘要:

在生产和纯化过程中,蛋白质能表现出多种电荷异质性改变。这些变化不仅影响 稳药物的定性,也影响活性,而且还可能导致有害的免疫反应。所以,开发和生产过程中蛋白药物的电荷异构体分析非常关键。电荷变异体的表征通常是用等电聚焦或离子交换色谱进行的。等电聚焦 (IEF) 通过等电点 (PI) 进行蛋白质的分离,常规用于重组蛋白电荷异构体的指纹图分析。与传统的平板凝胶等电聚焦电泳相比,毛细管等电聚焦电泳 (cIEF) 具有更高的分离度、分析速度,定量能力和自动化性能。

产品配置单:

分析仪器

Agilent 7100 毛细管电泳系统

型号: 7100

产地: 德国

品牌: 安捷伦

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Agilent 1260 Infinity II 液相色谱系统

型号: 1260 Infinity II

产地: 德国

品牌: 安捷伦

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分析软件

Agilent 1290 Infinity II Multisampler

型号: 1290 Infinity II Multisampler

产地: 德国

品牌: 安捷伦

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方案详情:

在生产和纯化过程中,蛋白质能表现出多种电荷异质性改变。这些变化不仅影响稳药物的定性,也影响活性,而且还可能导致有害的免疫反应。所以,开发和生产过程中蛋白药物的电荷异构体分析非常关键。电荷变异体的表征通常是用等电聚焦或离子交换色谱进行的。

等电聚焦(IEF) 通过等电点(PI) 进行蛋白质的分离,常规用于重组蛋白电荷异构体的指纹图分析。与传统的平板凝胶等电聚焦电泳相比,毛细管等电聚焦电泳 (cIEF)具有更高的分离度、分析速度,定量能力和自动化性能(图1)。

基于游离胶的溶液内等电聚焦技术利用固定化的pH 梯度实现蛋白质混合物的分级分离。相对于传统的凝胶电泳,溶液中的样品更容易被回收,便于后续应用,如粒度分析或液质分析。安捷伦的OFFGEL 系统可以进行基于等电点(PI) 的多肽和变性以及未变性蛋白质的分级分离,分辨率高达0.1 pH 单位。该技术能使约80% 的组分进入溶液中,20%留在胶条上,所以它是一个定性技术,而不是定量技术。

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