2017/07/06 15:54
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产品配置单:
Agilent 7100 毛细管电泳系统
型号: 7100
产地: 德国
品牌: 安捷伦
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方案详情:
治疗性单克隆抗体药物是目前生物制药领域的热点,相对于小分子药物,单克隆抗体药物的分子结构复杂性更高且更易受生产过程影响,因此对其理化性质进行全面而系统的解析成为生物制药(尤其是生物仿制药)的重中之重。毛细管电泳技术在单克隆抗体药物表征过程中具有广泛的应用,包括抗体的纯度/杂质、等电点、电荷异质性、糖基化等方面的分析。十二烷基硫酸钠毛细管电泳法 (CE-SDS) 是中国药典 2015 版附录收载的单克隆抗体药物纯度表征方法,其相对于聚丙烯酰胺凝胶电泳法 (SDS-PAGE) 具有更快的分析速度、更好的分离度、更优越的重现性和更准确的定量,且更加自动化。CE-SDS 方法能够完成 SDS-PAGE 方法不能完成的针对非糖基化重链的定量分析。
目前 CE-SDS 方法普遍采用商品化凝胶缓冲液,分析成本较高。在本文中介绍了一种可以用于 Agilent 7100 毛细管电泳系统的自制 CE-SDS 分离缓冲液来分析市售单克隆抗体。该方法用亲水性高分子作为筛分介质,根据分子量大小对 SDS 处理的蛋白质进行分离,符合 2015 版中国药典对于 CE-SDS 分离方法的要求。通过与商品化试剂盒的对比,证明该方法能够有效的分离还原单克隆抗体的非糖基化重链和重链,具有良好的重现性和定量准确性,且价格低廉,简便易行。
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