“脱”颖而出 | AdvanceBio脱盐产品重磅发布

安捷伦

2024/05/28 13:55

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为什么要脱盐，有什么好处？

保护您的数据和质谱仪（MS）

使用质谱进行完整蛋白和亚基分析时，非常希望在分析前去除不需要的成分。样品前处理不仅可用于提高数据质量，也是保护质谱仪的一种方式。非挥发性样品缓冲液会导致质谱中出现盐加合物以及分子量计算不准确。这种盐还会快速污染离子源，甚至在仪器内部中进一步降低灵敏度并造成仪器停机清洁。花费 10–15 分钟从样品基质中除去盐，或将样品交换到 MS 兼容的挥发性缓冲液中，可以提高质量准确度并保护仪器。

对合成寡核苷酸快速脱盐

对于详细表征、配制或大分子寡核苷酸 HPLC，通过离子对反相或强阴离子交换进行纯化是获得高纯度样品的关键。但对于某些应用（如微阵列芯片、测序）中使用或作为 qPCR 引物中使用的小分子寡核苷酸（约 36 个碱基或更少），采用快速简单的脱盐步骤，即合成、剪切和脱盐保护步骤去除小分子副产物就已经足够。

确保使用 InstantPC 标记的多聚糖实现灵敏的 N- 糖分析

使用 InstantPC 试剂盒的 Agilent AdvanceBio Gly-X N- 糖前处理可在最短一小时内完成样品释放和 N- 糖标记。为获得这一多聚糖分析的理想分析灵敏度，需要将起始糖蛋白溶于相容缓冲液中。InstantPC 与伯胺反应标记游离 N- 糖，因此含有伯胺的任何缓冲液将与多聚糖发生竞争标记。将缓冲液快速交换为非伯胺缓冲液（如 HEPES），有助于确保用户获得尽可能高的灵敏度。

AdvanceBio 脱盐产品有什么优势

在 10–15 分钟内完成样品前处理

用于分子量超过 5 kDa 的蛋白质、大于 10 个碱基对的寡核苷酸或核苷酸

有三种产品形式：样品体积 < 100 µL 或 < 1000 µL 的单个离心柱，以及样品体积 < 50 µL 的 96 孔板

< 100 µL 的样品达到 99% 盐去除，< 1000 µL 的样品达到 > 95% 盐去除，样品回收率 > 90%

在 pH 2.0–13.0 范围内稳定

兼容所有常用缓冲液，以及浓度高达 0.2 mol/L NaOH、0.2 mol/L HCl、1 mol/L 乙酸、8 mol/L 尿素、6 mol/L 盐酸胍、1% SDS、24% 乙醇、30% 丙醇或 30% 乙腈的溶液

工作原理

凝胶过滤或体积排阻色谱法（SEC）是一种基于分子大小的分离方法。在这种情况下，使用凝胶过滤进行组分分离，将高于截留分子量的样品组分与低于截留分子量的所有组分分离。大于 5 kDa 的蛋白质或长度超过 10 nt 或 bp 的寡核苷酸太大，无法有效地进入颗粒的孔隙结构，因此作为一个组分首先洗脱。较小的基质组分和缓冲液盐可以更有效地进入到颗粒的小孔中，从而保留在色谱柱上。

使用 AdvanceBio 离心柱（< 1000 µL）

部件号 1980-1105 中包含的半制备级离心柱旨在用于 50 mL 离心管：一个用于清洗步骤，另一个用于收集样品。如图所示，离心柱通过一个白色的塑料小适配器固定在样品瓶顶部。部件号 1980-1105 每包包含四个可重复使用的适配器。还可通过部件号 1980-1106 额外订购 8 个适配器。如果您需要离心管，安捷伦提供两种包装规格，部件号 5610-2049，25/包和 190065200，500/包。

使用 AdvanceBio 离心 96 样品板

高通量 96 样品板需要单独的 96 孔板进行清洗和样品收集步骤。对于清洗步骤，我们建议使用部件号 5043-9308；对于样品收集步骤，我们建议使用 V 形 96 样品板，如 5043-9312。离心期间，AdvanceBio 离心 96 样品板将堆叠在清洗或样品收集板的顶部，因此请确保离心机可以容纳堆叠后的孔板（高 5.1 cm）。