液相色谱条件(1):使用碱性流动相
质谱分析
组织提取物的样品制备
图1给出了108种标准强极性细胞代谢物的总离子色谱图(TIC),其中包括氨基酸、DNA/RNA碱基及其磷酸盐、辅酶A、B族维生素、有机酸等。此项试验通过联用沃特世Synapt HDMS(正离子MSE模式下)的沃特世UPLC【液相色谱条件(1)】而进行。
在UPLC优化过程中进行的标准品分析表明使用酸性pH的流动相缓冲液可提高对氨基酸和有机酸的分辨率、信噪比和峰对称性。图3比较了对一种包含约2µg/mL L-赖氨酸的纯氨基酸溶液所得出的两幅MRM色谱图。靠上的色谱图通过使用碱性流动相(液相色谱条件1)所进行的分离而得出,而靠下的色谱图则采用酸性流动相(液相色谱条件2)。
图3. 比较不同pH下,包含约2µg/mL L-赖氨酸溶液的两幅MRM色谱图
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