仪器信息网讯 2018年10月31日，世界著名生物制药工业和实验室解决方案提供商——赛多利斯（Sartorius），在第九届慕尼黑上海分析生化展(analytica China 2018)上推出了全新的arium® mini essential超纯水系统。仪器信息网现场采访了赛多利斯全球纯水产品负责人Frank Gatzemeyer先生，请他介绍了新产品特点和赛多利斯的纯水技术。详情请点击观看下方视频：以下为采访实录：仪器信息网：赛多利斯纯水系统目前一共有comfort、pro、advance、mini四个系列，为什么推出arium mini essential这款产品？新产品最大的特色是什么？Frank Gatzemeyer：基于对arium® mini系列的优化升级，我们推出了arium® mini essential。原mini系列的机型需要以自来水供水，而mini essential可以直接连接预处理水管路。这意味着用户可以将所有配备预处理水管路自由连接至这台超纯水机，给水压力可达7 bar。这就是我们为arium® mini升级的设计初衷。仪器信息网：arium® mini essential主要针对的客户群体是哪些？Frank Gatzemeyer：在我们最初的新品计划中，是以价格定位为考虑，推出一款面向学术研究领域用户的产品。但我们也获得了一些来自生物制药行业、制药行业对于这款产品的良好反馈。这些数据表明，arium® mini essential不仅可以应用于科研院校，对制药与生物制药的客户而言，这款产品也非常适合。arium® mini essential的产水水质可以满足所有行业应用，但更适合的是那些每天超纯水用量在10-15升之间的用户。这就是这款产品的用户定位。仪器信息网：赛多利斯为何重视纯水机市场？您怎样看待中国纯水机市场？Frank Gatzemeyer：众所周知，Sartorius对于很多技术都有专业的经验。Sartorius是一家成立于1870年的历史悠久的公司，2年前我们举行了145周年庆典。多年来，我们在电子设备和过滤纯化方面有着丰富的经验。这意味着我们不仅可以着眼于称重及过滤纯化，我们还可以将电子设备和过滤纯化这两个有竞争力的技术集成到一个系统上，也就是我们的实验室纯水机产品。将我们了解并掌握的各个领域的技术整合到一起，形成同样有竞争力的新系统。关于中国市场，不管对于实验室纯水系统还是所有产品线来说，中国是全球增长最快的市场。所以公司对中国市场做了非常多的投入。在下一个5年投入中，Sartorius将给予中国市场更多资源和销售政策上的支持，甚至可以为中国市场定制产品。因为我们相信，中国市场对实验室纯水系统乃至Sartorius公司的未来至关重要。  仪器信息网：众所周知，技术是一个企业发展的灵魂，赛多利斯如何保持技术创新来增强企业的核心竞争力？Frank Gatzemeyer：创新通常是由用户需求所驱动的。Sartorius设立了一个新的部门——Reginal Business Manager。他们会听取客户的声音，将其汇总反馈至研发部门。他们将拜访大量的客户现场，总结和发现一线的用户痛点、用户需求，反馈给研发部门和产品经理们。以此推动Sartorius的技术创新。创新相当重要，它让我们的产品不断进步。没有创新意识的公司，无法真正满足客户需求。创新是最重要的驱动力。正式因为如此，我们要构造一个以创新为基础的结构，来支持Sartorius的未来。arium® mini essential超纯水系统arium® mini essential是一款灵活的实验室紧凑型超纯水系统，由高质量材料和纯化元件制造。拥有彩色触摸显示屏、 Aqua Stop漏水保护系统，适合于每日用水量较小、水质要求较高的实验室。无储水单元设计，可直接连接至实验室去离子水供水管线。精巧的设计可为用户带来可靠的水质和用水体验。

颇尔(Pall)母公司丹纳赫(Danaher) 认为“大分子动力”支撑着Pall公司持续两位数的季度增长;另一家生物工艺供应商赛多利斯(Sartorius)在营收和利润方面均实现了两位数的增长。　　颇尔(Pall)母公司丹纳赫(Danaher)的首席执行官Tom Joyce在最近的第三季度财务电话会议上对股东们表示:“Pall当季业绩不错，核心收入实现了两位数的增长。”　　“特别是，我们的生物技术业务，包括一次性技术，在本季度增长了15%左右。”颇尔AllegroTMSTR 一次性搅拌罐式生物反应器　　Danaher在第三季度总销售额达48.5亿美元，同比增长7.1%。EvercoreISI分析师Ross Muken在报告中称，Danaher的业绩是"一段时间以来最好的季度表现之一"。　　Pall的贡献尚不明确，但整个生命科学领域的销售额为16亿美元，比去年增长9.5%。2015年，Danaher以136亿美元收购了这家生物工艺设备和耗材供应商。　　乔伊斯说:“我们在加速和全力创新，在加强商业活动和降低成本方面取得了巨大进展。”　　他继续说:“自收购以来的三年时间里，Pall公司每年节省的成本已超过两亿五千万美元，已经超出五年节省三亿五千万美元的目标。 Pall已经将部分成本节省下来，并重新投入到研发和销售活动中，帮助其将自收购以来推出的新产品年收入翻了一番，并将市场知名度提高了50%。”　　赛多利斯与一次性技术　　在过去的几年里，Pall和其他的生物工艺供应商一起，在成长同类公司中有持续性的增长，这反映了大量的生物公司通过临床走向商业化。一次性设备在业内的使用也是一个促成因素，Joyce也在电话中提到“一次性使用技术的巨大优势”。　　同样，德国生物工艺供应商Sartorius将2018年前9个月生物工艺解决方案部门14.8%的收入增长归因于“对设备和一次性产品的强劲需求”。总销售额内部部门为8.43亿欧元(9.61亿美元)。　　在一次性使用需求的支撑下，该公司正在波多黎各扩建一家生产一次性使用塑料袋和过滤器的工厂。受到美国市场强劲需求的推动，今年6月，该公司在Yauco的工厂投资1亿美元，将使生物制造行业的一次性塑料袋和膜过滤器的产量翻倍。赛多利斯Flexsafe细胞培养袋两位数增长!　　Pall和Sartorius均在财务报表中强调了各自在生物工艺技术领域的两位数增长幅度。　　2017年，Sartorius和Pall以及竞争对手Thermo Fisher在该领域呈现出块状的分布，销售额增幅降至个位数。但是这两家公司在2018年第二季度宣布“回归常态”，而其他供应商也都报告了两位数的增长。　　乔伊斯认为，这种增长是可持续的，因为“‘大分子动力’是我们增长的基础”。　　他对投资者表示:“有350种药物正在进入中国市场，事实上有更多的药物正在源源不断的进入。我们认为，这预示着大分子药物生产和开发的长期增长轨迹，肯定会使Pall的生物技术业务受益，更会广泛地促使我们在其他生命科学业务中受益。

2018年10月31日, 慕尼黑上海分析生化展隆重开幕。在此次盛会上, 赛多利斯盛大发布了arium mini essential新型超纯水系统。赛多利斯实验室产品及服务大中华区销售负责人卢莉琼女士和全球纯水产品负责人Frank Gatzemeyer先生共同为新产品揭开神秘面纱，开启了实验室纯水系统的新纪元。   卢莉琼女士表示：赛多利斯作为一个历史悠久且有着深厚技术沉淀的德国企业，很多技术都处于世界领先地位。公司凭借着超过八十年开发最佳过滤技术的经验，为各行各业提供最先进的实验室纯水系统，不断满足和超越您的质量标准。秉持着设计的最高境界---简约而不简单，赛多利斯mini水机家族又添一员虎将，将简洁与简便发挥到极致，同时又能最大限度的保证水质的可靠性。 Frank Gatzemeyer先生为现场观众和媒体朋友们介绍了arium mini essential超纯水系统的特点和性能：- 系统由高质量材料和纯化元件制造。- 拥有彩色触摸显示屏、Aqua Stop漏水保护系统，适合于每日用水量较小、水质要求较高的实验室。- 无储水单元设计，可直接连接至实验室去离子水供水管线。- 精巧的设计可为用户带来最可靠的水质和美妙的用水体验。  随后, 就新产品优势和市场前景等方面，Frank先生和卢莉琼女士共同回答了媒体提问。         卢莉琼女士、Frank先生与新品arium mini essential超纯水系统合影。  关于赛多利斯赛多利斯集团是国际领先的制药和实验室设备供应商，包含两大业务部门：生物工艺部门和实验室产品与服务部门。生物工艺部门拥有广泛的产品组合，主要致力于一次性使用解决方案，帮助客户安全有效地生产生物技术药物和疫苗。实验室产品与服务部门则通过其优质的实验室仪器、耗材和服务，为实验室研究、制药和生物制药的质量保证以及学术研究机构提供产品和服务，满足其需求。公司成立于1870年，总部位于德国哥廷根，在全球设有50多个生产和销售基地。 联系我们                         电话：400.920.9889 / 800.820.9889 传真：021.68782332 邮箱：info.cn@sartorius.com官网：www.sartorius.com.cn 想获取更多活动和技术信息吗？关注“赛多利斯实验室”官方微信，了解更多 

——简洁自由的超纯水解决方案-可直接连接至去离子水供水管线-提供始终如一的高质量超纯水-无储水单元，水质更安全，容量更自由赛多利斯（Sartorius），作为国际领先的实验室产品与服务的供应商，推出了全新的arium® mini essential超纯水系统。该系统是制备生命科学应用和分析实验室配制缓冲液、培养基和试样的理想之选。超纯水是分析的基础。随着分析方法却变得越来越灵敏，分析实验中更容易受到干扰。而始终如一的出色水质可确保实验结果具有可重复性，并避免重复分析的工作量。对于日益繁重的分析工作而言，结构更简洁、使用更便捷、品质更可靠的超纯水方案，成为越来越重要的需求。针对这一需求，赛多利斯（Sartorius）开发了arium® mini essential超纯水系统。该系统在原有的紧凑型arium® mini系列超纯水系统的基础上，将简洁与简便发挥到极致，并且最大限度的保证了水质的可靠性。arium® mini essential超纯水系统的极简设计，无任何储水单元，可直接连接至反渗透、蒸馏或去离子预处理供水管线，通过采用自上而下流动技术的去离子纯化柱arium® Scientific Pack即可生产符合ASTM标准的Ⅰ级超纯水。并配有arium® SterilePlus终端过滤器，在最后的水净化步骤中可靠去除大于0.2μm的颗粒和微生物；或选配arium® CellPlus 超滤器以高效去除内毒素、核糖核酸酶、脱氧核糖核酸酶、微生物和颗粒。可选的双波长紫外灯，使超纯水TOC含量达到≤5ppb，满足更高要求的分析实验应用。基于业内最简洁的结构，arium® mini essential超纯水系统依然能以高达1L/min的配水流速生产符合ASTM级别的I级超纯水。宽度仅为28cm的小巧体积，最大限度节省宝贵的实验室空间。不仅彻底省去储水单元的耗材更换及维护工作，整机所需维护的耗材仅包括纯化柱、紫外灯（选配）、终端滤器，将耗材维护工作简化到极致。并且完美兼容arium® mini及arium® mini plus的所有耗材及配件。arium® mini essential超纯水系统独创的直接连接预处理供水管线的设计，安装更便捷高效的同时，避免所有中间环节所可能造成的水质污染，提供更新鲜更安全的实验室超纯水。赛多利斯凭借超过八十年开发最佳过滤技术的经验，为您提供最先进的实验室纯水系统，旨在满足和超越您的质量标准。关于赛多利斯赛多利斯集团是国际领先的制药和实验室设备供应商，包含两大业务部门：生物工艺部门和实验室产品与服务部门。生物工艺部门拥有广泛的产品组合，主要致力于一次性使用解决方案，帮助客户安全有效地生产生物技术药物和疫苗。实验室产品与服务部门则通过其优质的实验室仪器、耗材和服务，为实验室研究、制药和生物制药的质量保证以及学术研究机构提供产品和服务，满足其需求。公司成立于1870年，总部位于德国哥廷根，在全球设有50多个生产和销售基地。联系我们                         电话：400.920.9889 / 800.820.9889传真：021.68782332邮箱：info.cn@sartorius.com官网：www.sartorius.com.cn想获取更多活动和技术信息吗？关注“赛多利斯实验室”官方微信，了解更多 

　　近年来，在全球生物制药行业稳步发展的大背景下，我国生物制药行业发展正如火如荼，研发投入、生产能力、产业集中度均进一步提升。同时，国家政策积极，出台了一系列优惠政策，为我国生物制药产业发展提供了良好的大环境。为了帮助来自生物制药领域的用户学习、了解生物制药研发、生产、质量控制各工作流程中的创新解决方案，以提升生物制药用户的工作效率和质量，仪器信息网特别策划了“生物制药创新解决方案”系列采访。　　数据分析对生物制药具有重要意义。应用高级数据分析技术能够帮助企业发现药物研发、生产过程中不易被察觉的问题，从而提高产品开发、工艺开发和制造工艺的效率、最佳性能和盈利能力。本期，仪器信息网在上周举行的“生物制药创新研讨会”期间采访了赛多利斯高级数据科学家David Wang、产品应用专家王琦。赛多利斯高级数据科学家David Wang(左)、产品应用专家王琦(右)　　仪器信息网：生物工艺的稳定生产是指什么?难点有哪些?　　David Wang：从工艺角度看，简单地说，稳定生产指生物工艺过程变量及物料参数在一定范围内变化或波动时，生产的产品质量不会因此受到影响。难点在于如何定义和寻找这些变量和参数的范围及如何在生产中保证它们。传统的单一因素方法通常只考虑一个参数对产品的影响，而生物工艺过程往往非常复杂，它涉及到培养基的不同批次来源、细胞的接种密度、pH的变化趋势，甚至外界的温湿度等影响。蛋白的表达是一系列物理、化学和生物反应的最终体现，它们之间存在着千丝万缕的联系，单一因素的分析很有可能会顾此失彼。因此，我们需要更多的应用在线分析的技术和统计学工具寻找这些众多变量的范围和相互关系，以及它们之间对生产的影响。　　仪器信息网：这里提到的统计学工具通常指的是什么?它是如何实现稳定生产的呢?　　David Wang：这里的统计学软件通常指的是DoE和MVDA的概念。法规层面看，今年NMPA加入ICH，而ICH Q8中明确提出需要使用DoE和MVDA的统计学概念，给出生产工艺参数的操作空间以保证药品的质量，所以这将逐渐成为未来发展的主流。而从工艺层面看，DoE通过系统化的实验设计方案，以最小的实验量找出满足生产结果的参数设计空间和稳定操作点，保证最终结果满足要求的概率大于99%。MVDA是相对于单变量分析而言，它不仅会考察每个变量，而且会考察变量之间的交互作用， 及变量和时间对结果的影响。一个生产工艺往往持续2周甚至更长的时间，这个过程我们会获取到海量的数据，如何将这些大数据转化为我们可用的信息呢?MVDA会建立初始变量、大量过程变量以及其他变量与产品质量之间的逻辑关系，也就是模型，了解造成每一个最终产品质量变化的最终原因以及预防策略，及时纠正可能造成偏差的变量，从而确保稳定生产。　　仪器信息网：赛多利斯在实现稳定生产方面有什么样的软件解决方案呢?　　王琦：Sartorius Umetrics Suite提供MODDE和SIMCA两款DoE和MVDA的软件。MODDE不同于传统的DoE软件只解决因子筛选和条件优化的目的，它能够在此基础上通过统计学的方法模拟运算出每个实验结果的成功概率，给出满足产品质量的最稳定点作为设定点。另外，最终结果以图形化的形式呈现，而不是枯燥难以理解的数字和表格，让客户能够轻松识别变量或参数的设计空间和操作空间，易于理解。而MVDA中采用PCA、PLS、OPLS和O2PLS等数学模型，将生产的各个合格批次的所有变量信息整合成一个汇总的变量及其变化趋势，也就是将多维的数据降维成二维或者一维数据信息，建立变量随时间变化的模型和黄金批次，给出这个汇总变量的统计学变化范围，通常可设为正负3个SD，这样就能将复杂的生物工艺过程简单化。如果将SIMCA接入客户的数据库，那么生产中所有变量将同时进入软件服务器，经过模型处理后，以可视化的图形显示出来，通过对比已建立的黄金批次范围，判断此刻生产是否符合要求，最终实现稳定生产。

仪器信息网讯 上周，由中国食品药品国际交流中心主办、赛多利斯协办的“生物制药创新研讨会”在上海成功召开。两天的会议吸引了生物制药领域300多名行业专家和从业人员与会交流，对市场研究、法规监管及上下游生产工艺等方面存在的问题和挑战展开了深入讨论，收获颇丰。下面就让我们一起来看看本次会议有哪些精彩内容吧!研讨会现场2020年中国生物医药市场规模将达日本两倍中国生物医药市场正迎来高速发展，仅2016中国医院生物医药市场规模就高达780亿美元，这其中不包括基层医疗和零售渠道的份额。在2014年，中国超过日本，成为世界第二大生物医药市场，预计到2020年，中国生物医药市场规模会是日本的两倍。近年来，国家出台了一系列政策、规划，政府导向无疑将成中国生物制药快速发展的重大利好因素。《中国制造2025》中，生物医药被列为十个重点领域之一。其中提到将发展针对重大疾病的生物技术药物新产品，重点包括新机制和新靶点抗体药物、抗体偶联药物、全新结构蛋白及多肽药物、新型疫苗。“十三五计划”也把医药新技术突破作为重点发展方向之一。“健康中国2030规划” 也重点提到促进医药产业发展，国家预计在2030年医疗健康产业规模将达到25000亿美元。目前，我国生物药占比相对较低，大概占整个医药市场的10%，低于全球平均水平（20%）。其中，2016年中国生物制剂CDMO市场规模达3亿美元，但受国家政策和越来越多生物药上市的驱动，到2020年预计会达到15亿美元，增速非常快，市场潜力非常大。以上观点来自BCG Healthcare Practice资深董事经理胡奇聪博士题为 “中国的生物制药格局和核心成功要素”报告。BCG Healthcare Practice资深董事经理 胡奇聪监管者如何审评药品产地变更？原国家食品药品监督管理总局药品审评中心生物制品药学部高级审评员魏开坤博士应邀参加此次研讨会，作“药品生产场地变更的研究和评价”的主题报告，从审评工作者的角度探讨了如何理解质量源于设计的理念、药品生产场地变更和新药研发与生产技术转移的监管考量等问题。药品生产场地变更与药品质量密切相关，是药品上市后变更的常见情形之一。已上市药品的生产技术转让、委托生产、企业兼并重组、异地搬迁、改建扩建等情况下，涉及药品生产场地变更都要开展研究验证与注册申报工作。药品生产场地变更一般应遵循以下原则：一，质量源于设计原则；二，风险管理原则；三，质量同等性原则；四，GMP符合性原则。魏开坤博士透漏，国家监管部门鼓励创生物制药企业去更多尝试创新生产工艺。原国家食品药品监督管理总局药品审评中心生物制品药学部高级审评员 魏开坤如何成功获批临床研究申请（IND）？Latham Biopharm总经理Susan Dexter女士作“美国市场的IND展望”主题报告，分享了在美国申请IND的成功经验。成功申请IND的要点就在于：在创新药物研发早期CMC阶段就应恰当规划应准备和应规避的内容，同时还要实现简单的中期放大和技术转移。企业应该对药品的方方面面都建立准则，认真记录和验证，比如稳定性数据、药品物质说明、药品规格、温度、湿度、储存条件、包装说明书等等。在这方面，欧洲药典是可供参考的范例。对于制药企业来说，通过借助 QbD的方法来进行工艺开发从而完成质量控制已渐成趋势。同时，Susan Dexter女士还指出，细胞基因疗法等创新生物药的研发、生产急需创新工艺技术，目前十分缺乏。Latham Biopharm总经理 Susan Dexter一次性技术成为中国生物药物生产工艺主流恒瑞医药副总经理刘洵博士作题为“一次性技术平台成为中国生物药物生产工艺主流的关键因素”的报告。一次性技术正在成为中国生物药物生产工艺主流，其优势主要有：一，对于中国生物制药不断增长的商业大规模生产来说，一次性技术具有巨大潜力；二，更加灵活，能节约建设和操作成本；三，能满足多次小批量生产的需求，节约成本。恒瑞医药副总经理 刘洵加快上市和保证质量的完整生物工艺技术策略赛多利斯集团生物工艺全球市场副总裁Stefan Schlack先生为大家带来了题为“加快上市速度和保证稳健质量的完整生物工艺技术策略”的演讲。高通量筛选、数据分析、线性缩放概念、过程强化、QbD、PAT、一次性解决方案和灵活的自动化技术平台，是提高过程开发/鉴定、放大/缩小模型验证和大规模生产效率时广泛应用的平台。将这样的战略技术平台整合应用到整个药物开发周期中，将使药物生命周期管理更加迅速和稳固。在过去几年中，赛多利斯公司开发了创新的技术与服务平台，为药物高效、可持续地应用到临床、市场和患者提供了新的前景。赛多利斯集团生物工艺全球市场副总裁 Stefan Schlack来自赛多利斯的众多科学家、工程师，也在研讨会上分享了生物制药工艺最前沿、最热门的理念、技术与解决方案，并讨论了与一次性使用技术相关的各项法规与行业标准，以及系统性的风险评估方法和最佳实践建议。从DNA到2000L商业化生产，全线连接生物工艺。题目：符合cGMP的一次性使用系统策略：对SUS风险评估管理的系统性方法沈亮，赛多利斯中国区验证服务与法规事务经理题目：通过过滤和完整性检测技术的进步实现cGMP级无菌工艺Magnus Stering，赛多利斯集团完整性测试技术全球产品经理题目：工业一次性自动化平台：将简易性和灵活性融于一体Burkhard Joksch博士，赛多利斯集团生物工艺软件产品管理负责人题目：工艺强化：经济上可负担的创新载体Kai Touw，赛多利斯生物医药市场经理谭宁，赛多利斯中国区下游产品应用支持经理题目：如何加速生物仿制药的开发王旭宇，赛多利斯集团全球生物仿制药市场负责人题目：通过从DNA到2000L培养的一次性技术平台实现QbDKai Touw，赛多利斯生物医药市场经理赵伟博士，赛多利斯平台开发团队经理题目：可持续一次性系统的实施策略Magali Barbaroux博士，赛多利斯生物工艺袋平台负责人任雪芸，一次性产品应用支持经理题目：大规模一次性系统：生产过程中的稳健性杨威，赛多利斯中国区上游产品应用支持经理谭宁，赛多利斯中国区下游产品应用支持经理题目：有效数据管理：黄金批次与实时监控David Wang，赛多利斯集团高级数据科学家现场更多精彩报告：Abzena PLC技术运营高级副总裁 Jim Mills报告题目：CDMO视角下的高通量和一次性系统生命周期理念康晟生物技术CEO 潘洪辉报告题目:设计质量：如何建立更稳健和更灵活的技术平台华兰生物副总经理 安文琪报告题目：一次性技术在单抗生产工艺中的应用上海优卡迪生物医药科技首席战略顾问 俞磊报告题目：中国基因与细胞疗法的研究现状和展望现场讨论（一）现场讨论（二）

生命科学工厂为生命科学领域的初创企业提供实验室、共享办公空间和咨询服务2019年初开始运营，2021年迁入赛多利斯园区的新办公楼享有科学之城盛誉的哥廷根将成为生命科学初创企业的腾飞之地2018年8月28日，哥廷根 —— 作为生物制药行业和研究领域的国际领先合作伙伴，赛多利斯希望通过这一新建、独立的生命科学工厂，推动生命科学领域初创企业的发展并吸引企业入驻。 生命科学工厂为未来的生命科学企业和年轻公司提供办公空间和支持，这些企业希望离开学术机构，迈出第一步。生命科学工厂基于美国成熟的示范商业模式，作为生命科学领域初创企业的孵化地，提供实验室、共享办公空间和网络方案，包括监管和公司融资服务等。公司的专业运营理念确保了有效的设施管理和行政支持、高质量实验室设备以及合格的实验室工作人员。 “无论是在德国还是其它欧洲国家，生命科学工厂的概念都是最新的”，赛多利斯执行董事会主席兼首席执行官Joachim Kreuzburg先生表示，“除了启动和发展资金以外，生命科学初创企业面临的主要问题还包括缺乏合适的实验室设施和强大的网络。灵活的开放式实验室、办公室和活动空间，有助于初创企业大胆尝试新事物，并与志同道合的同事和资深创始人一起分享人脉和经验”。生命科学工厂还将依托哥廷根在科学领域的优势，使其成为生命科学初创企业的腾飞之地。生命科学工厂是一个非营利组织，总经理是企业家兼创始人Marco Janezic和Sven Wagner，他们是赛多利斯业务开发部门的负责人，之前曾在两家生命科学初创企业工作。 生命科学工厂将与当地合作伙伴紧密合作，例如哥廷根大学、马克斯·普朗克学会和南下萨克森州创新园区、SNIC等，以及它们的相关机构。举例来说，这个非营利组织将成为欧洲最大的应用研究组织弗劳恩霍夫应用研究促进协会（Fraunhofer-Gesellschaft）举办“弗劳恩霍夫生命科学日”等活动的场所； Falling Walls基金会的年轻科学企业家们发起的活动，也将在此举行。“在这个快速变化且对社会具有重要意义的领域，哥廷根有机会、有潜力发挥更大的作用”，Kreuzburg先生说。 该非盈利组织将从2019年初开始运营：将在哥廷根内城提供超过500平方米的共享办公、实验和活动空间，企业家可以租用空间进行办公和原型开发。办公室提供了3D打印机和激光切割机等最新设备。此外，还有专利律师或成功的初创企业创始人举办的讲座，以及专门针对初创企业常见问题的其它活动。生命科学工厂产生的收益将用于推动知识转移或支持青年科学家和研究人员。 生命科学工厂计划于2021年迁入赛多利斯新园区。新的生命科学工厂总面积将超过3000平方米，成为在原赛多利斯基地上建设的新城市园区的第一批建筑。“我们之前的公司总部一直非常推崇创业精神以及将科学转化为实际工业解决方案，特别是在生命科学领域。因此，赛多利斯园区的设计将继续体现创意和创新。借助这所生命科学工厂，我们公司将继续加大长期投入，并同时缩小哥廷根内部的差距”，Kreuzburg先生如是说。 2017年底，在位于哥廷根内城的原址运营120多年之后，赛多利斯将总部迁入了哥廷根-格罗内工业区的赛多利斯园区。 关于赛多利斯赛多利斯集团是国际领先的制药和实验室设备供应商，包含两大业务部门：生物工艺部门和实验室产品与服务部门。生物工艺部门拥有广泛的产品组合，主要致力于一次性使用解决方案，帮助客户安全有效地生产生物技术药物和疫苗。实验室产品与服务部门则通过其优质的实验室仪器、耗材和服务，为实验室研究、制药和生物制药的质量保证以及学术研究机构提供产品和服务，满足其需求。公司成立于1870年，总部位于德国哥廷根，在全球设有50多个生产和销售基地。 联系我们                         电话：400.920.9889 / 800.820.9889 传真：021.68782332 邮箱：info.cn@sartorius.com官网：www.sartorius.com.cn 想获取更多活动和技术信息吗？关注“赛多利斯实验室”官方微信，了解更多

上期小编带您了解了吸头的种类，以及不同的应用需要使用的吸头类型，本期小编就带您了解一下如何更加高效的使用这些吸头并避免可能会出现的问题。 如何选购滤芯吸头？滤芯吸头是一种帮助避免交叉污染时需要用到的耗材。一般来说，使用滤芯吸头进行正向移液操作都不会有问题。可是遇到一些特殊的情况时，有些滤芯吸头就不一定适用了。部分滤芯吸头的设计并没有全面考虑到各种应用的可能性，没有在吸头中留出足够的空间。所以当您需要用反向移液这类需要吸入额外容量的液体时，或者当移取的液体富含蛋白质、容易产生泡沫时，“悲剧”就随时可能发生。您可能会发现吸液后，液体与滤芯亲密接触了。如此一来，污染仍然有蔓延的可能。部分品牌为了控制“液体与滤芯亲密接触”带来的污染风险，在吸头中设置了双滤芯，或者设计了闭合机制（当液体接触滤芯后滤芯自动封闭，使液体无法被排出），但这样仍然无法改变珍贵样品损失的事实。此时最佳的选择是购买在吸头内留出足够空间的吸头，确保即使在特殊应用中仍然能防止液体与滤芯接触的可能。请记住它的名字叫“SafetySpace”！ 低吸附吸头是什么？移液的准确性和精确性不仅对吸头与移液器是否匹配有要求，还需要适合液体特性的吸头。我们在操作中经常会发现一种现象，当使用标准吸头（PP）移取表面张力小的液体（如：含清洁剂的液体）时容易在吸头内表面留下一层薄膜。在许多DNA和蛋白质的分析方法中所用到的试剂和样品通常都含有清洁剂。因此在这类应用的实验中，液体残留较多的情况普遍存在。液体的残留会导致移液结果的不精确、不一致，同时也损失了部分昂贵的样品。研发低吸附吸头就是为了改善液体残留这个普遍的问题。不同的供应商应用不同的技术来生产低吸附吸头，因此其一致性、疏水程度、耐化学性方面各不相同。常用的低吸附吸头生产工艺有两种：物理抛光与化学涂层。前者利用抛光技术处理吸头的表面，使吸头表面变得非常光滑来减少液体的残留，能比较可靠地确保样品的安全性。但抛光时的模具在生产过程中会老化，无法保证低吸附吸头品质的一致性。而化学涂层法则是在吸头的表面加上一层疏水剂，可能存在溶出的风险，引入污染。目前最安全且可靠的是赛多利斯采用专利技术生产的低吸附吸头，帮您减少液体残留，提高样品回收率！ 吸头选择通用标准看材质：选择惰性材质的吸头，确保化学兼容性，避免溶出，目前最常用的是纯PP材质的吸头。供应商的用材好坏有一个很容易判断的标准，只要看吸头是什么颜色就能知道。“有颜色的吸头能帮您快速识别它的量程范围”——真的是这样吗？其实更重要的目的是为了掩盖不纯净的材质。用回收塑料制成的吸头中杂质会非常容易被肉眼察觉，而加入颜色后，这些杂质就会“隐形”了，所以透明的吸头通常都是用材较好的吸头。看颜值：品质好的吸头会有很高的颜值。它们表面光滑、没有毛刺、切口平整、形状均匀且笔直不弯曲，这样才能确保液体不容易残留，获得精准的移液效果。看证书：如果选购的是无热源的吸头，供应商应当提供该产品该批次的认证证书。关于赛多利斯赛多利斯集团是国际领先的制药和实验室设备供应商，包含两大业务部门：生物工艺部门和实验室产品与服务部门。生物工艺部门拥有广泛的产品组合，主要致力于一次性使用解决方案，帮助客户安全有效地生产生物技术药物和疫苗。实验室产品与服务部门则通过其优质的实验室仪器、耗材和服务，为实验室研究、制药和生物制药的质量保证以及学术研究机构提供产品和服务，满足其需求。公司成立于1870年，总部位于德国哥廷根，在全球设有50多个生产和销售基地。 联系我们                         电话：400.920.9889 / 800.820.9889 传真：021.68782332 邮箱：info.cn@sartorius.com官网：www.sartorius.com.cn 想获取更多活动和技术信息吗？关注“赛多利斯实验室”官方微信，了解更多?

移液用户在选购移液器时通常会有诸多考虑，例如精准度、手感、品牌、吸头适配性等。然而在选择吸头的时候，用户的重视程度远不如选购移液器之时。其中不乏花大价钱买进口移液器，却省吃俭用买耗材的。事实上，吸头的好坏对移液精准度会有不小的影响。那到底如何选购吸头呢？听小编为您娓娓道来~ 吸头作为与移液器配合使用的耗材，一般根据应用的不同可分为：标准吸头、滤芯吸头、低吸附吸头。标准吸头是应用最为广泛的吸头，几乎所有移液操作都可使用普通吸头，这是吸头中最经济实惠的一类。滤芯吸头是为了避免交叉污染而设计的一种耗材，常被用于分子生物学、细胞学、病毒学等实验中。对于灵敏度要求高的实验，或者易残留的珍贵样品或试剂，可以选择低吸附吸头来提高回收率。低吸附吸头的表面经过了疏水处理，能降低低表面张力液体在吸头中留有较多残留的情况。 “只要能装上的吸头就是能用的吸头”——这几乎是所有用户对吸头适配性的普遍认知。这个说法可以说部分对但又不完全对。能装到移液器上的吸头的确能与移液器组成移液体系来实现移液功能，可是这样是否可靠呢？此处需打个问号。回答这个问题需要用数据来说话。您不妨将移液器与吸头匹配后进行性能测试。润洗吸头后进行若干次重复的加样操作，称量每次的加样量，并记录读数。根据测试液体的密度折算成体积后再计算移液操作的准确度和精确度。我们要选择的是具有良好精确度的吸头。如果移液器与吸头匹配使用精确度不佳，则说明吸头与移液器的密封性得不到保证，使得每次操作的结果都不可重现。切忌使用这样的吸头！当然，最高效的方法就是直接选购原厂吸头！关于赛多利斯赛多利斯集团是国际领先的制药和实验室设备供应商，包含两大业务部门：生物工艺部门和实验室产品与服务部门。生物工艺部门拥有广泛的产品组合，主要致力于一次性使用解决方案，帮助客户安全有效地生产生物技术药物和疫苗。实验室产品与服务部门则通过其优质的实验室仪器、耗材和服务，为实验室研究、制药和生物制药的质量保证以及学术研究机构提供产品和服务，满足其需求。公司成立于1870年，总部位于德国哥廷根，在全球设有50多个生产和销售基地。 联系我们                         电话：400.920.9889 / 800.820.9889 传真：021.68782332 邮箱：info.cn@sartorius.com官网：www.sartorius.com.cn 想获取更多活动和技术信息吗？关注“赛多利斯实验室”官方微信，了解更多

升级移液装备，刻不容缓！Picus®精密符合人体工程学Picus® NxT   符合人体工程学、 高效安全Picus 电动移液器Picus NxT 电动移液器符合人体工程学设计，最小最轻的电动移液器简化工作流程，提速移液工作最小化人为误差，获得可靠结果高阶版Picus 电动移液器符合规范性实验室要求自定义方案设计，进一步简化重复设置，提升工作效率即日起至2018 年9 月30 日，凡购买Picus 系列电动移液器（包含Picus 和Picus NxT）时提供以下列表中的产品作为抵扣，即可参与以旧换新优惠购活动。具体抵扣价格如下：赛多利斯移液器抵扣优惠详情回收产品通道数抵扣金额Picus/eLINE 电动移液器单通道8 通道12 通道1200 元1600 元2000 元赛多利斯Sartorius（或百得Biohit）其他电动移液器mLINE 以上系列手动移液器单通道8 通道12 通道800 元1000 元1200 元其他进口品牌电动移液器抵扣优惠详情回收产品通道数抵扣金额艾本德Eppendorf 电动移液器吉尔森Gilson 电动移液器瑞宁Rainin 电动移液器热电Thermo 电动移液器单通道8 通道12 通道400 元500 元600 元其他进口品牌电动移液器单通道8 通道12 通道200 元250 元300 元 活动须知回收的移液器与新选购的移液器需通道数一致，方可抵扣。抵扣金额参考上表。符合上表品牌型号要求，不论完好、破旧或者损坏的移液器均可参加以旧换新抵扣优惠活动。破旧或损坏的移液器需确保整体结构完好，且品牌及型号等信息清晰可辨认。更多活动详情，请咨询赛多利斯销售代表及授权合作伙伴。赛多利斯对此活动保留最终解释权。关于赛多利斯赛多利斯集团是国际领先的制药和实验室设备供应商，包含两大业务部门：生物工艺部门和实验室产品与服务部门。生物工艺部门拥有广泛的产品组合，主要致力于一次性使用解决方案，帮助客户安全有效地生产生物技术药物和疫苗。实验室产品与服务部门则通过其优质的实验室仪器、耗材和服务，为实验室研究、制药和生物制药的质量保证以及学术研究机构提供产品和服务，满足其需求。公司成立于1870年，总部位于德国哥廷根，在全球设有50多个生产和销售基地。 联系我们                         电话：400.920.9889 / 800.820.9889 传真：021.68782332 邮箱：info.cn@sartorius.com官网：www.sartorius.com.cn 想获取更多活动和技术信息吗？关注“赛多利斯实验室”官方微信，了解更多

 一次性使用技术具有降低交叉污染、高度灵活、缩短生产批次间隔时间等诸多优点，由此备受市场喜爱。在终端灌装工艺步骤，越来越多的制药企业也在选择使用一次性使用技术。那么，针对终端灌装步骤，如何设计出即保障高效灵活、节约成本又完美符合法规要求的一次性完整解决方案？本期网络讲堂将以终端制剂过程中一次性工艺解决方案为切入点，结合风险评估方法，从用户需求、方案设计、技术参数以及产品质量要求等方面，多角度呈现一次性使用技术在终端制剂过程中的完整解决方案。【讲师介绍】刘国瑞赛多利斯中国区一次性技术应用专家长春生物制品研究所硕士，多年GMP车间工作经验。曾致力于生物制药工艺研究与开发。现主要负责一次性技术在上下游及终端制剂灌装等完整工艺流程中一次性技术的应用支持。近两年来尤其专注生物制药领域制剂灌装步骤中一次性工艺完整解决方案的研究及风险评估。 【讲座时间】2018年9月18日 13:30-14:30立即报名*打开页面后请点击“注册”进行预约报名。 【小贴士】1. 如为手机听课，请先在手机应用中心下载Webex APP，即可随时随地使用手机上网参与讲堂。2. 如为电脑听课，不能正常安装软件时，请点击“启动临时应用程序”。 【网络讲堂联系人】赛多利斯市场部 孙女士电话：021-68785131邮箱：webinar.sa@sartorius.com  关于赛多利斯斯泰帝 赛多利斯斯泰帝 (Sartorius Stedim Biotech) 是国际领先的生物制药行业设备和服务的供应商，为全球生物制药的开发与生产提供安全、及时、经济的一体化解决方案。作为完整解决方案的供应商， 赛多利斯斯泰帝提供几乎涵盖生物制药工艺所有步骤的产品组合。公司致力于推广一次性使用技术和增值服务，满足生物制药行业快速发展的技术需求。公司总部位于法国欧巴涅，在巴黎的欧洲交易所上市；因其位于欧洲、北美和亚洲的生产与研发中心以及遍布全球的销售网络而享誉世界。  联系我们                    电话：400.920.9889 / 800.820.9889 传真：021.68782332 邮箱：info.cn@sartorius.com官网：www.sartorius.com.cn 想获取更多活动和技术信息吗？关注“赛多利斯生物工艺”官方微信，了解更多  

中国食品药品国际交流中心将于2018年9月19-20日在上海举办生物制药创新研讨会。本次会议将以“从DNA到商业化生产，全线连接生物工艺”为主题，深入研讨最新监管法规、未来趋势、创新生物工艺技术和分子生命周期管理等议题。届时，会议将邀请药监部门、国内外知名制药企业专家发表专题演讲，深入介绍最新监管法规和未来趋势，并就最新的生物工艺技术和分子生命周期管理理念进行广泛探讨。加入这场无法抗拒的技术盛宴，同我们一起探究法规动向，交流最新技术应用与经验，破解工艺瓶颈。会议组织主办：中国食品药品国际交流中心协办：赛多利斯大咖齐聚，聚焦热点如何从监管角度看待生物制药产品生命周期管理魏开坤国家食品药品监督管理局药品审评中心专家美国市场的IND展望Susan Dexter总经理        Latham Biopharm GroupCDMO视角下的高通量和一次性系统生命周期理念Dr. Jim Mills技术运营高级副总裁，Abzena PLC中国的生物仿制药：需要考量的技术因素刘洵副总经理，江苏恒瑞医药有限公司CAR-T和抑制免疫检查点联合免疫治疗淋巴瘤策略探讨俞磊博士首席战略顾问 ，上海优卡迪生物医药科技有限公司设计质量：如何建立更稳健和更灵活的技术平台潘洪辉博士CEO，康晟生物技术一次性技术在单抗生产工艺中的应用安文琪副总经理，华兰生物工程股份有限公司中国的生物制药格局和核心成功要素胡奇聪博士     资深董事经理，BCG Healthcare Practice生物工艺策略和新型高通量技术平台Stefan Schlack生物工艺全球市场副总裁，赛多利斯集团如何加速生物仿制药的开发？王旭宇全球生物仿制药市场负责人，赛多利斯集团通过过滤和完整性检测技术的进步实现cGMP级无菌工艺Magnus Stering完整性测试技术全球产品经理，赛多利斯集团有效数据管理：黄金批次与实时监控David Wang高级数据科学家，赛多利斯集团工业一次性自动化平台：将简易性和灵活性融于一体Burkhard Joksch博士生物工艺软件产品管理负责人，赛多利斯集团符合cGMP的一次性系统策略：对SUS风险评估管理的系统性方法沈亮法规事务经理，赛多利斯中国区  更有中外技术专家强强联合演讲，从不同视角阐述最新技术与应用可持续一次性系统的实施策略Magali Barbaroux博士    生物工艺袋平台负责人 ，赛多利斯集团任雪芸      一次性产品应用支持经理，赛多利斯中国区工艺强化：经济上可负担的创新载体Kai Touw        工艺开发顾问      赛多利斯集团谭宁   下游产品应用支持经理    赛多利斯中国区通过从DNA到2000L培养的一次性技术平台实现QbDKai Touw     工艺开发顾问      赛多利斯集团赵伟博士   工艺开发团队经理   赛多利斯中国区大规模一次性系统：生产过程中的稳健性杨威    上游产品应用支持经理    赛多利斯中国区谭宁    下游产品应用支持经理    赛多利斯中国区会议信息时间：2018年9月19日  9:00-17:45        2018年9月20日  9:00-17:00地点：上海浦西（具体地址定向通知参会代表）参会对象 单克隆抗体、疫苗、重组蛋白、血液制品等生物制药企业及研究机构的研发、质量、生产及管理人员。参会方式本次会议免注册费，参会代表住宿及交通费用自理。由于名额有限，每家企业单位至多提供两个参会名额。立即报名  报名截止日期为2018年9月12日。注：报名成功后，我们会在十个工作日与您进行邮件确认，请以确认邮件为准。本次会议不接受现场报名。会议联系张女士    电话：021-68785302     E-mail: wenji.zhang@sartorius-stedim.com  关于赛多利斯斯泰帝 关于赛多利斯斯泰帝 赛多利斯斯泰帝 (Sartorius Stedim Biotech) 是国际领先的生物制药行业设备和服务的供应商，为全球生物制药的开发与生产提供安全、及时、经济的一体化解决方案。作为完整解决方案的供应商， 赛多利斯斯泰帝提供几乎涵盖生物制药工艺所有步骤的产品组合。公司致力于推广一次性使用技术和增值服务，满足生物制药行业快速发展的技术需求。公司总部位于法国欧巴涅，在巴黎的欧洲交易所上市；因其位于欧洲、北美和亚洲的生产与研发中心以及遍布全球的销售网络而享誉世界。  联系我们                    电话：400.920.9889 / 800.820.9889 传真：021.68782332 邮箱：info.cn@sartorius.com官网：www.sartorius.com.cn 想获取更多活动和技术信息吗？关注“赛多利斯生物工艺”官方微信，了解更多 

是否提供无热源的超滤管建议用Turbo系列，用1N NaOH溶液室温浸泡1小时，3000g离心，弃去剩余溶液。在使用无热源水3000g冲洗两次注意，赛多利斯超滤离心管系列，只有Turbo可以进行上述操作，而其他材质的膜，要考虑对NaOH的耐受性。比如，相对于RC膜，经过NaOH处理后，将会影响过滤速度和回收效果。 需要浓缩到一定的倍数？其实可以通过超滤管控制首先，Vivaspin超滤管有最小回收体积，保证至少回收30ul的样本，并且不会让过长的离心时间导致样品离干。另外，如果需要浓缩一定的倍数，使用超滤管也可以直接完成，不需要另外的步骤。首先，预先计算外管液体达到滤过孔的刻度线的位置需要的体积，然后减去样品要滤出的体积，就是需要预先加入外管的缓冲液的体积。先在外管中加入计算得到的缓冲液，待滤出液的体积流入外管缓冲液中，使液面达到滤出孔，则样品不再浓缩，浓缩倍数得到了固定，看，样品浓缩就是那么简单！ 可以用超滤管分离外泌体吗答案是可以的，除此之外核酸，纳米微球颗粒，多糖，病毒都可以用超滤的方法，而且超滤不会破坏外泌体的结构。对于外泌体，推荐使用过滤设备进行杂质去除（Minisart或Sartolab RF/BT系列），然后用超滤设备（Vivaspin或Vivaflow系列）进行外泌体的浓缩。具体步骤如下：收集培养液，离心去除细胞和细胞碎片后，使用0.2um针头式滤器（Minisart系列，适合1-100mL样品）或正压/负压过滤器（Sartolab RF/BT系列，适合100-15,000mL样品）过滤去除囊泡等大颗粒物质样品使用Vivaspin超滤管（≤20mL），Vivacell超滤杯（20-250mL），或vivaflow 膜包（100ml-5L）超滤制备外泌小体。 其实已经有很多前辈用Vivaspin超滤管收集外泌体了，参考文献： 【1】Robert Gastpar, Mathias Gehrmann,Maria A. Bausero,Heat Shock Protein 70 Surface-Positive Tumor Exosomes Stimulate Migratory and Cytolytic Activity of Natural Killer Cells, Cancer Res 2005; 65: (12). June 15, 2005, 5238-5247【2】M. Lucrecia Alvarez, Mahdieh Khosroheidari, Rupesh Kanchi Ravi and Johanna K. DiStefano, Comparison of protein, microRNA, and mRNA yields using different methods of urinary exosome isolation for the discovery of kidney disease biomarkers, Kidney International (2012) 82, 1024–1032; doi:10.1038/ki.2012.256; published online 11 July 2012 最后要补充的是，超滤是大分子脱盐、浓缩最方便的方法！它重复性好，已经在蛋白、抗体、病毒、外泌体、核酸、囊泡等样品制备中建立标准操作。所以，听说真正会用正确使用超滤管的文化人都在用赛多利斯的兼具年代感和时尚feel的超滤管啦！快点来看看我们详细的说明，选择一款你顺手合心的浓缩神器吧！Vivaspin超滤管系列具有专利的尖角死体积样品安全保护技术，防意外甩干，给珍贵的样品更多一道保障！另外，根据蛋白的分子量和体积的不同，Vivaspin系列有多达24种不同选择。样品处理体积包括从100μl到20ml，截留分子量也涵盖了2KDa到0.2um。想看看赛多利斯超滤家族都有什么？了解更多想试试赛多利斯家的超滤产品？申请适用  

Shruti Naik《科学》2018年3月9日：第359卷，第6380期，第1113页 DOI：10.1126/science.aat0963我们身体的上皮是一道屏障，它与外界环境交互作用，时常发生炎症。尽管其中绝大多数的炎症反应都会消退，但是它们会在组织上留下记忆。通常认为免疫系统的细胞承载着这些记忆，这样就能对后续的炎症刺激更快地做出应答（1, 2）。但是，屏障组织由上皮、间质、神经、血管和免疫网络组成，这些组织协同运作，在健康与疾病状态下发挥最佳的功能。不同于免疫系统，这些组织固有细胞在受到干扰时是否也参与记忆，这一问题仍有待解决。追踪炎症中的组织干细胞成体干细胞负责机体整个生存期组织的维持（3）。因此，我与一些组织干细胞和染色质生物学家合作，以期了解炎症对表皮干细胞的持久影响。在我们整个研究期间，我们发现干细胞具有惊人的炎症“记忆”能力，最终的结果是增强了细胞的再生潜能。为了诱导急性炎症反应，我们采用了一种成熟而且可自愈的炎症模型，即用TLR7激动剂咪喹莫特（IMQ）诱导小鼠皮肤炎症（4）。对皮肤上皮干细胞和分化的后代细胞进行基于诱导性标志物的原基作图 (5) 显示，皮肤基底上皮干细胞 （EpSC）不仅在炎症时会扩增，而且持续时间超过180天。在反应高峰时，EpSC表达IMQ炎症的所有标志，包括过度增殖、STAT3活化以及细胞死亡增加，但在炎症消退后会恢复到基线水平。发生过炎症的皮肤愈合更快组织修复是干细胞的主要功能（6）。因此，我们试图探讨既往的免疫反应如何改变干细胞应对二次刺激的能力。我们在发炎后的皮肤上制造创伤，令人惊讶的是，炎症后表皮伤口愈合速度是正常对照的2.5倍（7）。在初次炎症后180天，以及各种急性刺激后，包括原发创伤、真菌感染、特应性皮炎模型以及另一种增生模型，也能观察到创伤修复加快，所有结果均表明我们这一发现的普遍性以及该效应的持久性。尽管对照组和炎症后创伤组的EpSC增殖情况相当，但经历过炎症的EpSC的迁移能力显著增强。接下来我们试图确定这些观察到的增强效应的上游调节因子。为此，我们排除了循环因子对炎症后创伤修复的调控作用，因为初始炎症部位远端的创伤并未表现出愈合加速效应。另外，我们确定了炎症后创伤修复增强的发生与皮肤固有的巨噬细胞和稽留的Rorc+免疫细胞无关。上述结果启发我们，这可能是炎症导致EpSC内发生持久性改变所致。染色质改变是记忆的关键最近的研究显示，天然免疫细胞的持续性表观遗传学改变可改变其对后续刺激的反应性（1）。为了确定EpSC能否同样编码对既往炎症的记忆，我们评估了炎症时和炎症后表皮干细胞染色质开放性的变化。尽管最初的炎症反应会导致EpSC的染色质开放性发生剧烈改变（>40,000个区域），在稳态恢复后绝大多数炎症诱导性开放区域均会复原（7）。然而令人惊讶的是，小部分开放的染色质区域得以保留（9561个峰），其中约2000个是在初始炎症中获得的。与这些获得的峰相关的基因集中在凋亡信号、白介素信号、氧化应激反应、Ras和PI3激酶通路方面。有趣的是，转录因子MOTIF分析显示，炎症影响的染色质区域集中在EpSC稳态转录因子（如p63、KLF5和AP-1）以及炎性转录因子（如STAT1/3和NF-κB）。STAT3是IMQ反应的主要介导因子（8），在初始（IMQ）和二次（创伤）刺激时均会磷酸化并激活，而在中间期则不会（7）。因此，我们的数据揭示出一种模式，在此模式下记忆性染色质区域起到了开放式平台的作用，在受到二次刺激时可以快速重新激活。实际上，利用这些记忆性染色质区域编码的荧光报告蛋白，我们发现这些持续开放区域具有感受炎症应激的功能。发生过炎症的干细胞表达组织损伤传感器如果这些开放式染色质元件确实可形成记忆，那么我们预想二次创伤将导致其相关基因转录增加。惊人的是，对发生过炎症的EpSC在二次创伤后不久进行转录谱分析显示，有140种基因快速上调，其中50%以上的基因与炎症后持续开放性染色质区域有关（7）。这些转录改变集中在炎症小体信号通路方面，包括双链DNA传感器、黑色素瘤缺乏因子2（Absence in Melanoma 2，AIM2），后者可监测组织损伤（9）。值得注意的是，Aim2缺陷的干细胞丧失了炎症赋予的创伤修复优势，而提高EpSC的Aim2表达可恢复这种表型（7）。进一步研究显示，AIM2炎症小体的下游效应器IL-1β介导了这一效应。总之，炎症刺激可调节EpSC功能，使其适应后续的应激。调控记忆上述发现显示，炎症记忆不仅局限于免疫系统，同样也存在于长寿的组织干细胞中。然而，目前尚不清楚记忆是否仅因炎症而发生，也不清楚干细胞能否保留对既往所有应激源的记忆。而且，现在也不清楚这种适应机制是否总对机体有益，还是也可能产生不利效应，例如导致炎症疾病复发、肿瘤形成或过早衰老。有趣的是，衰老时创伤反应受损与皮肤免疫失调有关（10）。重复应激导致的表观遗传学变化累积（11）可能导致衰老干细胞再生能力减弱。因此，我们要了解EpSC是如何建立记忆的——它会传递给分化的后代细胞吗，以及它会被逆转吗——这些对于微调干细胞惊人的组织再生能力十分重要。我们的工作表明，炎症重编程对组织愈合能力有持久影响。了解干细胞记忆炎症的触发因子，可能有助于最终开发出改善干细胞再生潜能的治疗方法。References1. M. G. Netea, J. Quintin, J. W. M. van der Meer, Cell Host Microbe 9, 355 (2011).CrossRefPubMedWeb of ScienceGoogle Scholar2.S. N. Mueller, L. K. Mackay, Nat. Rev. Immunol. 16, 79 (2016).CrossRefPubMedGoogle Scholar3. C. Blanpain, E. Fuchs, Ann. Rev. Cell Dev. Biol. 22, 339 (2006).CrossRefPubMedWeb of ScienceGoogle Scholar4. L. van der Fits et al., J. Immunol. 182, 5836 (2009).Abstract/FREE Full TextGoogle Scholar5.M. P. Alcolea, P. H. Jones, Cold Spring Harbor Perspectives in Medicine 4, a015206 (2014).Abstract/FREE Full TextGoogle Scholar6. C. Blanpain, E. Fuchs, Science 344, 1242281 (2014).Abstract/FREE Full TextGoogle Scholar7. S. Naik et al.Nature 550, 7677 (2017).Google Scholar8. B. Flutter, F. O. Nestle, Eur. J. Immunol. 43, 3138 (2013).CrossRefPubMedGoogle Scholar9. K. L. DeYoung et al., Oncogene 15, 453 (1997).CrossRefPubMedWeb of ScienceGoogle Scholar10. B. E. Keyes et al., Cell 167, 1323 (2016).Google Scholar11. I. Beerman, D. J. Rossi, Cell Stem Cell 16, 613 (2015).CrossRefPubMedGoogle Scholar 本文由赛多利斯翻译，阅读英文原文  第二届Sartorius & Science Prize已如约而至！快来参与评选，向全世界展示你的研究成果！点击图片了解活动详情

Will McLean《科学》2018年3月9日：第359卷，第6380期，第1113页 DOI：10.1126/science.aat0966人群中约5%（3.6亿）患有某种形式的听力障碍。听力损失患者时常会描述社交孤立的经历，近期研究显示，听力损失与日后发生痴呆具有显著相关性。我们出生时，每个人每只耳内约有15,000个声音传感细胞。当这些细胞（称为毛细胞）由于噪声暴露、某些药物及其他环境因素而死亡时，就会发生听力损失。与鸟、鱼和两栖动物不同，哺乳动物的这种细胞无法再生。目前，治疗听力损失的唯一方法就是缓解性治疗仪器，例如助听器。尽管这些技术可改善很多患者的听力，但其获益有限，因为只有残余的毛细胞能够受到刺激。因此，很多人需要恢复毛细胞的治疗方法。由于其他种属动物的毛细胞可再生，其他哺乳动物组织也可再生，我和我的同事推测一定有一种方法可诱导哺乳动物毛细胞再生。我们需要做的就是找到解锁这种方法的钥匙。确定内耳祖细胞的局限性内耳包含听觉器官（耳蜗）和平衡器官（前庭系统），两种器官均有其各自特化的毛细胞类型。毛细胞损失或与这些毛细胞相连的神经元损伤（或二者兼有）会导致听力和平衡障碍。尽管内耳的毛细胞无法再生，但是有研究提示内耳含有干细胞，后者可通过细胞培养形成毛细胞和神经元（1）。然而，人们以往认为这完全来自唯一的全能干细胞。鉴于内耳自我恢复能力有限，这种假想格外令人惊讶。我的研究显示，内耳含有不同类型的祖细胞，而不是全能干细胞（2）。其中一群细胞表达富含亮氨酸重复序列G-蛋白耦联受体5（Lgr5），这是一种最初在肠道发现的干细胞标志物（3）。后来，人们发现Lgr5细胞还在耳蜗发育中发挥毛细胞祖细胞的作用（4, 5）。我们发现即使在发育后，这些细胞也能形成新的毛细胞，与天然毛细胞的蛋白和基因表达谱相似。在进行生理功能测试时，这些新形成的毛细胞与成熟器官中的毛细胞类似。我的研究还显示，平衡器官的祖细胞也能形成功能完善的毛细胞。有趣的是，耳蜗和前庭系统只能形成原器官的毛细胞，提示这两个祖细胞群体是不同的。尽管之前的研究显示通过内耳干细胞可获得神经元（1），这可能是来自全能干细胞，但是我的研究显示，神经细胞仅来自表达髓鞘形成蛋白脂蛋白1 （Plp1）的内耳神经胶质细胞（2）。除了发现一种新的祖细胞群体外，我们还发现Plp1细胞比耳蜗或前庭祖细胞的可塑性更强，因为它们还能形成原生环境以外的细胞类型。实际上，Plp1祖细胞可形成中枢和外周神经系统的神经元和神经胶质细胞。总而言之，本研究显示耳内存在不同类型的祖细胞，具有分化形成特定类型细胞的能力。因此，在治疗听力损失、平衡失调或神经损伤时，可能需要针对各种祖细胞特有的靶向机制来量身定制。解锁祖细胞的再生潜能尽管研究显示器官发育完成后内耳中存在祖细胞，但是显然这种祖细胞无法分裂并分化，从而修复周围的组织。除了无法修复听力外，这也阻碍了药物开发，因为难以获得足够数量的原代耳蜗细胞来筛选治疗药物。为了解决耳内再生性缺失的问题，我们从研究肠道Lgr5细胞如何再生的工作中获得启发（6）。这种特殊的干细胞可将全部肠道上皮每5-7天更新一遍。根据对驱动这一过程的通路和信号的了解，人们发现了一种药物组合可使内耳Lgr5祖细胞重编程，提高其可塑性，并发生细胞分裂（7）。与既往方法相比，这些药物可获得2000倍以上的Lgr5细胞，并几乎可完全转化为毛细胞。此外，研究表明这些药物对成年小鼠、非人灵长类动物和人的细胞均有效。这一突破性进展有效解除了该领域的发展瓶颈，构建了首个用于听力损失的大规模药物开发平台。从最初单细胞水平上的发现开始，人们进一步表明，利用可促进Lgr5细胞增殖的分子治疗受损的小鼠耳蜗，可有效诱导祖细胞分裂，使损失的毛细胞原位再生。该技术被称为祖细胞活化（PCA），是Frequency Therapeutics诞生的催化剂。Frequency Therapeutics是Bob Langer、Jeff Karp和我共同创建的一家初创公司，旨在采用药物激活人体的祖细胞，启动修复过程，从而治疗听力损失及其他疾病。到目前为止，PCA已成功用于诱导机体多个组织类似效应的药物开发。将科学发现转化为有潜力的治疗方法自从在受损组织中使毛细胞再生的原理验证结果发表后（7），最近的实验表明，对听力损失动物进行耳局部治疗可使其听力得到功能性改善。基于这些结果，Frequency Therapeutics拓展了其人体治疗应用上的开发，最近完成了一项首个在人体上进行的I期安全性研究，结果符合所有终点要求。因此，这项工作未来有望为患者带来一项再生性治疗方法，帮助其恢复听力。References1.? K. Oshima et al., J. Assoc. Res. Otolaryngol. 8, 18 (2007).CrossRefPubMedWeb of ScienceGoogle Scholar2.? W. J. McLean, D. T. McLean, R. A. Eatock, A. S. Edge, Development 143, 4381 (2016).Abstract/FREE Full TextGoogle Scholar3.? N. Barker et al., Nature 449, 1003 (2007).CrossRefPubMedWeb of ScienceGoogle Scholar4.? R. Chai et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 109, 8167 (2012).Abstract/FREE Full TextGoogle Scholar5.? F. Shi, J. S. Kempfle, A. S. Edge, J. Neurosci. 32, 9639 (2012).Abstract/FREE Full TextGoogle Scholar6.? X. Yin et al., Nat. Meth. 11, 106 (2014).Google Scholar7.? W. J. McLean et al., Cell Rep. 18, 1917 (2017).CrossRefGoogle Scholar本文由赛多利斯翻译，阅读英文原文 第二届Sartorius & Science Prize已如约而至！快来参与评选，向全世界展示你的研究成果！点击图片了解活动详情

Anika Manzke是病毒清除产品经理，Birte Kleindienst是病毒清除产品初级经理，二人均供职于Sartorius Stedim Biotech细菌、支原体和病毒等各种感染因子对生物反应器的污染会对患者安全构成潜在的威胁。近年来，病毒一直是导致多种生物反应器污染的原因（1）。许多生物制药公司已经报告过鼠细小病毒（MVM）或疱疹病毒属（2）等无包膜细小病毒对生产级生物反应器造成的污染。制药行业中的许多重量级公司都加入了CAACB来共同解决这一问题。制造商可以采取多种方法降低细菌或支原体引起的细胞培养污染风险。但是，病毒（特别是无包膜细小病毒）引起的污染风险，即使是在使用化学限定培养基（1）的情况下，对生物制药行业而言仍然是一个巨大的挑战。传统的除菌级过滤器， 即使是0.1微米的过滤膜都不能防止无包膜微小病毒造成的污染。病毒污染比细菌污染（3）更难以检测。未能检测到的病毒可能会污染整个下游过程，甚至是最终药品。许多公司因鼠细小病毒或疱疹病毒属（2）污染而遭受了生产损失。针对所有上述情况，根源分析显示，最可能的源头是在供应链（4-6）早期储存过程中的培养基组分（如盐）污染。图1：病毒污染事件的逐渐升级关联效应防止老鼠进入这些仓库的措施不够充分。这些污染事件可能对患者造成致命的后果。 这些无包膜病毒的稳定性高，因此它们可以长期存活。即使是一个感染性颗粒也会污染整个生物反应器。这一个颗粒会在生物反应器中迅速复制。在它进入生物反应器之前，要在1000 L的培养基中找出这一个颗粒无异于大海捞针。 污染影响这种污染事件可能对患者造成致命的后果（参见图1）。如果公司发现存在污染，不仅需要关闭工厂，还需要进行大量的清洁工作。由此便可能导致药物短缺，患者不能获得救生药物（7）。上游病毒清除解决方案上游工艺中需要有新的病毒清除理念。过去，研究人员已经研究了伽马辐射、UV-C照射或高温短时处理（HTST）等技术去除细胞培养基病毒的能力。如牛血清在伽马照射下能清除大部分的病毒（8）。高温短时处理需要大量投资，因此它仅在高流速下处理大量培养基时才是经济可行的（9）。然而，并非所有培养基组分都是热稳定的，而高温短时处理系统线性放大也并非易事。UV-C受限于可应用的流速，因此在制备大体积的培养基时应用有限。此外，从这些公开发布的方法数据来看，这些技术在灭活无包膜细小病毒方面的效果也良莠不齐。迄今为止，过滤这项有效的技术（对无包膜病毒特别有效）尚未被广泛应用于培养基过滤（10）。下游病毒过滤器的瓶颈为达到理想的病毒清除效果，一些公司已经采用下游工艺中的除病毒过滤器来进行培养基的过滤制备，以此尽量减少病毒污染的风险。因为生产时间长，流速低，所以公司可有效地将这些过滤器用于过滤灌注生物反应器的培养基中的潜在病毒。采用传统的下游工艺（DSP）过滤器过滤化学限定培养基时，培养基的过滤载量相当高，能高达10.000 L/m2（11）。如果可以在几天内而非数小时内过滤这些培养基，传统的DSP过滤器则是完美的解决方案，而且经济上可行，因为小过滤面积已经足以满足需求。然而，在传统的批量过滤中，情况并非如此。由于细菌污染的风险，培养基必须在至少24小时内过滤，且理想情况下是在一个班次内。为了提高过滤的整体速度，则需要更大的过滤面积，但这种方法成本昂贵，在经济上不可行。 经济上的可行方案生物制药行业需要解决将下游工艺除病毒过滤器用于上游培养基除病毒过滤的低流速和高成本问题，使其在经济上可行。这是开发专门用于培养基过滤（10）的第一代病毒截留过滤膜的背景。 方法截留性能每个5.0cm2的实验室用除病毒滤器都经过了病毒挑战实验. 实验采用了作为“最差条件”下的非脂包膜指示病毒-MVM 。它是细小病毒家族的12-26纳米单链无包膜ssDNA病毒。实验使用5.0cm2的除病毒滤器，在2.0bar的恒定压力下过滤3种不同的培养基，并进行二次重复实验。在1%的病毒加入量下，过滤了400 L/m2。膜载量测试膜过滤载量采用了三个不同供应商的15种不同培养基来测定。所有测试均在2.0bar的恒压下进行。表1：新型除病毒培养基滤器的截留能力，实验室用滤器（5 cm2）。图2：在4小时的过滤时间内，15种细胞培养基（CCM）在恒压2.0bar下的通过量一览；培养基除病毒过滤器，实验室用。4小时过滤后对总过滤量进行了测量。结果截留性能表1总结了使用新型膜进行测试的截留数据。膜的病毒截留性能同下游工艺应用中使用的过滤器相当。无包膜细小病毒MVM的截留量超过4个对数值。分析方法检测不到滤液中的MVM。可合理预期该膜会截留比细小病毒更大的潜在污染因子。不同化学限定成分细胞培养基的膜通过量膜的通过量采用了三个不同供应商的15种培养基来测定。图2表明了在2bar压力下，4小时的培养基处理载量因培养基组分不同而差别很大。例如，Lonza Power CHO2相对较快地造成了膜堵塞，而Lonza ProPER1培养基似乎完全不堵膜。对于一些商业化细胞培养基，使用串联0.1微米过滤器显著提高了除病毒过滤膜载量（7）。但仅部分培养基可行，有些则没起作用。诸如泊洛沙姆等保护剂大幅降低了过滤流速（10）。对于一些商业化细胞培养基，使用串联0.1微米过滤器显著提高了膜通过量。 降低泊洛沙姆浓度或在添加至培养基以前过滤能大幅提高过滤器的过滤量。业界应该展开更多研究，从而充分了解不同培养基组分对培养基过滤器过滤性能的影响。根据本研究，可设计出一种既能改善过滤性能又不影响后续细胞培养工艺的培养基。不过，研究表明，在细胞培养基通常的4小时过滤中，开发的新膜通常过滤载量约1000 L/m2。因此，对于批量制备培养基，这种新膜是经济上可行的办法，同时也降低了细胞培养基的病毒污染风险。结论在本文中，作者介绍了一种新的病毒截留膜，上游工艺工程师可使用它来过滤化学限定培养基，从而降低风险。此外，作者已经证明该方法可截留4个Log以上的非包膜细小病毒。当过滤一系列不同型号的化学限定培养基时，该膜的通量较高，生物制药公司能够在上游工艺中使用这种膜，而且不会对工艺成本造成不利的影响。该膜有可能成为基于风险控制来最大程度地降低病毒污染事件的重要环节，同时提高生物制药公司的生产能力。 REFERENCES1.P. W. Barone, PhD, “Lessons Learned from the Consortium on Adventitious Agent Contamination in Bio Manufacturing,” Viral Safety for Biologics, Cologne, June 21, 2016.2. Bethencourt, Nature Biotechnology 27, 681 (2009), www.nature.com/nbt/journal/v27/n8/full/nbt0809-681a3.O.-W. Merten, Cytotechnology 39, 91–116 (January 9, 2003).4.M. Moody, PhD, “MMV Contamination–A Case Study: Detection, Root Cause Determination, and Corrective Actions,” PDA/FDA Adventitious Viruses in Biologics: Detection and Mitigation Strategies Workshop, Bethesda, Maryland, Dec. 1-2, 2010.5.Jim Skrine, “A Biotech Production Facility Contamination Case Study–Minute Mouse Virus,” PDA/FDA Adventitious Viruses in Biologics: Detection and Mitigation Strategies Workshop, Bethesda, Maryland, Dec. 1-2, 2010.6.Linda Hendricks, “Case Study of Apparent Virus Contamination in Biopharmaceutical Product at Janssen,” PDA/FDA Adventitious Viruses in Biologics: Detection and Mitigation Strategies Workshop, Bethesda, Maryland, Dec. 1-2, 2010.7.B. Kleindienst, “Proof of Concept–The first virus retentive membrane for risk mitigation in upstream,” Viral Safety & Raw Materials for Biologics, Cologne, June 22nd, 2016.8.G. Gauvin and R. Nims, PDA Journal, Vol. 64, No 5, 432-435, 2010.9.B. Hansmann, V. Thom, A. Manzke, “Contamination Risk Mitigation in Cell Culture Media Preparation,” Virus & TSE Safety Forum, Lisabon, June 9-11, 2015.10.A. Meyer, “Risk Mitigation in Media Preparation—Current Possibilities and Future Trends,” PDA Virus & TSE Safety Forum, Berlin, June 5, 2013.Thomas R. Kreil, “Virus Safety—A Look into the Entire Process Raw Materials, Upstream, Downstream,” European Upstream and Downstream Technology Forum Goettingen, September 8-10, 2014. ◆  

引言 作为世界上最小的细菌之一，支原体能够独立繁殖。它们属于柔膜菌纲，生长非常缓慢，且为寄生。细胞培养物的污染仍是一个主要问题。一系列生理和生化参数受细胞培养物中支原体的影响。支原体感染会导致细胞的代谢、生长、活力、大分子合成、形态等发生变化，因此对细胞培养物进行灵敏的常规污染检测是必不可少的。传统的基于生长的方法需要培养至少28天才能确定地排除支原体污染。相比之下，核酸扩增技术（NAT）可将获得结果的时间缩短到几个小时。作为培养法的一种替代方法，必须证明NAT测试系统能够检测10 CFU/mL的支原体。为此，本研究中对三种不同的支原体PCR试剂盒进行了测试，测试其在DMEM培养基中检测不高于10 CFU/ml支原体的能力。实验设置和结果 在本次研究中，使用Microsart® AMP支原体试剂盒（包括样品制备）和Microsart® AMP提取试剂盒（Sartorius Stedim Biotech GmbH）和其他两种支原体检测试剂盒进行了验证测试，这两种检测试剂盒也基于DNA分离和随后的实时荧光定量PCR分析。使用10CFU灵敏度标准精氨酸支原体（NCTC编号10129）、口腔支原体（NCTC编号10112）和柑橘螺原体（NCTC编号10164）（Sartorius Stedim Biotech GmbH）作为测试材料。这些冻干标准品可以通过加入1 ml样品基质轻松再水化，达到10 CFU/ml的浓度。这些制剂旨在用于安全可靠地对支原体PCR分析进行验证。在这些比较研究中，使用含有5% FCS的DMEM培养基作为样品基质。对于全部三种测定，根据制造商的手册进行DNA分离过程和随后的PCR设定。Microsart® AMP提取试剂盒基于方便的二氧化硅柱方案，可在30分钟内完成。竞争产品的DNA分离基于磁珠法使DNA沉淀。在评估的三种PCR检测方法中，两种包括高度特异性的TaqMan探针；其中之一是Microsart® AMP支原体检测试剂盒。第三种检测方法的检测混合物中含有SYBR Green，使得在DNA扩增循环后需要进行融解曲线分析，以区分非特异性扩增DNA和支原体扩增DNA。每种样品（精氨酸支原体、口腔支原体和柑橘螺原体）用每种试剂盒测试四次，包括DNA分离、聚合酶链式反应和数据分析的全过程。结果列于表1中。  表1：使用三家不同供应商的试剂盒对DMEM培养基 + 5% FCS和10 CFU/ml 精氨酸支原体|口腔支原体|柑橘螺原体进行PCR测试的结果图 1：使用Microsart® AMP支原体试剂盒的扩增曲线，使用精氨酸支原体样品（10 CFU/ml，在DMEM培养基 + 5% FCS中），PCR Cycler MxPro 3005P结论 在这些研究中，使用包括另外两家供应商支原体实时荧光定量PCR试剂盒（包括样品制备）对赛多利斯 Microsart® AMP提取试剂盒和Microsart® AMP支原体试剂盒进行了验证测试。在随后的PCR分析中，36个DNA提取物均显示阳性信号。因此说明所有测试产品都能以至少10 CFU/ml的灵敏度检测支原体污染。如果仔细观察一家供应商的结果中的标准偏差，首先使用Microsart® AMP提取试剂盒，然后用Microsart® AMP支原体试剂盒进行扩增，则会尽可能地减小结果的可变性，提高重现性。PCR试剂盒，主要是三种不同的样品制备方法可能导致出现重现性差异。已知二氧化硅膜方法即使在处理高度复杂的样品基质时也非常稳健和可靠。DNA沉淀法或磁珠法往往更费力且不可靠。另一个有助于Microsart®支原体产品适用范围可靠性的事实是，所有PCR试剂都可以储存于4至8°C条件下。因此，如果冷链短暂中断，不会导致试剂发生融化，否则会对PCR检测的灵敏度产生负面影响。相反，供应商T和供应商R的支原体检测试剂盒必须在-20°C冷冻保存。当计划用这些产品进行测试时，必须记住PCR试剂解冻的额外等待时间。此外，必须考虑如果必须在-20°C储存的试剂盒在一次PCR运行中未完全用完，反复冻融也会对PCR结果产生负面影响。心动了吗？ 想要快速获得支原体检测的特异结果，成为实验室的真正英雄？现在申请，就有机会免费体验我们的支原体检测试剂盒立即申请

上期我们为您介绍了如何根据您的实验需求选择合适的超滤管，本期我们总结了超滤管使用过程中经常遇到的问题，分析问题产生的原因并给您一个完美的解决方案。超滤膜一次使用就碎了？可能和我们的离心机有关系超滤管如果离心转速过高，可能会导致膜甚至管子的破裂。离心机的转速与离心机的半径以及离心力都有关系，不同半径的离心机，相同转速出来的离心力也不一样，可以公式换算！说明书中明确指出使用超滤管的最大转速和离心力，做实验时要根据不同品牌的超滤管调整到离心力的承受范围内。另外，超滤管在离心机中的摆放也是有讲究的，使用角转子时，超滤管放置方式要求印有刻度一侧朝上|朝外(这样双面膜才能发挥切向流的作用)，使用水平转子没有特殊要求；要不也会发生破裂哦～在浓缩管中加入样品，不得超过最大体积。（以Turbo15 为例，若使用水平转子不得超过15ml 样品，若角转子则9ml）双面垂直膜--窗口朝上单面垂直膜--刻度面朝上另外，还要注意的是，离心15ml或是50ml外管的超滤管最好使用尖底的转子，因为超滤管的底部是尖底的。如果使用圆底的转子，有可能无法把样品管放满，或是会增加外管底部磨损破损的几率。脱盐浓缩，一个超滤管就可以搞定浓缩用超滤管，脱盐用透析袋或脱盐柱，这是很多实验室一直沿用的实验操作。其实呢，超滤管做“脱盐+浓缩”，也是很多蛋白操作高手的小诀窍。而如果你的样品量有几十毫升甚至几升，选择赛多利斯的超滤膜包会在一小时之内完成自动换液，非常的方便哦！另外，赛多利斯的超滤管也有针对于换液的特殊设计：a.加2ml样品到浓缩管b.清空滤过管c.插入渗滤小管到浓缩管，加入10ml去离子水或是缓冲液。旋上盖子d.重复浓缩步骤，会有98%的无机盐滤过e.去除渗滤小管，回收浓缩后的样品我用浓缩后的蛋白做下游分析时发现有干扰，可能原因超过滤薄膜含有微量甘油和叠氮化钠。 如果此材料干扰分析，可用缓冲液或去离子水预清洗。如果干扰仍然存在，用0.1 N NaOH清洗，然后用缓冲液或去离子水再次清洗后甩干。同样需要强调的是，如果用NaOH处理，可能会对RC膜有一定影响，所以，尽量选择PES膜并且避免过夜浸泡。Vivaspin超滤管系列具有专利的尖角死体积样品安全保护技术，防意外甩干，给珍贵的样品更多一道保障！另外，根据蛋白的分子量和体积的不同，Vivaspin系列有多达24种不同选择。样品处理体积包括从100μl到20ml，截留分子量也涵盖了2KDa到0.2um。想看看赛多利斯超滤家族都有什么？点击想试试赛多利斯家的超滤产品？点击 

据研究只有10%不到的人真正会用超滤管？回收效率低下，目标蛋白渗漏...有的时候真怀疑自己可能用了一个假超滤管。今天赛多利斯的“膜”法学院就来把超滤管使用过程中的干货仔细筛一筛，助实验室大神一臂之力！关于“膜” 法学院之基础篇——来自于“爷爷奶奶” 辈的超滤产品作为世界上第一个商业化生产膜产品的企业，赛多利斯的膜可是有91年的历史了。赛多利斯的膜源于曾经在赛多利斯公司附近的哥廷根大学任职的诺贝尔化学奖得主Richard Adolf Zsigmondy的发明，和大多数历史悠久的德国产品一样，工艺精湛和质量严谨是赛多利斯秉承多年的家风。那么，关于“膜”，有哪些基本知识是经常被大家忽略的呢？选对截留分子量，事半功倍你是否抱怨过超滤管流速慢呢？很有可能是截留分子量选小啦！超滤膜并非均一孔径的膜，因此超滤膜截留分子量MWCO是标称值，例如对分子量100kD左右的球蛋白截留＞90%的膜而被标称为100kD。所以，如果用标称为100kD的膜去截留我们自己100kD的样品很有可能无法达到较高的截留效果。所以建议大家选择的超滤膜MWCO是需要截留的目标分子量的1/6-1/2。如果首先考虑流速的因素，则选择需要截留的目标分子量的1/2作为膜的截留分子量；如果截留效果作为主要考虑，则选择需要截留的目标分子量的1/5或1/6作为膜的截留分子量。另外，由于膜的特性不一样，更换品牌或是同品牌不同产品系列时，最适合的截留分子量偶尔是会变化的！这点一定要多加注意呀！另外，即使是相同的截留分子量，不同的膜的流速是不一样的，所以，选择较高流速的膜，例如PES膜，可以让实验更加轻松。另外，有小伙伴是做核酸和病毒的，如果想用超滤的方法来浓缩怎么操作呢？这个大可以放心！可以参考下表来进行选择和试验：Membrane MWCO Double-Stranded   Nucleotide Cutoff (bp)Hydrosart® 2 kDa > 10Hydrosart® 10 kDa> 30Hydrosart® 30 kDa> 50Hydrosart® 50 kDa> 300Hydrosart® 100 kDa> 600Cellulose   Acetate125 kDa > 650  值得一提的是：由于PCR技术的发展，即便痕量DNA污染都会导致假阳性的结果，因此在进行核酸操作时推荐大家使用PCR-grade级别的超滤管。如果需要浓缩病毒，可以参考下表选择超滤产品：Target Protein   MWTarget   Biomolecule SizeRecommended   membrane MWCOEstimated   membrane pore size900-1,800kD90-200nm300kD30nm300-900kD30-90nm100kD10nm150-300kD15-30nm50kD7nm90-180kD30kD4nm30-90kD10kD2.5nm15-30kD5kD1.5nm10-20kD3kD1.2nm3-10kD2kD1nm100K、300K的Vivaspin/Vivaflow超滤产品在CAR-T和进行病毒包装的客户中有大量应用呢！漏蛋白？可能你的样品选错了膜材质每种膜都有化学兼容性，在使用之前要确认样品成分尤其是样品中的去垢剂是否和膜材质兼容，这样才不会造成样品的泄漏和污染。再比如有的客户样品中含有咪唑，含量为200mM，如果他使用Vivaspin或Vivaspin Turbo可以直接使用，因为Vivaspin或Vivaspin Turbo可以耐受500mM,而他如果选择某些只耐受100mM的超滤管就必须进行稀释，否则就有可能发生泄漏。因此，使用前仔细察看超滤产品的化学兼容性非常重要。还有就是：请养成一个好习惯: 超滤结束，等待最终的实验结果出来之后再弃去滤出液！因为如果发生问题，可以对我们可能出现的问题进行分析。巧用预处理，达到低浓度样品的最大回收如果样品浓度很低，无法做后续分析，这样就需要通过超滤来浓缩样品。Vivaspin采用超低吸附的PES材质滤膜，蛋白回收率高达95%，另外我们还有吸附极低的Hydrosart膜可以选择。对于有些样品含量非常少的情况，除了选择我们吸附量很低的膜，我们还有如下法宝推荐！a.尽量选择较小的截留分子量的膜b.选择带有尖角收集器的膜，以便最大限度回收样品c.使用水平转子优于角转子d.浓缩完用缓冲液清洗多次回收, 注意移液器的枪头不要碰到膜，以免膜破裂。e.使用前可以先对膜进行“封闭钝化”。钝化步骤：先用Arium水清洗，用移液器去除残留水分。选择下面推荐的一种钝化液室温至少2小时或过夜浸泡（除了Triton X-100不推荐过夜），去除钝化液，用Arium水冲洗3-4遍。直接使用或4度Arium水保存。Type ConcentrationPowdered milk   1% in Arium waterBSA                       1% in PBSTween 20             5% in Arium waterSDS                        5% in Arium waterTriton X-100         5% in Arium waterPEG 3000              5% in Arium waterTable 1: 封闭液Vivaspin超滤管系列具有专利的尖角死体积样品安全保护技术，防意外甩干，给珍贵的样品更多一道保障！另外，根据蛋白的分子量和体积的不同，Vivaspin系列有多达24种不同选择。样品处理体积包括从100μl到20ml，截留分子量也涵盖了2KDa到0.2um。想看看赛多利斯超滤家族都有什么？点击想试试赛多利斯家的超滤产品？点击 

摘要本研究的重点是在进行亲和色谱前使用Vivaflow® 200切向流膜包对多达3 L的鼠杂交瘤澄清上清液进行10倍浓缩。研究发现，同时使用两块Vivaflow® 200 (截留分子量 (MWCO) 30 kDa) 时，抗体回收率始终超过98%，浓缩速度约为20 – 25 mL/分。简介采用杂交瘤技术生产的单克隆抗体在 (生物) 制药行业、研究以及体外诊断 (IVD) 产品的生产中均有广泛应用。诸如蛋白质免疫印迹、免疫荧光和ELISA等分析技术应用广泛。生产和加工单克隆抗体——特别是为IVD市场用户生产需要一些保证优质的措施，如实施ISO 9001质量体系以及采用最新的技术。 抗体生产中一个不可缺少的步骤就是使用超滤和微滤膜进行过滤 (1, 2)。搅拌加压过滤曾是最常用的实验室浓缩方法，浓缩体积不到500 mL。以往的常见问题包括速度慢、泡沫过多以及缺少死体积保留导致抗体大量丢失。这迫使生产科学家寻找实验室规模的正切流动过滤 (TFF) 方法。 使用微滤或超滤膜进行TFF广泛用于蛋白和抗体的澄清、浓缩或缓冲液更换 (3, 4)。原料横向流过滤膜 (正切)。在超滤模式下，低分子量分子通过滤膜滤出到滤液，而包含目标抗体的原料则可在很短的时间里不断浓缩到相对较高的蛋白浓度。图1：Vivaflow® 200正切流动膜包 (A) 及样本容器 (B)、蠕动泵 (C) 和滤液收集瓶 (D)。稳定、可靠、可重复的样本制备 (如蛋白和抗体浓缩/缓冲液更换) 是所有生物试剂下游加工过程的基础步骤。在BioservUK，Vivaflow® 200循环流道膜包一直是首选的浓缩工具，用于蛋白A或蛋白G制备色谱前杂交瘤澄清上清液原料的浓缩，最大体积可达3 L。选择超滤浓缩器时应考虑以下参数：超滤膜的质量、浓缩速度、抗体回收率、可重复使用性和成本效益。在本文中，我们介绍了在BioservUK使用切向流动工艺对不同鼠IgG单克隆抗体亚类进行浓缩的情况。材料和方法图2：在BioservUK对3 L杂交瘤原料进行下游加工的工作流程。上清液来自杂交瘤细胞，后者由鼠B淋巴细胞和Sp2.0小鼠骨髓瘤细胞系融合而成，并进行转瓶培养。杂交瘤细胞常规培养在添加了欧盟批准的10%胎牛血清 (Gibco货号：10270-106) 的RPMI 1640培养基 (Gibco货号：21875) 中。将一种原料在4至8°C下以8,000 g的离心力离心10分钟，进行澄清。用2 L水预先清洗VF200，以去除储存缓冲液。预先清洗过程中检查Vivaflow® 200的完整性，时间在1分钟以上，确保滤液流速> 55 mL/分钟。然后用两个并行连接的Vivaflow® 200 (30 kDa MWCO，PES，Sartorius货号：VF20P2) 和15号泵头将上清液浓缩10倍 (图1)。细胞培养液中抗体浓度通常约为30 mg/L。经过Vivaflow® 200处理后抗体浓度一般约为300 mg/L (10倍浓缩)。Vivaflow® 200浓缩器最大流速以3个大气压限值指示。抗体浓缩后，将膜包用2 L水清洗，然后在再循环模式下用500 ml 0.5 M NaOH和1%次氯酸钠溶液原位清洗 (CiP) 40分钟。随后用2 L水冲洗膜包，最后加入200 ml 20%乙醇，在2– 8°C下储存。将300 mL浓缩液在3,500 g下离心10分钟，进一步去除颗粒物，然后用500 ml Sartolab RF真空滤器 (Sartorius货号：180C2-E) 进行0.22 μm过滤，之后进行蛋白G HiFliQ 5 mL柱纯化 (蛋白Ark货号：HiFlIQ5-PG-5)。结果我们所有1– 3 L样本浓缩步骤的标准操作规程 (SOP) 中均包含Vivaflow® 200。该仪器使用极其简便，浓缩速度约为20 – 25 mL/分时抗体回收率始终> 98%。重要的是，不可回收的滞留体积不到1 ml，十分理想，即使清洗步骤中压力指示灯亮起也不影响回收率。整套独立式系统可方便地与Masterflex Easy-Load蠕动泵头连接和断开，能够储存在冰箱中，随时重复使用，无需手动调节。该系统无需手工操作，干净清爽。 我们每20分钟监测一次流速，方法是在蠕动泵恒定速度下测定滤液体积。相应的Masterflex L/S Economy Drive蠕动泵设置为3。图4显示了通常的流速，在20–25 mL/分范围内。将3 L样本浓缩10倍一般需要2小时。 在BioservUK，我们建立了Vivaflow® 系统，适用于不同的免疫球蛋白G (IgG) 亚类。所有鼠IgG亚类 (IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3) 的回收率均超过98%。每完成3L样本制备就进行一次原位清洗。各个Vivaflow® 200膜包仅用于一种特定的IgG亚类。我们的SOP允许每个膜包的最大产量为50 L。图3：不同时间测得的流速实例为过滤体积的函数结论Vivaflow® 200正切流动膜包使用简便、流速快、成本低、通量高，且具有广泛的化学相容性和总体耐用性，因此，我们围绕该过滤浓缩步骤进行了1– 3 L杂交瘤培养液的下游加工。而在搅拌加压过滤装置中，使用的水平薄膜盘导致免疫球蛋白G在膜表面结块，从而使得流速显著降低，IgG损失可达40%。 我们得出的结论是，Vivaflow® 200是一款独特的实验室规模TFF耗材，研究表明这些横向流动膜包是一种不可或缺的工具，适用于各种亚类的单克隆IgG的浓缩。对于体积最高达3 L的样本而言，Vivaflow® 200仍是我们的首选，它是一款单克隆抗体级的超滤浓缩器。参考文献1. Kemken R et al (1997) Dynamic membrane filtration inmammalian cell culture harvest. In: Carrondo MJT, Griffiths B,Moreira JLP (eds) Animal Cell Technology. Springer, Dordrecht.2. Bertera R, Steven H, Metcalfe M (1984) Development Studiesof crossflow filtration, The Chemical Engineer. 401: 10.3. Velez D, Miller L, MacMillan JD (1989) Use of tangentialflow filtration in perfusion propagation of hybridoma cellsfor production of monoclonal antibodies. Biotech & Bioeng,33 (7): 938.4. Van Reis R et al (1997) high performance tangential flowfiltration. Biotech & Bioeng, 56 (1): 71.免责声明实验和方法均已独立完成，作者对本文全部内容负责。 

西门子成为首选的自动化解决方案供应商Sartorius Stedim Biotech的产品系列未来将包括面向全球的标准化自动化平台新的自动化产品在2018年法兰克福举办的ACHEMA展会上首次亮相2018年6月12日——西门子科技集团与国际领先的生物制药行业供应商Sartorius Stedim Biotech (SSB) 就自动化领域的长期合作达成共识。按双方协议，Sartorius Stedim Biotech将优先采用西门子的自动化技术，包括工业PCs、S7-1500软件控制器、TIA门户，以及SCADA系统Simatic WinCC等。SSB为其客户提供的多款产品和解决方案都将采用这些软硬件设备，用于诸如疫苗和单克隆抗体等生物制药产品的开发和生产。Sartorius Stedim Biotech此前已经使用西门子自动化解决方案对其大型生物反应器和过滤系统实施工艺控制。为了进一步推动旗下产品系列实现标准化，SSB决定为其他产品引入新型可配置自动化系统。根据近期达成的协议，双方的合作将进一步扩大到Sartorius Stedim Biotech的其他产品。这些产品将在未来数月陆续配备西门子自动化解决方案，从而能够与Simatic PCS 7及Simatic Batch这类工艺控制系统相整合。总而言之，这些SSB的产品包括BIOSTAT® STR系列的一次性生物反应器、多款过滤系统以及FlexAct® 系统。后者是一种灵活的模块，可用于控制生物制药生产过程中的多个不同的工艺步骤。Sartorius Stedim Biotech首席技术官Oscar-Werner Reif博士解释说：“通过引入新的自动化平台并进一步实现产品标准化，我们可以帮助客户方便地将其系统整合到SCADA、MES或ERP等高端自动化解决方案中。与此同时，我们可以帮助他们更加轻松地完成工艺升级，实现从实验室规模到商业规模量产的飞跃。”Reif博士还补充说：“西门子作为自动化行业的领军企业之一，是我们理想的合作伙伴。”西门子工艺自动化业务部首席执行官Eckard Eberle表示：“我们非常高兴能够为Sartorius Stedim Biotech提供我们独特而全面的产品组合，这包括硬件、软件以及整个系统生命周期内的服务。通过双方的合作，生物制药行业的用户可以获得诸多优势，包括更高的效率、质量和灵活性以及更快的上市时间。”在2018年6月11日至15日于德国法兰克福举行的ACHEMA 2018展会上，西门子和Sartorius Stedim Biotech还联合展示了FlexAct模块——采用新型自动化平台的首款产品。关于赛多利斯斯泰帝 赛多利斯斯泰帝 (Sartorius Stedim Biotech) 是国际领先的生物制药行业设备和服务的供应商，为全球生物制药的开发与生产提供安全、及时、经济的一体化解决方案。作为完整解决方案的供应商， 赛多利斯斯泰帝提供几乎涵盖生物制药工艺所有步骤的产品组合。公司致力于推广一次性使用技术和增值服务，满足生物制药行业快速发展的技术需求。公司总部位于法国欧巴涅，在巴黎的欧洲交易所上市；因其位于欧洲、北美和亚洲的生产与研发中心以及遍布全球的销售网络而享誉世界。 联系我们                    电话：400.920.9889 / 800.820.9889 传真：021.68782332 邮箱：info.cn@sartorius.com官网：www.sartorius.com.cn

近年来，在全球生物制药行业稳步发展的大背景下，我国生物制药行业发展正如火如荼，研发投入、生产能力、产业集中度均进一步提升。同时，国家政策积极，出台了一系列优惠政策，为我国生物制药产业发展提供了良好的大环境。为了帮助来自生物制药领域的用户学习、了解生物制药研发、生产、质量控制各工作流程中的创新解决方案，以提升生物制药用户的工作效率和质量，仪器信息网特别策划了“生物制药创新解决方案”系列采访。本期，仪器信息网于CPhI 2018期间采访了国际领先的制药和实验室设备供应商赛多利斯微生物检测销售产品经理李振国，以了解在生物制药质量控制环节的用户需求及赛多利斯可以提供的创新解决方案。赛多利斯微生物检测销售产品经理 李振国Instrument：2017新版GMP对药品质量控制中物料和产品放行环节做了更为严格的要求，请问 赛多利斯针对该环节可以提供哪些解决方案？李振国：目前，整个制药行业对质量放行要求越来越严格。在制药产品放行阶段，要做的检测多达几十项，其中30%的检测是针对微生物的检测，其它为理化检测。在所有检测中，由于微生物检测影响因素比较多，结果不达标的情况也最多。赛多利斯可以为用户提供微生物限度检测、微生物无菌检测、支原体检测及其它一些快检应用解决方案。我们的产品设计原则是方便用户操作，便于客户溯源，帮助客户得到精确的检测结果。质量源于设计，只有在各个环节保持严格要求，保证精确的测量，才能得到一个好的质量控制结果。在整个药品质量控制过程中，几乎所有实验都需要称重。电子天平是赛多利斯的拳头产品，针对制药行业，我们专门设计了符合GMP、药典要求的电子天平产品，其中包括对人员操作、数据管理、多级权限的要求，能实现针对不同环境、温度的全自动校准。此外，赛多利斯还能提供纯水制备的完整的解决方案，以及其它一些实验室通用设备，比如水分仪、离心机、过滤器、移液器和吸头等。赛多利斯六大王牌技术展示Instrument：请问针对细胞治疗产品，赛多利斯有哪些快速放行的解决方案？有何特点？李振国：针对细胞治疗产品，客户的需求之一是快速放行。因为细胞治疗产品的有效期很短，一般是在72小时左右。在传统生物制药行业里面，企业还是用传统的培养法进行微生物检测，因为这是药典规定的方法；而来自新兴的细胞治疗领域的客户，既需要按照现行药典做传统检测，又要根据产品特性实现快速放行。赛多利斯既有传统的基于培养箱培养法的微生物限度检测、无菌检测的解决方案，能为用户提供相关仪器耗材；同时，针对细胞治疗、基因治疗产品这种新的应用要求，我们也开发了一系列全新的基于qPCR技术的快速检验试剂盒。传统无菌检查出结果周期需要14天，快速检测只需要4小时，传统的支原体检测需要28天，快速检测也只需4小时。针对细胞的无菌放行，赛多利斯推出基于qPCR技术的快速放行检测试剂盒，能够帮助客户快速得到无菌检测结果。Instrument：由于生物样本对环境变化敏感，因而生物制药行业对环境监控要求严格，请问赛多利斯产品在这方面表现如何？李振国：在关键区域环境监控里面非常重要的一项是浮游菌的检测。目前常用的检测方法是安德森撞击法，该方法的缺点是无法长时间连续采样，另外客户在对不同位点采样时，需要对采样头进行灭菌或消毒。赛多利斯做了优化改进，用一次性的采样头代替不传统采样头，客户进行实验时只需将无菌包装拆开，安装上去就可以采样了，不再需要提前灭菌，即取即用，同时还优化了截留率。此外，赛多利斯能提供一个更严格的浮游菌采样方式——过滤法，使用截留率达到99%以上的可溶性凝胶膜，能够连续采样长达8小时。赛多利斯展台Instrument：目前，生物制药行业用户在微生物质量控制与质量保证方面存在哪些痛点？李振国：最大的痛点是客户难以获得准确的、可重复的测量结果。影响因素太多，对微生物检验来说更是如此，由于采取抽样检查，想得到可重复的测量结果是非常难的。赛多利斯能提供给客户完整的解决方案，帮助客户做好风险控制，消除操作过程中不必要的风险，减少交叉污染的来源，帮助用户得到准确的结果。

近年来，在全球生物制药行业稳步发展的大背景下，我国生物制药行业发展正如火如荼，研发投入、生产能力、产业集中度均进一步提升。同时，国家政策积极，出台了一系列优惠政策，为我国生物制药产业发展提供了良好的大环境。为了帮助来自生物制药领域的用户学习、了解生物制药研发、生产、质量控制各工作流程中的创新解决方案，以提升生物制药用户的工作效率和质量，仪器信息网特别策划了“生物制药创新解决方案”系列采访。　　本期，仪器信息网于CPhI 2018期间采访了国际领先的制药和实验室设备供应商赛多利斯生物分析产品应用专家李倩，以了解在生物制药前期研发环节的用户需求及赛多利斯可以提供的创新解决方案。赛多利斯生物分析产品应用专家 李倩　　Instrument：作为国际领先的制药和实验室设备供应商，赛多利斯在生物制药研发方面有哪些解决方案?　　李倩：赛多利斯总体来讲包括两大部门，生物工艺部门和实验室产品与服务部门。生物工艺部门拥有广泛的产品组合，主要致力于一次性使用解决方案，旨在帮助生物制药公司安全、有效地生产生物技术药物和疫苗;实验室产品与服务部门则通过其优质的实验室仪器、耗材及服务，为制药企业的研发实验室、质量控制实验室，以及学术科研机构提供产品与服务，满足其需求。　　两大部门的产品组合起来，可以满足生物制药企业从上游到下游，从研发到生产再到质量控制的一系列需求。赛多利斯对于生物制药实验室分子开发、细胞株开发，包括先导化合物的发现、先导化合物的优化、候选表征、基因克隆、细胞株筛选和鉴定、细胞株表征、细胞建库等一系列环节提供完整解决方案，涉及产品类别非常多，包括新型高通量筛选平台、过滤检测、纯化工具，还有微生物检测、一次性生物反应器，有非常多的产品组合来帮助客户完成产品开发和生产。赛多利斯解决方案——生物制药研发实验室　　Instrument：近两年来，赛多利斯相继收购了美国Intellicyt 和Essen BioScience这两家公司，将产品进一步扩展到生物分析领域，请问赛多利斯通过收购获得了哪些生物分析平台?这些平台在生物制药研发工作流程中能发挥怎样的作用?　　李倩：确实，这两年赛多利斯对生物分析领域比较关注，动作也比较多，首先我们在2016年收购了美国Intellicyt公司。这是一家非常具有创新性的公司，开发了一个非常强大的生物分析的平台——iQue Screener PLUS。iQue Screener PLUS平台通过工作流程无缝整合了仪器、软件和试剂，能够对悬浮液中的细胞和微球进行快速、高内涵复合分析;与传统流式细胞仪相比，检测速度大概快5-10倍，能够以最快的采样方式从小样本生成高内涵数据，这对于珍贵或数量有限的细胞进行筛选是理想的选择;可根据用户的不同需求来定制整体的方案，帮助用户进行抗体开发、小分子药物开发、肿瘤免疫治疗研发等，应用领域非常广。所以，iQue Screener PLUS在不同方面都会有独特的优势，这也是为什么赛多利斯会收购Intellicyt。它可以拓展我们生物分析的产品，去解决非常新的问题。　　2017年，我们又收购了美国Essen BioScience公司。Essen聚焦在实时活细胞成像技术，除药物研发领域，在研究机构应用也非常广，比如免疫研究、肿瘤研究、干细胞研究、神经研究等。通过实时动态检测，相比高内涵分析可以了解到更多信息;用户可以实现远程监控，细胞在培养箱里不需要取出来。　　通过对IntelliCyt公司的收购，赛多利斯进入了生物分析领域，而Essen的收购则显著扩大了我们生物分析的业务范畴。在免疫肿瘤学、抗体开发和干细胞研究等快速发展的领域中，创新的分析方法是获得科技进步的关键因素。赛多利斯这两项强大的生物分析技术将协同发挥作用，为我们的客户提供最广泛的、业内最具创新性的细胞分析平台与服务。　　Instrument：免疫治疗仍是当前生物制药领域关注的焦点，请问赛多利斯更关注哪些免疫治疗细分领域?针对这些细分，赛多利斯可以为用户提供哪些解决方案?　　李倩：免疫治疗确实是大家非常关注的，这里面有两个大家特别关注的细分：CAR-T细胞治疗和免疫检查点抑制剂药物，如PD-1/PD-L1抗体。去年(2017年)，FDA先后批准了两个CAT-T细胞的疗法，事实上中国在CAT-T细胞治疗方面有非常多的机会，从临床试验的申报数量上看，中国仅次于美国，排名全球第二;关于免疫检查点抑制剂，2011年首个CTLA-4抗体上市，2014年首个PD-1抗体上市，这个月CFDA刚刚批准了国内首个PD-1抗体Opdivo上市，大家可以发现免疫治疗已经越来越多的应用到临床上。　　这两个细分领域也是赛多利斯非常关注的，我们能提供比较多的解决方案。针对CAR-T细胞治疗，生物制药实验室需要去研发、改善CAR-T细胞的疗效，如果研发人员在研发阶段就能筛选出免疫状态最好，能够有效活化，对肿瘤杀伤能力最强的CAR-T细胞，这样就能大大提高其研发效率。赛多利斯现在有一些工具，包括前面提到的iQue高通量筛选平台，可以帮助用户在前期研发阶段筛选出体外杀伤能力最强，或者说免疫应答最强的细胞。此外，目前市面上获批的CAR-T细胞产品使用的是第二代的CAR结构，目前CAR-T已发展到第四代，未来也会有第五、第六代的CAR，那我们的工具可以帮助筛选出更优化的新一代CAR。　　此外，抗体药的开发流程中有很多流程环节，比如筛选能和靶标结合的抗体，有关亲和力、种属特异性以及功能性的一系列检测。赛多利斯的iQue、 Essen、移液器、超纯水系统等一些列产品都会用到这些前期研发环节中来。通过把这些产品整合到药物研发流程中，赛多利斯能为客户提供一个快速高效的完整解决方案，帮助客户加快研发进程，缩短研发周期。赛多利斯展台　　Instrument：目前，生物制药行业用户在药物研发过程中亟待解决的痛点有哪些?　　李倩：随着国内生物制药需求的不断扩大，生物制药企业面临着机遇的同时，也面临诸多挑战。　　第一，新药研发耗时长，通常需要十年左右，甚至更久，成本高，风险大。因此国内有不少生物制药企业还处于仿制药的阶段，创新性还有待进一步加强。除了研发投入要加大以外，创新药物持续的发展和进步依赖于新的靶标发现和开发，这需要创新技术和平台来提供强有力的支持。比如近年来，抗体药在癌症、心血管疾病和自身免疫疾病等多种疾病治疗中已取得了巨大成功，与抗体工程和研发中的创新技术进步有关。通过采用强大的分析技术可以快速获取多因素结果，并充分了解候选抗体在疾病发生中的细胞与分子机制。通过创新可以加速药物开发速度，增加研发选择，并提高生产效率，降低成本。　　第二，药物研发流程包含多个试验环节，不同环节会涉及到很多不同的技术或者平台，通常需要上游和下游技术的有效配合，以及这些平台之间的数据有效整合，从而获取一个综合性的结果，作出决策，并进入下一流程。如果可以简化整个工作流程，降低多个平台之间来回切换造成的错误风险，同时又能获得一些综合性的信息，这样客户在早期研发阶段就能进行更多的预判，可以降低下游研发工作失败的风险。

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在肝脏内，胆管以管道网络形式分布，可将肝脏分泌的胆汁输送到肠道。在胆道疾病中，胆汁运输障碍会导致肝脏内毒性胆汁淤积、肝脏损伤及永久性瘢痕 （肝硬化），最终只能通过肝移植来治疗。实际上，胆道疾病（胆管病）是导致儿童肝移植的首要病因（70%），占成人肝移植病因的三分之一。虽然此类疾病影响巨大，但我们对于胆道疾病发病机制的了解仍十分有限，一方面由于缺乏有效的实验模型，另一方面因为胆管细胞（胆管上皮细胞）体外培养非常困难。此外，目前治疗方法有限，既缺少特效药物，也缺乏手术重建或替换病灶胆管所需的正常细胞和组织。我的研究重点就是解决这些难题。具体而言，我的研究目标是开发一套适合人胆管上皮细胞体外生长的系统；利用这些细胞构建胆管病体外模型；并利用这种体外模型筛选、测试和发现新的胆道疾病治疗药物。我还尝试利用健康胆管细胞构建生物工程胆管，并在动物模型中证明其能够用于胆道的手术重建或替换。培养人胆管上皮细胞人胆管上皮细胞的培养面临两大阻碍，即：不通过手术方式获取胆管组织，以及胆管上皮细胞原代培养过程中功能会丧失。为了解决组织获取的问题，我设计了一套从人诱导性多能性干细胞 (hIPSC) 获取胆管上皮细胞的操作流程，而hIPSC可方便地从患者皮肤样本中获得。为了在体外培养中保留人胆管上皮细胞的功能和特性，我采用三维培养方式将细胞培养成类器官，后者呈现中心有空腔的囊状或管状结构 (1, 2)。类器官围绕管腔逐渐发育形成的结构类似于天然的胆道，这种hIPSC来源的胆管上皮细胞功能更好，生长更快。该方法也首次实现了利用切除的胆管或胆囊大量培养人原代胆管上皮细胞 (3)。为了证明这种类器官平台既具有培养优势，又能保留正常的胆管上皮细胞功能，我将hIPSC来源的胆管上皮细胞或原代培养物与人体内胆管细胞进行了生理和功能比较。实验结果表明，类器官培养获得的胆管上皮细胞与体内来源的人胆管细胞类似，是目前为止最为准确的体外胆管上皮细胞平台。构建胆道疾病体外模型我假设，胆道疾病患者的胆管上皮细胞在体外培养时可重现这些疾病的关键特征。通过采用Alagille综合征 （AGS）、多囊性肝病 （PLD） 和囊性纤维化 （CF） 患者的胆管上皮细胞来验证这一设想。无一例外，上述每种疾病的表型都在实验中得以重现 （AGS，缺乏管腔；PLD，形成囊肿；CF，类器官管腔氯转运缺陷），从而为上述疾病提供了首个体外胆道模型 (1)。药物筛选随后，我利用构建的疾病模型对已知药物（奥曲肽）和新药化合物进行筛选，结果显示，一种最初用于治疗肺囊性纤维化的实验性药物（VX809），也可用于预防肝囊性纤维化 (1)。这一发现极为重要，因为VX809已经进入2期临床试验，有望很快对肝囊性纤维化治疗进行检验。该结果是体外筛选胆道疾病药物的首批成功应用。生物工程胆管的构建和移植在某些情况下，例如胆管闭锁，也是儿童肝移植的首要病因，胆道系统的共同出口（胆总管）缺失，唯一的治疗方法就是手术。此时，使用生物工程胆管可以作为肝移植外的另一种选择。为了实现这一目标，我开发了一种使用正常胆管上皮细胞构建生物工程胆管和胆管组织的方法 (3)。这种生物工程器官保留了人体胆管的构造、结构特性、标志物和功能（碱性磷酸酶和γ-谷酰基转移酶活性）。将这种生物工程胆管移植到免疫缺陷小鼠体内，成功替代了原本的胆管。此外，接受人工胆管移植的小鼠肝功能正常，生存期延长。据我所知，这是首次在胆管系统中应用器官工程，也是使用类器官构建生物工程器官的首例报道。结论本研究开发的一系列工具在胆道疾病领域具有独特的转化应用。我已证实，胆管上皮细胞类器官系统构建了首个体外胆道疾病模型。这些模型可加深我们对于疾病发生机制的了解，并且可进行技术转移，让该领域工作的多个研究组获益。此外，该系统搭建了胆道疾病药物筛选的首个平台，并且我已从原理上验证，该系统在肝移植作为唯一治疗手段的胆道疾病领域展现出新药开发潜力。最后，通过构建工程胆管，我从原理上验证了再生医学可以作为胆道疾病的一种治疗方法，并且通过开发出适用于多种器官和组织再生的技术，推动器官再生领域的发展。 参考文献1.F. Sampaziotis et al., Nat. Biotech 33, 845 (2015).2.F. Sampaziotis et al., Nat. Protocols 12, 814 (2017).3.F. Sampaziotis et al., Nat. Med. 23, 954 (2017).本文由赛多利斯翻译，阅读英文原文请点击：http://science.sciencemag.org/content/359/6380/1113.2.full 第二届Sartorius & Science Prize已如约而至！快来参与评选，向全世界展示你的研究成果！点击图片了解活动详情关于赛多利斯赛多利斯集团是国际领先的制药和实验室设备供应商，包含两大业务部门：生物工艺部门和实验室产品与服务部门。生物工艺部门拥有广泛的产品组合，主要致力于一次性使用解决方案，帮助客户安全有效地生产生物技术药物和疫苗。实验室产品与服务部门则通过其优质的实验室仪器、耗材和服务，为实验室研究、制药和生物制药的质量保证以及学术研究机构提供产品和服务，满足其需求。公司成立于1870年，总部位于德国哥廷根，在全球设有50多个生产和销售基地。 联系我们                         电话：400.920.9889 / 800.820.9889传真：021.68782332邮箱：info.cn@sartorius.com官网：www.sartorius.com.cn 想获取更多活动和技术信息吗？关注“赛多利斯生物工艺”官方微信，了解更多  

Hannes Landmann博士，Sartorius Lab Instruments(德国哥廷根)Kristin Menzel博士、科学作家(德国哥廷根)1908年，Paul Ehrlich受到“Zauberkugel”概念的启发，首次在理论上描述了将毒性药物组装到所谓的“纳米载体”上。1 如今，纳米载体已在现代医学和生物技术领域有多种应用。这些特殊纳米材料的一项关键应用就是药物定向输送，它们可发挥药物活性成分转运模块 (即：纳米颗粒、囊泡或胶束) 的作用。2,3,4,5人们推测这种方式与传统给药方法相比对人体更为有效，且毒性更低。6除了药物输送外，过去数十年间还发展出其他一些应用纳米载体的领域，例如利用金属纳米颗粒进行磁共振成像或干细胞基因治疗，7,8 或者利用量子点进行光学成像。9纳米载体可以按照其初始材料 (即；金属、脂质、聚合物和蛋白) 以及制成后的构成 (即：囊泡、颗粒和胶束) 进行分类。一般而言，水性介质中纳米颗粒混悬液或囊泡分散液的制备包括三个步骤：a) 纳米载体组装 (例如通过注射、薄膜水化或反相蒸发)、b) 纯化 (例如：色谱、透析或超滤) 和 c) 浓缩 (如超滤或蒸发)。这份短篇综述举例介绍了近期关于纳米载体制备的一些文献。重点介绍了浓缩和纯化步骤，该步骤使用不同孔径 (相应的截留分子量 (MWCO)) 的Sartorius Vivaspin® 或Vivaflow® 设备通过超滤完成。Vivaspin® 系列产品的体积范围是从0.5 mL至20 mL，而Vivaflow® 系统则涵盖了从0.05升到5升的范围。因此，Sartorius能够处理的样本体积、膜材料和MWCO范围无与伦比，可满足不同预期用途的需求。这方面的挑战包括合成后的缓冲液更换、脱盐和清洗10,11、去除溶解的化合物12,13,14 或聚集物。15纯化过程十分重要，通过纯化可以达到等渗状态，以便在体内应用时避免发生聚集或凝聚，还可去除毒性药物、配体或其他可能引起副作用的物质。浓缩步骤的重要意义在于调节药物中活性成分的含量，以便达到预期的治疗或诊断效果。 纯化时，通过分子排阻色谱 (SEC) 将游离物质 (起始材料) 与预期得到的纳米载体分离，这不可避免地导致产物稀释，并且需要后续的浓缩步骤。相比之下，透析过滤纯化时不会导致显著的稀释，但如果需要较高的纳米载体浓度，仍需要使用浓缩步骤。两种分离方法均需要大量昂贵且耗时的手工操作。通过Vivaspin® 离心或者使用Vivaflow® 系统的蠕动泵进行超滤可克服这一缺点。该技术成本较低，操作迅速，人工操作极少。值得一提的是，纯化和浓缩步骤可同时进行。16纳米载体纯化后，通常需要测定载药量 (偶联或包囊效率)。偶联或包囊效率是描述和鉴定纳米载体的一个参考值。其他重要性质包括ζ电位和粒径分布，后者可通过光子相关光谱 (PCS)、高分辨率传递电子显微镜 (HRTEM) 成像或动态光散射 (DLS) 测定。在进行这些不同的鉴定前，需要成功地对混悬液或分散液进行纯化和浓缩。 下表为您概括列出了使用超滤步骤对各种纳米载体进行纯化和浓缩的文献。该表还可指导您使用多大的MWCO。表1汇总了使用Sartorius Vivaspin® 或Vivaflow® 进行纳米载体超滤的应用示例：纳米载体：纳米颗粒、囊泡、胶束通过 (HR)TEM或DLS获得粒径分布，通过PCS或其他方法获得Z-平均值 (如有报道)应用来自金属、金属氧化物和功能化金属的纳米颗粒带有含顺铂聚合物涂层的氧化铁纳米颗粒SD：4.5 ± 0.9 nm (X-射线衍射分析法)磁共振成像功能化氧化铁纳米颗粒SD：38和40 nm (DLS法)干细胞基因治疗和追踪金纳米颗粒SD：0.8 – 10.4 nm (原子力显微镜法)抗菌活性蛋白包被的金纳米颗粒SD：15和80 nm (TEM法) 药物输送功能化金纳米颗粒核心SD：2 nm (TEM法)靶向成像工具和抗原输送功能化钆纳米颗粒 Z-平均值：1.1 ± 0.6 nm和4 – 14 nm诊断和治疗应用功能化纳米晶体 SD：10 to 20 nm量子点成像来自聚合物、功能化聚合物和高分子囊泡的纳米颗粒聚合物纳米颗粒药物输送凝胶多糖包被的聚合物纳米颗粒Z-平均值：280 – 480 nm，具体取决于组成巨噬细胞刺激活性和药物输送多西紫杉醇-羧甲纤维素聚合物纳米颗粒Z-平均值：118 ± 1.8 nm抗癌功效研究功能化高分子囊泡Z-平均值：185 nm表面功能化研究脂质纳米颗粒和脂质体脂质体和胶束Z-平均值：脂质体100 nm，胶束15 nm缺血再灌注损伤固态脂质纳米颗粒Z-平均值：100 – 120 nm，具体取决于所用脂质 药物输送 (脑靶向)细菌外膜囊泡SD：124 nm (TRPS法)可调电阻脉冲传感 (TRPS) 分析细菌外膜囊泡基础研究细菌外膜囊泡SD：95 nm 基础研究细菌外膜囊泡SD：50 – 150 nm (TEM法)基础研究脂质体 药物输送脂质体 胶囊亲水性药物(药物输送)胶束胶束 药物输送基于聚合物的疏水性药物胶束SD (DLS法)：39 – 165 nm，具体取决于所用化合物药物输送蛋白纳米颗粒蛋白纳米颗粒 SD：20 – 40 nm (DLS法)药物载体研究SD = 粒径分布 Sartorius超滤设备MWCO 超滤目的参考文献Vivaspin® 20 100 kDa纯化和浓缩步骤7Vivaspin® 20 100 kDa清洗步骤8Vivaspin® 20 5 kDa 纯化步骤17Vivaspin® 610 kDa 分离纳米颗粒 | 染料和清洗18Vivaspin®  10 kDa纯化步骤19Vivaspin® 5 kDa、10 kDa 纯化和浓缩20, 21Vivaspin® 300 kDa和50 kDa(计数前) 从初始材料中分离出量子点-抗体偶联物9Vivaspin® 30 kDa 纯化和浓缩22Vivaspin® 20 3 kDa  清洗23Vivaspin® 10 kDa  浓缩步骤24Vivaspin® 20 10 kDa 浓缩步骤3Vivaspin® 20 100 kDa浓缩步骤25Vivaflow® 50 100 kDa 纯化步骤26Vivaflow® 200 100 kDa  缓冲液更换和浓缩步骤27Vivaspin® 20和500100 kDa缓冲液更换和浓缩步骤28Vivaflow® 200100 kDa缓冲液更换和浓缩步骤29Vivaspin® 100 kDa 缓冲液更换和浓缩步骤30Vivaspin® 100 kDa 外部缓冲液更换2Vivaflow® 50 100 kDa 去除游离药物31Vivaspin® 30 kDa 分离游离物质和浓缩步骤4Vivaflow®  去除表面活性剂14Vivaspin® 5003 kDa将游离药物与胶囊药物分离 (通过后续的紫外线-可见光分析进行药物结合定量)32参考文献1.Strebhardt, K & Ullrich,A:Paul Ehrlich's magic bullet concept: 100 years of progress8, 473- 480 (2008).2.Jakoby,J.. 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 2018年3月20日，在德国哥廷根大学Adam-von-Trott-Saal宴会厅，哥廷根大学校长Beisiegel博士/教授、Sartorius执行副总裁、集团执行委员会成员Gerry MacKay及Science系列杂志出版人Bill Moran一起正式宣布庆典开幕。这一颁奖典礼是为了表彰并庆祝4位杰出的研究人员取得的成就，他们参与竞逐2018年首次颁发的Sartorius & Science Prize for Regenerative Medicine & Cell Therapy年度大奖。出席现场的嘉宾有100位，他们是来自14个国家和地区相关行业和学术研究机构的代表，这些嘉宾也出席了在哥廷根举办的第二届Research Xchange论坛。在大家热烈地掌声中，Science 杂志 (AAAS) 生物医学编辑Priscilla N. Kelly博士和Sartorius实验室产品与服务事业部副总裁KarenStorm为大奖冠军得主和三位亚军隆重颁发了这项备受赞誉的奖项。祝贺各位获奖者，非常感谢所有参与者让这个颁奖典礼成为一次极为难忘的盛会。   2017年度冠军 - Kole Roybal博士加州大学旧金山分校助理教授2017年度亚军 - Shruti Naik博士美国洛克菲勒大学 | Damon Runyon癌症研究员2017年度亚军 - Fotios Sampaziotis医生、博士英国剑桥大学 | 临床讲师2017年度亚军 - Will McLean博士Frequency Therapeutics公司 | 共同创始人及生物学与再生医学部副总裁《Science》杂志编辑Priscilla N. Kelly博士，出席活动并发表演讲生物医学编辑，美国科学促进会(AAAS) / 《 Science》杂志2014年诺贝尔化学奖得主Stefan W. Hell博士，出席活动并发表演讲。第二届Sartorius & Science Prize，于2018年4月1日如约而至。快来参与评选，向全世界展示你的研究成果！点击图片了解活动详情 赛多利斯SCIUS. 汇集科学知识，让您一目了然。点击图片查看更多应用、文章、视频、网络讲座和案例。   

澄清速度加快70%！ 一步完成操作！除菌过滤高达1000mL 的哺乳动物细胞培养液！   没错，这就是全新的一次性技术“Sartoclear Dynamics® Lab”，它用于高密度哺乳动物细胞培养液的收获，使用该产品的过程中无需再使用冗长的离心步骤，澄清和除菌一步完成，具有结果一致性高、易于使用、快速、澄清度高等特点。    该产品由两部分组成。一部分是预润湿的高纯度硅藻土，该硅藻土经过优化，为性质稳定的惰性物质，且经过纯度处理和验证，无菌无内毒素，非常适于细胞培养液的收获。另一部分是赛多利斯的传统优势产品，0.22um PES的除菌级滤器，具有高流速、高通量的特点。 Sartoclear Dynamics® Lab产品组合操作非常简单仅需将助滤剂倒入细胞培养液，简单混匀，倒入0.22um真空抽滤滤器进行抽滤即可，5-15分钟内实现15ml-1000ml高密度细胞发酵液的快速收获。  新品视频首发，点击一探究竟：   Sartoclear Dynamics® Lab 1月份上市后已经在欧美众多客户中获得广泛的认可和应用。现在中国市场正式隆重推出，帮助广大的中国用户告别离心机和冗长的收获步骤！ 现在，只需一步，您就能抢先体验新品试用！名额有限，点击按钮立即申请吧！  关于赛多利斯赛多利斯集团是国际领先的制药和实验室设备供应商，包含两大业务部门：生物工艺部门和实验室产品与服务部门。生物工艺部门拥有广泛的产品组合，主要致力于一次性使用解决方案，帮助客户安全有效地生产生物技术药物和疫苗。实验室产品与服务部门则通过其优质的实验室仪器、耗材和服务，为实验室研究、制药和生物制药的质量保证以及学术研究机构提供产品和服务，满足其需求。公司成立于1870年，总部位于德国哥廷根，在全球设有50多个生产和销售基地。 联系我们                         电话：400.920.9889 / 800.820.9889 传真：021.68782332 邮箱：info.cn@sartorius.com官网：www.sartorius.com.cn想获取更多活动和技术信息吗？关注“赛多利斯实验室”官方微信，了解更多 

ambr技术作为高通量微型生物反应器的业内翘楚，自面世以来广受行业青睐。为答谢中国生物制药用户对该技术的热爱与支持，共建创新细胞培养技术的交流平台，赛多利斯近日成功举办了第二届 "ambr® CLUB” 技术交流会。众多业内专家齐聚上海，共商ambr大“技”。                                              上海药明生物副总监孙瑞强先生就“应用ambr系统提高药物CMC研究中的效率”发表了演讲。孙先生首先提出在药物CMC研究中面临的首要挑战——如何加快药物开发进度，同时结合多个实际案例及数据展示了ambr系统在克隆筛选和工艺开发等方面所表现出的卓越性能。百济神州项目经理任智颖女士分享了“ambr 15结合DoE在早期工艺开发中的案例研究”。任女士主要分享了ambr 15在克隆筛选和克隆评价等方面的应用案例，结合DoE考察了克隆在不同pH、温度以及补料方式等因素影响下的产量和糖基化水平，同时对DoE模型构建和分析进行了详细的解说。赛多利斯中国区上游产品应用专家林康分享了“提高表达量——通过培养基优化平台CHOptimizer®加快培养基开发”。他介绍了培养基优化在整个上游工艺开发中的重要性和必要性，并对CHOptimizer®培养基优化平做了详细介绍。结合多个欧美国家的应用案例，通过实际数据展示了该平台在加快工艺开发进度方面所具备的独特优势。赛多利斯中国区单抗上游工艺开发平台专家王延涛分享了“如何将QbD应用于上游工艺开发”。他首先介绍了QbD在上游工艺开发过程中的重要性以及目前面临的挑战，随后详细介绍了QbD执行的步骤和流程，同时结合案例进一步阐述了利用QbD相关工具所能实现的收益。赛多利斯ambr产品应用专家 Sunil Chhatre先生分享了“ambr软件高级功能实操演练及维护保养常识”。Sunil通过软件演示详细介绍了ambr系统执行DoE方案进行相关实验的应用，并展示了ambr系统强大的DoE软件整合、执行和分析能力。同时，Sunil向大家介绍了最新推出的ambr 250灌注培养系统，并通过实际数据证实了 ambr 250 灌注培养系统的强大功能。 精彩瞬间 ambr® 明星家族掠影 ambr® 15 高通量细胞培养系统以经济高效的方式对24或48个10-15mL生物反应器进行并行流加培养操作ambr®15高通量微生物发酵系统配有24个8-12mL微型生物反应器，可进行并行流加式微生物发酵的高通量自动化生物反应器系统 ambr® 250高通量生物反应器系统完美整合了12个或24个全功能的一次性100-250mL的微型生物反应器和灵活的软件，高效管理大量实验的同时节约了每个实验的经济成本。 ambr 250高通量灌注培养系统最多可同时运行24个完全一次性的灌注生物反应器，灌注工艺开发能力的飞跃加速了强化细胞培养工艺的优化，从而降低生产体积和物料成本。  ambr® 250 Modular由一系列精心设计的台式模块组成，可并行运转1-8个全集成的微型生物反应器(100-250mL)进行微生物或细胞培养，用户可通过触摸屏直接控制系统软件。 从15mL到2000L—— 加速上游工艺研发，简化商业化生产作为上游工艺完整解决方案的引领者，赛多利斯一直致力于将最先进的技术和理念分享给中国制药企业，协助客户提高药物研发效率，更为安全、高效地生产生物制品。得益于我们对生物反应器放大设计的丰富经验，以及对自动化理念、氧气、pH值、温度和补料原理的深刻理解，我们拥有从15ml到2000L的一次性生物反应器无缝解决方案。赛多利斯今后会不定时与大家分享各类上游技术产品攻略，助力中国药企加速上游工艺研发，简化商业化生产！ 关于赛多利斯斯泰帝 赛多利斯斯泰帝 (Sartorius Stedim Biotech) 是国际领先的生物制药行业设备和服务的供应商，为全球生物制药的开发与生产提供安全、及时、经济的一体化解决方案。作为完整解决方案的供应商， 赛多利斯斯泰帝提供几乎涵盖生物制药工艺所有步骤的产品组合。公司致力于推广一次性使用技术和增值服务，满足生物制药行业快速发展的技术需求。公司总部位于法国欧巴涅，在巴黎的欧洲交易所上市；因其位于欧洲、北美和亚洲的生产与研发中心以及遍布全球的销售网络而享誉世界。  联系我们                    电话：400.920.9889 / 800.820.9889 传真：021.68782332 邮箱：info.cn@sartorius.com官网：www.sartorius.com.cn 想获取更多活动和技术信息吗？关注“赛多利斯生物工艺”官方微信，了解更多

Armin Hauk博士；Ina Pahl；Roberto Menzel；Samuel Dorey；Isabelle Uettwiller博士（以上作者均来自于赛多利斯斯泰帝生物技术）翻译审核：孙逸琳，沈亮（赛多利斯验证服务团队） 一次性使用系统（SUS）在生物制药生产中被广泛应用。这些聚合物材料中的化合物可能会在不同阶段以浸出物形式进入生产过程中，可能会影响生产工艺效率（如抑制细胞生长）或成为工艺相关的药品杂质，从而潜在影响药品质量和/或患者安全。目前，浸出物的研究主要集中于在“最差条件”或模拟情况下检测和评估单个组件的可提取物，并外推至工艺条件下的潜在浸出物。简单来说，“最差条件”和模型溶剂下，将可提取物数据进行累加来“预测”单个工艺单元或整个工艺中的SUS浸出物。按照这种思路，“最差条件”下“预测”在最终药品中的浸出物种类更多，浓度更高。然而，实际浸出物检测结果则与上述“预测”情况明显相反：实际工艺条件下检测到的浸出物并不会明显影响药品的纯度。为更好地理解动态工艺乃至成品制剂中浸出物的范围和浓度，我们针对“浸出物的命运”这一概念提出了一个范式转换。基于物理-化学机理，按来源、分布和下降来描述“浸出物的命运”。动态工艺条件下浸出物的来源，可根据菲克第二扩散定律和聚合物-基质界面质量传递（“通量”）来描述。根据这一模型，可以预测浸出物的动力学和最终平衡浓度。任何生物制药工艺中，吸附和洗脱工艺显著影响着浸出物水平，如下游过滤、分离和纯化步骤。考虑到吸附的可逆性，特别是那些去除吸附物的工艺步骤，可作为浸出物“消失的终点”。可以想象，一次性生物反应袋的浸出物吸附在宿主细胞表面和细胞碎片上。在收获步骤中去除宿主细胞和细胞碎片，也可去除吸附的浸出物，只有真正溶解的浸出物保留在工艺中。之前我们能够证明在纯化步骤中过滤和膜吸附设备中的滤膜能够非常有效地清除浸出物。典型物质的清除能力，以μg/cm2膜表面积或μg/cm3膜吸附柱床体积进行衡量。Magarian等人介绍了一项使用UF/DF清除浸出物的研究。他们证明通过渗透的方式清除浸出物，符合传统UF/DF机制。除此之外，生产过程中更多的工艺步骤可以降低浸出物含量。在进行离子交换或亲合层析时，洗脱溶液可去除浸出物。对于吸附组分来说，层析分离也是浸出物下降的一种方式。为了实现浸出物的来源、分布和下降的可计算化，只需综合考虑它们，并计算各工艺步骤和整个下游生产中的“浸出物的命运”。图1显示的是一个用于计算假定工艺中浸出物含量的动态单元模型。该模型将工艺步骤和/或工艺设备视为独立单元，将其结合起来模拟整个工艺。在每个单元中，根据基本物理-化学机理计算浸出物的来源、分布和下降。采用物料平衡条件，各单元之间的交换或排放采用液相流动模拟。图1 假定生物制药下游生产中后续工艺步骤的动态单元模型 工艺单元的输入数据包括：溶液的总体积，聚合物相的总质量，聚合物的厚度和表面积，聚合物中浸出物的原始量mo，一次性生物反应袋中的生物量，吸附剂的质量和/或表面积，以及UF/DF步骤中的透析体积。浸出物要求的输入数据包括：聚合物的扩散常数(D)，聚合物和溶液之间的分配系数(KP/L)，生物量和溶液之间的分配系数(KD-bio)，过滤器和纯化设备的比容量(Kapfilter)以及UF/DF因子(z)。 表1显示了图1中两种假定化合物A和B的单元模型计算结果。浸出物A的物理-化学参数(表1)可描述为类似于如二叔丁基苯酚异构体的添加剂降解产物，浸出物B类似于己内酰胺。对于两种化合物，我们假定它们在原材料中就存在（从包装容器中浸出），在培养基制备阶段从接触材料中迁移（混合并储存24h）。对于浸出物A和B，可观察到一次性生物反应袋中培养基内浓度在21天内升高（图示红线）；在这一时期内一次性生物反应袋聚合物材料迁移出的浸出物A和B的量逐渐降低（图示绿线）。由于浸出物A有被生物量吸附的倾向，通过分离细胞碎片能够将其从工艺中清除（图示蓝线）。这一作用对于浸出物B而言明显较弱，这是因为其水溶性好，生物量吸附的倾向较低。在工艺溶液后续处理和24h储存阶段，工艺溶液中两种浸出物的量均增加。过滤工艺能够通过滤膜去除一部分浸出物A和B。 下列使用UF/DF步骤能够非常有效地清除浸出物B，且效率高于浸出A。浸出物A的z值较低，因此保留在回流端中的倾向更高，而浸出物B的z值为0.7，能够更有效地通过渗透从工艺中清除。对于浸出物A和B，尽管在原材料中已经存在，并在生产过程中不断从接触材料中迁移出来，不同下游工艺步骤的结合可将终产品中浸出物的含量明显降低。总之，下游生产的目的是“纯化”产品，能够像对其他不需要的工艺杂质一样有效清除可能存在的浸出物。此外，计算结果显示，“靠近”患者的概念作为常用的风险评估方法是合理的，且可通过我们的模型计算得到支持。表1：浸出物A和B的输入参数概述；不同单元中A和B的计算量及制剂（DP）中A和B的最终含量浸出物A的输入参数： D =2,0E-10 cm2/s                 KP/L = 1000KD-bio = 100                          Kapfilter   = 5 μg/cm2UF/DF因子，z   = 0,5 浸出物B的输入参数：D =8,0E-10 cm8/s             KP/L = 1KD-bio = 5                         Kapfilter = 5 μg/cm2UF/DF因子；z   = 0,7                                                                                   浸出物A的产量；成品制剂中的预测量：6   mg浸出物B的产量；成品制剂中的预测量：28   mg尽管此处预测整体工艺中浸出物的方法是基于数学模型计算，其结果能够反映实际浸出物情况明显优于“最差条件”下累加的情况。通过模型计算证明，尽管浸出物有多种来源，在生物制药工艺中浸出物的下降具有重要的意义，在浸出物（风险）评估中需要考虑进去。赛多利斯技术团队已经开始进一步研究完善模型单元，以包含可能的浸出物反应，尤其是潜在的浸出物-蛋白质相互作用。模型经优化和微调后，需通过比较模型结果与中试或生产规模的实际测量值来进一步验证。赛多利斯验证服务团队是可提取物和浸出物研究的先行者，已经提供了20多年的分析测试和法规技术支持。赛多利斯提供最精准的现行法规要求和行业标准解读，与客户协作以满足法规预期，并基于客户的实际工艺条件，为其药品配方确定适当的可提取物和浸出物方案设计。参考文献Hauk A., Pahl I, Menzel R., Dorey S and Uettwiller I.: On the Fate of Leachables: An Introduction of a Concept to Investigate Leachables with a “Holistic” or System Approach; ECI Conference, Tomar Portugal, 8th -10th May.2017 Hauk A.: On the “Fate of Leachables” in Biopharmaceutical Up-Stream and Down-Stream Processes; Vonlanthen E&L-Summit, 19th October 2017, Berlin Magarian N., Lee K., Nagpal K., Skidmore K. and Mahajan E.: Clearance of Extractables and Leachables from Single Use technology via Ultrafiltration/Diafiltration; AIChE Publication, 2016 关于赛多利斯斯泰帝 赛多利斯斯泰帝 (Sartorius Stedim Biotech) 是国际领先的生物制药行业设备和服务的供应商，为全球生物制药的开发与生产提供安全、及时、经济的一体化解决方案。作为完整解决方案的供应商， 赛多利斯斯泰帝提供几乎涵盖生物制药工艺所有步骤的产品组合。公司致力于推广一次性使用技术和增值服务，满足生物制药行业快速发展的技术需求。公司总部位于法国欧巴涅，在巴黎的欧洲交易所上市；因其位于欧洲、北美和亚洲的生产与研发中心以及遍布全球的销售网络而享誉世界。  联系我们                    电话：400.920.9889 / 800.820.9889 传真：021.68782332 邮箱：info.cn@sartorius.com官网：www.sartorius.com.cn 想获取更多活动和技术信息吗？关注“赛多利斯生物工艺”官方微信，了解更多