“膜” 法学院之常见问题解决篇—困扰多时的问题都有解答了！

上期我们为您介绍了如何根据您的实验需求选择合适的超滤管，本期我们总结了超滤管使用过程中经常遇到的问题，分析问题产生的原因并给您一个完美的解决方案。

超滤膜一次使用就碎了？可能和我们的离心机有关系

超滤管如果离心转速过高，可能会导致膜甚至管子的破裂。离心机的转速与离心机的半径以及离心力都有关系，不同半径的离心机，相同转速出来的离心力也不一样，可以公式换算！说明书中明确指出使用超滤管的最大转速和离心力，做实验时要根据不同品牌的超滤管调整到离心力的承受范围内。另外，超滤管在离心机中的摆放也是有讲究的，使用角转子时，超滤管放置方式要求印有刻度一侧朝上|朝外(这样双面膜才能发挥切向流的作用)，使用水平转子没有特殊要求；要不也会发生破裂哦～在浓缩管中加入样品，不得超过最大体积。（以Turbo15 为例，若使用水平转子不得超过15ml 样品，若角转子则9ml）

双面垂直膜--窗口朝上

单面垂直膜--刻度面朝上

另外，还要注意的是，离心15ml或是50ml外管的超滤管最好使用尖底的转子，因为超滤管的底部是尖底的。如果使用圆底的转子，有可能无法把样品管放满，或是会增加外管底部磨损破损的几率。

脱盐浓缩，一个超滤管就可以搞定

浓缩用超滤管，脱盐用透析袋或脱盐柱，这是很多实验室一直沿用的实验操作。其实呢，超滤管做“脱盐+浓缩”，也是很多蛋白操作高手的小诀窍。而如果你的样品量有几十毫升甚至几升，选择赛多利斯的超滤膜包会在一小时之内完成自动换液，非常的方便哦！

另外，赛多利斯的超滤管也有针对于换液的特殊设计：

a.加2ml样品到浓缩管

b.清空滤过管

c.插入渗滤小管到浓缩管，加入10ml去离子水或是缓冲液。旋上盖子

d.重复浓缩步骤，会有98%的无机盐滤过

e.去除渗滤小管，回收浓缩后的样品

我用浓缩后的蛋白做下游分析时发现有干扰，可能原因

超过滤薄膜含有微量甘油和叠氮化钠。 如果此材料干扰分析，可用缓冲液或去离子水预清洗。如果干扰仍然存在，用0.1 N NaOH清洗，然后用缓冲液或去离子水再次清洗后甩干。同样需要强调的是，如果用NaOH处理，可能会对RC膜有一定影响，所以，尽量选择PES膜并且避免过夜浸泡。

Vivaspin超滤管系列具有专利的尖角死体积样品安全保护技术，防意外甩干，给珍贵的样品更多一道保障！另外，根据蛋白的分子量和体积的不同，Vivaspin系列有多达24种不同选择。样品处理体积包括从100μl到20ml，截留分子量也涵盖了2KDa到0.2um。

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