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解决方案

力扬:神经酰胺等14种类脂成分的HPTLC/AMD分析

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生物产业

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类脂成分
神经酰胺类化合物是由神经鞘氨醇长链碱基与脂肪酸组成神经鞘氨脂质的一类。神经酰胺分子结构具有二条长链烷基,一个酰胺基团和二个羟基基团,使其兼具亲水性和疏水性。神经酰胺在包括细胞凋亡等多种诱导生物效应中起重要的信使作用,其也参与细胞分化等多种生理及病理过程。 此外在皮肤角质层中大量存在的神经酰胺对皮肤起到了重要的屏障、粘合、保湿及抗衰老作用,这些作用使其成为化妆品行业最重要的生物添加剂之一。同时也可作为特别是各类皮肤疾病临床诊断的重要参考指标。 此类成分通常UV吸收较弱。通过AMD 2全自动梯度展开系统并结合色谱后衍生化,可在546 nm吸收波长对该类成分进行专属性的薄层色谱扫描含量测定。 本文所采用方法的优点:  简便的样品前处理方法  采用HPTLC-AMD技术获得极佳的分离度  分离时间短(150 min),溶剂消耗较低  基线分离7种不同神经酰胺及脂类及甾醇  衍生化后的神经酰胺的ng级检测限  可用于大量样品筛选及临床日常化验目的

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CAMAG AMD 2 全自动多级展开仪

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力扬:经光辐照后防晒霜的原位HPTLC-费氏弧菌生物活性分析

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生物活性
防晒油是为了保护人体皮肤免受UVA(波长320~400 nm)和UVB(波长275~320 nm)的辐射损害。然而早在1997年的研究结果[1]即显示,一些产品配方中所添加的UV防晒剂当暴露于阳光中会发生成分降解,存在潜在危害。但有关这些降解产物的毒理学相关研究迄今未见报导。本文所介绍的方法结合了色谱分离与生物活性检测技术,能够确定防晒霜产品中光降解产物的具有专属性的生物活性。 HPTLC-生物自发光联用技术系将物理及化学的分离技术与采用发光细菌费氏弧菌(Vibrio fischeri)的生物检测方法将融合的专属性分析技术。生物发光抑制剂可对细菌的新陈代谢造成干扰,其抑制活性的等级与其化合物毒性呈正相关。Vibrio fischeri细菌自1979年起就用于生态毒理学分析,特别是水样测试(德国国标DIN 38412 L34 比色法)以及化学品测试。为了将细菌作为一种HPTLC高效薄层色谱的衍生化显色手段,需要借助Bioluminex特种试剂盒(www.chromadex.com)。 瑞士巴赛尔一史达特州立实验室是该州对于食品、玩具和化妆品等各类生活用品质量进行法规监管的权力机构。作为非食品部门主任的Dr. Christopher Hohl,着力于分析日用消费品中的各种添加物,如保鲜剂、染料色素和紫外防晒剂(UV filters)等。其工作还包括针对各类有害的目标化合物开发适合的GC,HPLC以及HPTLC分析方法。最近引进的基于HPTLC-生物自发光技术的毒理学检测技术帮助该部门在筛查未知化合物时发现了数个感兴趣的具有特殊毒性的色谱成分。 与传统的检测手段相比,生物检测显示了与众不同的结果:一些在色谱中具有高UV响应值的成分斑点并未观察到生物发光的改变,而另一些斑点在生物自显影图谱中则得到了很强的表达,另外也有一些成分在2种图谱中拥有基本一致的信号强度。非常有趣的一点是,UV防晒剂的生物活性强度与其分子量具有负相关性。在1998年后推出的所有新的UV防晒剂类型(分子量均大于400),对Vibrio fischeri基本显示抑制效应。 为了比较HPTLC和HPLC方法以及鉴别降解产物,防晒霜提取物在HPTLC薄层板上展开后,将感兴趣的活性成分斑点从板上刮下并采用HPLC-DAD和LC-MS进行分析。该鉴别流程结果满意,由于HPTLC的塔板个数低于HPLC,因此薄层板上的某些个活性斑点在HPLC系统中被分开为几个色谱峰。生物发光检测下成分的峰高与传统检测方式(HPTLC-UV,HPLC-DAD和LC-MS)下的响应不呈线性关系。甚至有一个高活性成分采用各种物理-化学方法都无法得到检测。 Vibrio fischeri生物活性检测可用于2个目的:一是它独特的选择性检测机制使其可以探测到过去无法发现的化合物。第二,细菌抑制作用作为一种活性指标可以帮助甄别出哪些光降解产物需要进行更进一步的毒理学评估。

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力扬:毒性物质的费氏弧菌(Vibrio fischeri)生物自发光色谱检测

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费氏弧菌(Vibrio fischeri)生物自发光色谱
成立于1912年的Landeswasserversorgung公司作为德国历史最悠久的长距离自来水供应商,充分了解水源环境中可能存在的有毒物质和其它污染物(下称有害物质)并将它们排除在饮用水之外对其而言非常重要。在检测有害物质方面,除了常规的化学、物理化学和微生物方法外,最近新的被称作“生物测试系统”的活性检测技术被引进,譬如采用发光细菌进行有毒物质的生物自发光检测,以及胆碱酯酶抑制剂的活性检测等。 传统方法仅能对成分的化学性质进行分析,而生物测试则可以直接测定成分的活性强度。可测定的活性参数通常包括急性毒性(如导致消亡,发光抑制),慢性毒性(如生长抑制)和遗传毒性(如致突变)。生物自发光检测可测定有毒物质的急性毒性。 生物测试系统的另一个优势在于对于未知活性物质的检测。对于已知的3万余种相关化学物质及其降解产物而言,采用物理化学方法每次进行某一类成分的检测显然力不从心,因为检出的物质只能是该分析方法有针对性所要检测的,并且是具有参照物质的。 而生物测试系统的检测能力可以在一定范围内达到所有成分全部得到检测,因此对于复杂组分样品的风险评估而言,能够跨越即便采用种类繁多的化学分析也不能够充分覆盖的可检测范围。基于费氏弧菌的生物自发光显影检测是在废水分析中常用的试管法,其所测定的总活度是样品中各个活性组分活度之合,因此同时包括了成分间的拮抗作用和协同作用

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CAMAG BioLuminizer® 2 生物发光检测仪

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