离子色谱利剑出鞘，轻松解决低聚半乳糖检测难题

低聚半乳糖(Galactooligosaccharides，GOS)是一种具有天然属性的功能性低聚糖，其分子结构一般是在半乳糖或葡萄糖分子上连接1~7 个半乳糖基，即Gal-(Gal)n-Glc/Gal(n 为0-6)。

低聚半乳糖是人体肠道中双歧杆菌、嗜酸乳酸杆菌等有益菌的营养源和增殖因子，可以改善人体肠道的消化吸收功能。新生儿的消化功能比较薄弱，所以婴幼儿奶粉中都添加了低聚半乳糖的营养成分，不但能改善宝宝的消化功能，还能促进宝宝体内钙的吸收，从而增强宝宝免疫力。

中华人民共和国卫生部2008年第20号公告批准低聚半乳糖为新资源食品，作为一种新的功能性食品，低聚半乳糖在我国将具有广阔的市场前景。因此，关于低聚半乳糖的检测需求也持续增长。

低聚半乳糖极性强，并且是不同聚合度糖的混合物，这对色谱柱的保留和分离能力提出了挑战，常规色谱柱一般难以实现；此外，低聚半乳糖无紫外吸收，示差检测器可进行测定，但灵敏度不高，因此对低聚半乳糖的高灵敏度检测也是面临的另一个难题。

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低聚半乳糖原料的测定

Determination of galactooligosaccharide 

raw materials

2022年6月30日发布食品安全国家标准《食品营养强化剂 低聚半乳糖》，此标准2022年12月30日实施。标准中对于低聚半乳糖含量的测定规定了两种检测方法，高效液相色谱双柱法和高效离子交换色谱法，其中离子色谱法为仲裁法。

△Dionex™ ICS-6000多功能高压离子色谱仪

FANG FA GAI SHU

方 法 概 述

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采用磷酸盐缓冲液提取试样中游离的低聚半乳糖和乳糖，采用半乳糖苷酶将提取液中低聚半乳糖和乳糖酶解，将提取的初始溶液和酶处理过的溶液分别用离子色谱仪测定。第一步测定初始溶液中游离的半乳糖和乳糖，第二步测定从低聚半乳糖和乳糖中释放出来的半乳糖总量。利用乳糖和半乳糖的含量计算试样中低聚半乳糖的含量。

LI ZI SE PU TIAO JIAN

离 子 色 谱 条 件

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由于前处理使用半乳糖苷酶将低聚半乳糖酶解为半乳糖和葡萄糖，因此采用对单双糖具有优秀分离能力的CarboPac PA20糖分析色谱柱，氢氧化钠和醋酸钠水溶液梯度洗脱，脉冲安培检测器，进样量20μL，柱温30℃，流速0.4 mL/min，金工作电极，Ag/AgCl参比电极，糖标准四电位波形进行测定。离子色谱法对常见单双糖的分离效果如图2所示。仅需5~25 μL小体积进样即可检测ng/L~mg/L级别单双糖，无需衍生化，灵敏度高。

△IC-PAD测定常见单双糖（点击查看大图）

1-岩藻糖；2-鼠李糖；3-阿拉伯糖；4-半乳糖；5-葡萄糖；6-蔗糖；7-木糖；8-果糖；9-乳糖

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乳粉中的低聚半乳糖

Galacto-oligosaccharides in milk powder

婴幼儿奶粉中都添加了低聚半乳糖的营养成分，因此是奶粉中的必检项目。关于奶粉中低聚半乳糖的测定目前尚无国家标准出台。

赛默飞自主研发建立使用低聚半乳糖原料为对照品直接测定奶粉中低聚半乳糖的方法。利用不受奶粉本底干扰的色谱峰来定性定量，不受样品中高含量乳糖的干扰，可准确测定婴幼儿奶粉中的低聚半乳糖。此方法无需酶解，降低成本，但对色谱柱分离能力和检测器灵敏度要求较高，赛默飞ICS-6000高压离子色谱仪，配置脉冲安培检测器和Carbopac PA20色谱柱，可完全满足高灵敏度和分离度的要求。

△IC-PAD测定不同厂家的低聚半乳糖谱图（点击查看大图）

#采用离子色谱法（IC）进行低聚半乳糖的检测具有多种优势：

1.专用糖分析色谱柱对糖类物质具有良好的保留和分离效果；

2.脉冲安培检测器（PAD）对糖类物质具有特异性响应和高灵敏度；

3.无需衍生即可直接检测，重复性好；

4.单双糖、低聚糖、多聚糖、糖醇、氨基糖、酸性糖均可进行检测。

离子色谱测定糖类物质的标准方法和推荐色谱柱持续更新中！！！

（△点击查看大图）

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