产品特点
►载体大小：4.5 kb-11.5 kb
►转染方式：直接转染或通过病毒转染
►两种标记可选：mCherry/GFP等荧光标记 Puro/Zeocin/Neomycin等药物标记
1. CRISPR KI donor载体
产品介绍
CRISPR KI donor载体是由pUC19质粒改造而来。可直接转染或通过电转导入细胞。该质粒含有eGFP及PuroR筛选基因插入元件，元件两侧含有多个酶切位点，可供插入knock in所需的左右同源臂。经过改造的载体可与spCas9及sgRNA共同作用，达到在特定基因组位点插入含eGFP和Puro抗性基因的目的。
本产品通过冰盒运输，到货后请立即放入-20℃冰箱保存。
产品参数
产品名称 | CRISPR KI donor 载体 |
载体大小 | 4.5 kb |
左侧克隆位点 | Hind Ⅲ、Sph Ⅰ、Sal Ⅰ |
右侧克隆位点 | Mlu Ⅰ、Kpn Ⅰ、EcoR Ⅰ |
产品规格 | 10 μg/支 |
载体示意图
2. sgRNA-Puro/mCherry病毒载体等
产品介绍
CRISPR/Cas9 sgRNA病毒载体是慢病毒系统质粒，可直接转染或通过包装病毒感染细胞。该质粒含有gRNA骨架结构及两种标记以筛选标记基因，客户自行插入靶基因的特定sgRNA序列后，与spCas9共同作用，达到基因编辑的目的。
本产品通过冰盒运输，到货后请立即放入-20℃冰箱保存。
产品参数
产品名称 | 货号 | 载体大小 | sgRNA克隆位点 | Esp3 Ⅰ 酶切后片段大小 | 产品规格 |
sgRNA-Puro/mCherry病毒载体 | GE-20005-PC | 11.5 kb | Esp3 Ⅰ | 2 kb+9.5 kb | 10 μg/支 |
sgRNA-mCherry病毒载体 | GE-20005-C | 9 kb | Esp3 Ⅰ | 2 kb+7 kb | 10 μg/支 |
sgRNA-GFP病毒载体 | GE-20005-G | 9 kb | Esp3 Ⅰ | 2 kb+7 kb | 10 μg/支 |
sgRNA-Zeocin病毒载体 | GE-20005-Z | 9 kb | Esp3 Ⅰ | 2 kb+7 kb | 10 μg/支 |
sgRNA-Neomycin病毒载体 | GE-20005-N | 9 kb | Esp3 Ⅰ | 2 kb+7 kb | 10 μg/支 |
sgRNA-Puro病毒载体 | GE-20005-P | 9 kb | Esp3 Ⅰ | 2 kb+7 kb | 10 μg/支 |
sgRNA-Puro/GFP病毒载体 | GE-20005-PG | 11.5 kb | Esp3 Ⅰ | 2 kb+9.5 kb | 10 μg/支 |
使用说明：
（请详细阅读使用说明后再开始相关实验）
1.从-20℃冰箱中取出CRISPR/Cas9 sgRNA病毒载体，4℃融化
2.配置酶切反应液
3.37℃，酶切0.5 h
4.终止酶切反应液，将反应液加到1%琼脂糖凝胶孔，跑胶30 min，回收片段，与退火获得的sgRNA靶向序列做连接反应
5.连接产物通过转化获得阳性克隆，测序成功后经过质粒抽提即可使用
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