CRISPR/Cas9 sgRNA质粒载体

产品特点
►载体大小：4.5 kb-11.5 kb
►转染方式：直接转染或通过病毒转染
►两种标记可选：mCherry/GFP等荧光标记 Puro/Zeocin/Neomycin等药物标记

1. CRISPR KI donor载体
产品介绍
CRISPR KI donor载体是由pUC19质粒改造而来。可直接转染或通过电转导入细胞。该质粒含有eGFP及PuroR筛选基因插入元件，元件两侧含有多个酶切位点，可供插入knock in所需的左右同源臂。经过改造的载体可与spCas9及sgRNA共同作用，达到在特定基因组位点插入含eGFP和Puro抗性基因的目的。
本产品通过冰盒运输，到货后请立即放入-20℃冰箱保存。

产品参数

载体示意图

2. sgRNA-Puro/mCherry病毒载体等
产品介绍
CRISPR/Cas9 sgRNA病毒载体是慢病毒系统质粒，可直接转染或通过包装病毒感染细胞。该质粒含有gRNA骨架结构及两种标记以筛选标记基因，客户自行插入靶基因的特定sgRNA序列后，与spCas9共同作用，达到基因编辑的目的。
本产品通过冰盒运输，到货后请立即放入-20℃冰箱保存。

产品参数

使用说明：
（请详细阅读使用说明后再开始相关实验）
  1.从-20℃冰箱中取出CRISPR/Cas9 sgRNA病毒载体，4℃融化
  2.配置酶切反应液
  3.37℃，酶切0.5 h
  4.终止酶切反应液，将反应液加到1%琼脂糖凝胶孔，跑胶30 min，回收片段，与退火获得的sgRNA靶向序列做连接反应
  5.连接产物通过转化获得阳性克隆，测序成功后经过质粒抽提即可使用