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鲎试剂分类及选购-内毒素检测新手必看显色基质鲎试剂、凝胶法鲎试剂、特异性鲎试剂、动态浊度法鲎试剂、比色法鲎试剂、显色法鲎试剂、动态显色法鲎试剂、浊度法鲎试剂 、动态比浊法鲎试剂、弃G因子鲎试剂、终点显色法鲎试剂...。如果你是一位刚准备做细菌内毒素检测的实验人员,看到有这么多种鲎试剂,是不是有个疑问:“这么多种鲎试剂,我该怎么选择呢?”别急,不要被这么多名字吓到了,以下为您详细分类介绍;首先,知道什么是鲎试剂。鲎试剂是从栖生于海洋的节肢动物“鲎”的兰色血液中提取变形细胞溶解物,经低温冷冻干燥而成的生物试剂,专用于细菌内毒素检测。按原料来源分:全世界有5个种属的鲎,其中仅有中国鲎(又名三刺鲎)Tachypleus tridentatus Leach和美洲鲎Limulus polyphemus Linnaeus可制造鲎试剂,对应生产出来的鲎试剂分别为中国鲎鲎试剂(Tachypleus Amebocyte Lysate),缩写为TAL;美洲鲎鲎试剂(Limulus Amebocyte Lysate),缩写为LAL。TAL与LAL有相同的功效。按方法分:中国药典2005年版中收录了2种细菌内毒素检查法,即凝胶法和光度测定法,后者包括浊度法和显色基质法。供试品检测时,可使用其中任何一种方法进行试验。当测定结果有争议时,除另有规定外,以凝胶法结果为准。05年中国药典附录细菌内毒素检查法详见http://www.houshiji.com/newslist.asp?newsid=135&sort=2凝胶法系通过鲎试剂与内毒素产生凝集反应的原理来定性检测或半定量内毒素的方法。凝胶法鲎试剂常见规格为0.1ml/支或0.5ml/支或者更大装量,使用时应加无热原水(细菌内毒素检查用水)复溶后使用。2005年版药典中凝胶法鲎试剂结果的判断:保温60分钟±2分钟后观察结果。部分商家所说的半小时出结果的快速凝胶法鲎试剂是没有依据的,没到时间就观察结果可能导致假阴性。特异性鲎试剂(又叫弃G因子鲎试剂)是凝胶法鲎试剂的一种,细菌内毒素及β-葡聚糖均能与鲎试剂发生凝聚反应。特异性鲎试剂就是屏蔽β-葡聚糖引起的鲎试剂凝聚反应,使鲎试剂仅与内毒素起反应。一般中草药注射液成份复杂,干扰因素较多,常含有β-葡聚糖或内毒素类似物。用特异性鲎试剂能减少或消除假阳性反应。(应做对比及干扰试验)。光度测定法分为浊度法和显色基质法,这2种方法都是定量检测内毒素的。浊度法系利用检测鲎试剂与内毒素反应过程过程中的浊度变化而测定内毒素含量的方法。根据检测原理,可分为终点浊度法和动态浊度法。终点浊度法未见与商品化产品,不再赘述。动态浊度(比浊)法是检测反应混合物的浊度到达某一预先设定的吸光度所需要的反应时间,或是检测浊度增加速度的方法。显色基质法系利用鲎试剂与内毒素反应过程中产生的凝固酶使特定底物显色释放出的呈色团的多少而测定内毒素含量的方法,因使用分光光度计或酶标仪器,又称为比色法。根据检测原理,分为终点显色法和动态显色法。国内已有显色基质鲎试剂盒(终点法),早期有上海伊华以鲎三肽为原料做成的鲎试剂盒,厦门鲎试剂厂于2005推出以鲎四肽为原料的鲎试剂盒,也有少量国外产品,但到货周期长,价格远高于国产试剂。动态比色法与终点比色基本原理差不多。国产暂无动态比色法,相信很快就会面市。如果您是药厂、医院、医疗器械厂商等单位的实验人员,仅需要检测样品的内毒素限量,则应选择凝胶法鲎试剂,通过确定内毒素限值及最大有效稀释倍数,做样品的干扰试验从而确定使用的鲎试剂的灵敏度。如果您需要定量测定样品中内毒素含量则应选择显色基质鲎试剂或动态浊度法鲎试剂。动态浊度法鲎试剂一般需要配备专用的动态浊度仪或带有特定软件的酶标仪,比较适合样品量较多的用户(。显色基质鲎试剂用酶标仪或分光光度计检测。是样品数较少(少于200-300个),设备比较简陋的用户。如果已有内毒素检测专用酶标仪,则可选择显色基质鲎试剂盒或动态浊度法鲎试剂。简单的说,鲎试剂就2种:定性和定量,定性就选凝胶法(特殊产品用特异性鲎试剂)。定量就是显色法鲎试剂盒或动态浊度法鲎试剂(根据已有仪器定)。如果有动态比色法鲎试剂那就多一种选择(当然要看成本)。相信通过以上介绍您对鲎试剂已经有一定了解,聪明的你一定知道如何去选择鲎试剂了吧!特别说明:由于环境污染等原因,鲎的数量在不断减少。台湾澎湖海洋生物研究中心黄丁士副研究员正在做养殖鲎的研究,他培育出12000尾刚孵化的“一龄鲎”, 60天后有250尾脱壳成“二龄鲎”,仅有少部分“二龄鲎”再经历2周成为“三龄鲎”。“二龄鲎”到“三龄鲎”的阶段存活率只有5%,人工繁殖技术上一直未能突破“三龄鲎”的瓶頸而停滯。日本也曾经划出鲎保护区,专门用来进行人工养殖鲎,但经过多年实验以失败告终。鲎的产卵量很大,但是能活到成年的比例很小。一只鲎必需脱壳15到16次,需要15年达到成年,只有成年鲎才可以采血,因此人工养殖鲎基本上不太可能。部分酒家所谓的人工养殖大多是将成年鲎圈养起来。部分保护动物是可以经营利用的,前提是,被经营利用的必须是这些野生动物经人工养殖繁殖的后代。 因此所有酒家经营的鲎都是非法的。目前日本等国由于鲎的数量减少不得不进口美洲鲎及中国鲎原料来生产鲎试剂。因此,请看到此文的朋友不要吃鲎,也请转告您身边的亲朋好友保护它。
对于纯的香料来说,我在用GC-MS检测含量时直接进样或用溶剂稀释后进样,请问对于这种样品来说检测塑化剂时是否可以直接进样或稀释后进样呢?如果可以的话,是否要用分流模式呢?附:很多香料可以和正己烷互溶另外,对于含三乙酸甘油酯或辛癸酸甘油酯这类香精,可否用正己烷提取后直接进样?很急,在线等大家的意见,谢谢
原料检测的时候,有一批原料塑化剂超标了。供应商打电话过来,就此事件和我进行沟通,其结果不令人满意,现在把大致沟通过程讲一讲。首先我讲了我这边的检测方法,前处理过程:称取一定量原料(粉末),溶剂溶剂后,定容,上机检测。对方觉得这个方法有问题,觉得这样检测出来的结果是百分比,是用的面积归一化法,理由是全部出峰了。还问我有无原料峰。我说是外标法,选择离子扫描,怎么会出现原料峰呢。对方的处理是用溶剂溶解,再用正己烷萃取,定容,最后上机。其结果经过一系列换算(具体换算过程没听清)。交谈过程中,对方语气不善,我也弄得火气,争争吵吵的,没有有效的沟通。样品直接溶解上机检测,不比溶解后再萃取更好吗?溶解后上机,怎么成了百分比含量?标准品就是这样操作的啊。两人讲不到一起,只能挂电话。事后回想整个通话过程,因为争执,没有很好的有理有据反击她的话。但一想,估计讲了,她也听不进。这也让我想起上次另一个原料塑化剂超标的事情。我这边检测超标后,为了保险起见,公司又送外检了。结果外检报告竟然说是合格的。和第三方检测人员沟通后,对方决定按照我说的方法重新检测,最后检测结果确实超标了。和这次这个一接通,就否定这,否定那不同,双方沟通后,要想一想自己的检测方法是否更科学、合理,然后再改进。我不敢说我的方法绝对正确,对方一定得按我的方法来,但起码先了解清楚,求证后再下结论吧。有什么不对的地方,大家都改进就好。不知道其他版友有无遇到类似问题,原料检测不合格,和供应商沟通过程中,对方全盘否定,无法有效沟通的情况。