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影响物料细度及均匀度的几项主要指标 一、剪切强度(P):由转刀高速旋转带动物料,形成强大动能。因此转刀线速越大、物料得到动能越大、剪切强度越大、物料细度越好。 二、速度梯度(τ):高速旋转刀与精密配合定刀间的间隙,使物料产生较大的速度梯度。间隙越小、速度梯度越大,因此形成剪切力越大。(此项需根据物料特点选型) 三、定转刀的不同组合:各种不同转刀与定刀的组合适用于各种不相同的工艺及物料特点。并直接影响剪切能力、细度、乳化效果。 四、剪切周长(L)及剪切次率(n):在剪切乳化过程中剪切周长及单位时间内剪切次率直接影响物料的细度及均匀度。 五、剪切型与射流型:剪切型乳化机能提供较好的乳化分散细度。射流型乳化机能提供较好的搅拌翻滚力度,物料均匀度较好。 剪切型高剪切乳化机:其电机功率70~80%用在剪切力上,所出产品细度好,稳定性好,但翻滚力小,以机械剪切为,定子封死,机械强度好,压力负载大。 射流型高剪切乳化机:其电机功率70以上用在翻滚力上,所出产品均匀度好,稳定性差,但翻滚力大,以叶力剪切为主,定子开放,循环量较大,压力负载小。 定子的上部、下部以及周围都可设置不同形状的挡板,目的是抑制液面上产生旋涡,避免空气的卷入。 高剪切型搅拌机是:如果将搅拌机的罩壳做成类似于梳状的许多窄缝,并称之为定子,而位于罩壳内的搅拌叶作为转子。转子与定子的间隙很小。转子的转速高速运转,从而产生极大的抽吸力,将液体从窄缝状罩壳的上方、下方吸入壳内,再从其侧面吐出。当液体通过定子与转子之间的狭窄缝隙时,受到高剪切力的作用而破碎,达到分散混合及乳化的效果。 定子、转子的结构特征 作为转子的搅拌翼,其形式有涡轮式、带锐边的三爪式或圆柱面的梳齿状,目的是提高剪切效果。柱面梳状搅拌翼可以做成一层,二层或多层,应根据不同的分散、乳化细度要求来选用不同的形式。 定子的形式微细乳化可选择为柱面细小窄缝梳状,并可根据物料的黏度来调整缝的宽窄,一般细缝适合于低黏度液,宽缝适合于高黏度液体。此外,定子也可以做成多层,与多层的转子啮合,共同完成剪切乳化作用。 不同的定子与转子的应用 不同形式,不同层数的定子与转子,对应有不同的应用场合。通常,转子为带有尖锐边缘的三爪形式时,适合于冲击破碎的场合;转子为圆柱面梳状形式时,适合于分散乳化场合,并且定子与转子啮合的层数越多,乳化颗粒度越细,效果越好。 高剪切搅拌机的安装位置、用途及处理量 这种搅拌机有四种安装形式,即① 中心安装;②偏心安装;③倾斜安装;④槽底安装。此类搅拌机广泛用于液/液体系中低黏度物料的分散,溶解及乳化;液/固体系固体颗粒的悬浮、湿法研磨及催化加速反应。搅拌机的液处理量范围在0.2 m3—4 m3设备的最大容量为8 m3。当搅拌机安装在槽底部时,搅拌液的处理量具有很大弹性,可以对15 L~2 5OO L范围内的任意液量进行分散乳化。 组合形高剪切搅拌机 前面述及的高剪切型搅拌机完成的是搅拌机周围局部区域的分散溶解及乳化,为了使搅拌槽内所有液 体都能得到均一良好的分散混合,需要设置辅助搅拌,以此来增加涡流,帮助液体循环,使整个体系均一化。
[size=6][b][b][size=4]参照GB 7124-1986 胶粘剂拉伸剪切强度测定方法(金属对金属) 1.适用范围 规定了在室温下金属对金属搭接的胶粘剂拉伸剪切强度测定方法。本标准适用于规定条件下制备、测试的标准试样。 GB 7124-1986等效采用ISO 4587-1979《胶粘剂—高强度胶粘剂拉伸搭接剪切强度的测定》。 2.原理 试样为单搭接结构。在试样的搭接面上施加纵向拉伸剪切力,测定试样能承受的最大负荷。搭接面上的平均剪应力为胶粘剂的金属搭接的拉伸剪切强度。 3.装置 3.1试验机 使用的试验机应使试样的破坏负荷在满标负荷的15%-85%之间。试验机的力值示 值误差不应大于1%。 试验机应配备一副自动调心的试样夹持器,使力线与试样中心线保持一致。 试验机应保证试样夹持器的移动速度在(5士1) mm/min内保持稳定。 3.2量具 测量试样搭接面长度和宽度的量具精度不低于0. 05mm。 3.3夹具 胶接试样的夹具应能保证胶接的试样符合条文4的要求。 (注:在保证金属片不破坏的情况下,试样与试样夹持器也可用销、孔连接的方法。但不能用于仲裁试验.) 4.试样 4.1除非另有规定,试样应符合图1的形状和尺寸。标准试样的搭接长度是(12.5士 0. 5)mm,金属片的厚度是(2.0士0.1)mm [ISO厚度为(1.6士0.1)mm]。试样的搭接 长度或金属片的厚度不同对试验结果会有影响。 4. 2建议使用LY12-CZ铝合金、1Cr18Ni9Ti不锈钢、45碳钢、T2铜等金属材料。 4.3常规试验,试样数量不应少于五个。仲裁试验试样数量不应少于十个。 注:1.对于高强度胶枯剂,侧试时如出现金属材料屈服或破坏的情况,则可适当增加金属片厚度或减少搭接长度,两者中选择前者较好。 2.测试时金属片所受的应力不要超过其屈服强度σs,金属片的厚度t可按下式计算: t= lgτ/σs 式中: t 一金属片厚度,mm l 一试样搭接长度,mm τ 一胶粘剂拉伸剪切强度,Mpa σs —金属材料屈服强度,MPa 。 5.试样制备 5.1试样可用不带槽(如图2)或带槽的(如图3)的平板制备,也可单片制备。 5.2胶接用的金属片表面应平整,不应有弯曲、翘曲、歪斜等变形。金属片应无毛刺, 边缘保持直角。 5.3胶接时,金属片的表面处理、胶粘剂的配比、涂胶量、涂胶次数、晾置时间等胶接 工艺以及胶粘剂的固化温度、压力、时间等均按胶粘剂的使用要求进行。 5.4制备试样都应使用夹具,以保证试样正确地搭接和精确地定位。 5.5切割已胶接的平板时,要防止试样过热,应尽量避免损伤胶接缝。 6.试验条件 除非另有规定,试样的停放时间和试验环境应符合下列要求。 6.1试样制备后到试验的最短时间为16h,最长时间为一个月。 6.2试验应在温度为(2312)℃的环境中进行。仲裁试验或对温度、湿度敏感的胶粘剂 应在温度为(23士2)℃、相对湿度为45%^-55%的环境中进行。 6.3对仅有温度要求的测试,测试前试样在试验温度下停放时间不应少于半小时;对有 温度、湿度要求的测试,测试前试样在试验环境下的停放时间一般不应少于16h. 7.试验步骤 7.1用量具测量试样搭接面的长度和宽度,精确到0. 05mm。 7.2把试样对称地夹在上、下夹持器中,夹持处至搭接端的距离(50士1)mm.。 7.3开动试验机,在(5士1) mm/min内,以稳定速度加载。记录试样剪切破坏的最大负 荷。记录胶接破坏的类型(内聚破坏、粘附破坏、金属破坏)。 8.试验结果 8.1对金属搭接的胶粘剂拉伸剪切强度按下式计算: τ=P/(B×L) 式中:τ 一胶粘剂拉伸剪切强度,MPa p —试样剪切破坏的最大负荷,N; B —试样搭接面宽度,mm; L —试样搭接面长度,mm。 8.2试验结果以剪切强度的算术平均值、最高值、最低值表示。取三位有效数字。 9.试验报告 试验报告应包括下列内容: a.胶粘剂的型号和批号; b.金属材料的型号、厚度及表面处理方法; c.试样制备方法(不带槽平板、带槽平板、单片)和胶接工艺的必要说明; d.试样搭接长度; e.试样数量; f.试验结果(算术平均值、最高值、最低值); g.试样的破坏类型和数量; h.胶层的平均厚度; i.与本标准不同之处。[/size][/b][/b][/size]
第一节 概 述一. DNA的限制性内切酶酶切分析限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。它可分为三类:Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰(甲基化)作用且依赖于ATP的存在。Ⅰ类酶结合于识别位点并随机的切割识别位点不远处的DNA,而Ⅲ类酶在识别位点上切割DNA分子,然后从底物上解离。Ⅱ类由两种酶组成: 一种为限制性内切核酸酶(限制酶),它切割某一特异的核苷酸序列; 另一种为独立的甲基化酶,它修饰同一识别序列。Ⅱ类中的限制性内切酶在分子克隆中得到了广泛应用,它们是重组DNA的基础。绝大多数Ⅱ类限制酶识别长度为4至6个核苷酸的回文对称特异核苷酸序列(如EcoRⅠ识别六个核苷酸序列:5'- G↓AATTC-3'),有少数酶识别更长的序列或简并序列。Ⅱ类酶切割位点在识别序列中,有的在对称轴处切割,产生平末端的DNA片段(如SmaⅠ:5'-CCC↓GGG-3');有的切割位点在对称轴一侧,产生带有单链突出末端的DNA片段称粘性未端, 如EcoRⅠ切割识别序列后产生两个互补的粘性末端。5'…G↓AATTC…3' →5'… G AATTC…3'3'…CTTAA↑G …5' →3'… CTTAA G…5'DNA纯度、缓冲液、温度条件及限制性内切酶本身都会影响限制性内切酶的活性。大部分限制性内切酶不受RNA或单链DNA的影响。当微量的污染物进入限制性内切酶贮存液中时,会影响其进一步使用,因此在吸取限制性内切酶时,每次都要用新的吸管头。如果采用两种限制性内切酶,必须要注意分别提供各自的最适盐浓度。若两者可用同一缓冲液,则可同时水解。若需要不同的盐浓度,则低盐浓度的限制性内切酶必须首先使用,随后调节盐浓度,再用高盐浓度的限制性内切酶水解。也可在第一个酶切反应完成后,用等体积酚/氯仿抽提,加0.1倍体积3mol/L NaAc和2倍体积无水乙醇,混匀后置-70℃低温冰箱30分钟,离心、干燥并重新溶于缓冲液后进行第二个酶切反应。DNA限制性内切酶酶切图谱又称DNA的物理图谱,它由一系列位置确定的多种限制性内切酶酶切位点组成,以直线或环状图式表示。在DNA序列分析、基因组的功能图谱绘制、DNA的无性繁殖、基因文库的构建等工作中,建立限制性内切酶图谱都是不可缺少的环节,近年来发展起来的RFLP(限制性片段长度多态性)技术更是建立在它的基础上。构建DNA限制性内切酶图谱有许多方法。通常结合使用多种限制性内切酶,通过综合分析多种酶单切及不同组合的多种酶同时切所得到的限制性片段大小来确定各种酶的酶切位点及其相对位置。酶切图谱的使用价值依赖于它的准确性和精确程度。在酶切图谱制作过程中,为了获得条带清晰的电泳图谱,一般DNA用量约为0.5-1μg。限制性内切酶的酶解反应最适条件各不相同,各种酶有其相应的酶切缓冲液和最适反应温度(大多数为37℃)。对质粒DNA酶切反应而言, 限制性内切酶用量可按标准体系1μg DNA加1单位酶,消化1-2小时。但要完全酶解则必须增加酶的用量,一般增加2-3倍,甚至更多,反应时间也要适当延长。二. 凝胶电泳琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的标准方法。该技术操作简便快速,可以分辨用其它方法(如密度梯度离心法)所无法分离的DNA片段。当用低浓度的荧光嵌入染料溴化乙啶(Ethidium bromide, EB)染色,在紫外光下至少可以检出1-10ng的DNA条带,从而可以确定DNA片段在凝胶中的位置。此外,还可以从电泳后的凝胶中回收特定的DNA条带,用于以后的克隆操作。琼脂糖和聚丙烯酰胺可以制成各种形状、大小和孔隙度。琼脂糖凝胶分离DNA片度大小范围较广,不同浓度琼脂糖凝胶可分离长度从200bp至近50kb的DNA片段。琼脂糖通常用水平装置在强度和方向恒定的电场下电泳。聚丙烯酰胺分离小片段DNA(5-500bp)效果较好,其分辩力极高,甚至相差1bp的DNA片段就能分开。聚丙烯酰胺凝胶电泳很快,可容纳相对大量的DNA,但制备和操作比琼脂糖凝胶困难。聚丙烯酰胺凝胶采用垂直装置进行电泳。目前,一般实验室多用琼脂糖水平平板凝胶电泳装置进行DNA电泳。琼脂糖主要在DNA制备电泳中作为一种固体支持基质,其密度取决于琼脂糖的浓度。在电场中,在中性pH值下带负电荷的DNA向阳极迁移,其迁移速率由下列多种因素决定:1、DNA的分子大小:线状双链DNA分子在一定浓度琼脂糖凝胶中的迁移速率与DNA分子量对数成反比,分子越大则所受阻力越大,也越难于在凝胶孔隙中蠕行,因而迁移得越慢。2、琼脂糖浓度一个给定大小的线状DNA分子,其迁移速度在不同浓度的琼脂糖凝胶中各不相同。DNA电泳迁移率的对数与凝胶浓度成线性关系。凝胶浓度的选择取决于DNA分子的大小。分离小于0.5kb的DNA片段所需胶浓度是1.2-1.5%,分离大于10kb的DNA分子所需胶浓度为0.3-0.7%, DNA片段大小间于两者之间则所需胶浓度为0.8-1.0%。