沉淀器

明明是一瓶优质的血清偏偏出现沉淀和血清质量有关吗？会影响细胞培养吗？如何避免沉淀？出现沉淀如何处理？ “血清沉淀，其实属于常见现象，并不会影响血清的品质，大家不必惊慌！但很多人对这一现象还不是很了解。”为此，我们对“血清沉淀”的几个常见问题进行了总结，供广大科研青年参考。 血清沉淀是什么？血清中经常会出现肉眼可见的沉淀，其成分有多种类型，产生的原因有很多，主要有纤维蛋白、磷酸钙还有一些其它成分。1. 纤维蛋白（Fibrin）血清中肉眼可见的沉淀物大多属于这一类型。由于在生产过程中，血清采集、过滤（3 次 0.1 μm过滤）和灌装处理都是在低温条件下快速完成, 此时血清中纤维蛋白原（Fibrinogen）处于溶解状态。但在解冻之后, 血清中纤维蛋白原往往会发生凝集，形成肉眼可见的沉淀。下图是血清因反复冻融而造成纤维蛋白原的凝集2. 磷酸钙（Calcium Phosphate）这是一种常见的沉淀成分，通常会造成血清出现云雾状浑浊。当产品在 37℃保存时，这种现象尤其明显，在倒置显微镜下可观察到小黑点的存在。这些小黑点在布朗运动的作用下四处游动，常被误认为是微生物污染。3. 其他成分（Other） 血清中的其他成分也会形成沉淀，例如胆固醇形成的油脂滴和其他蛋白沉淀等血清沉淀会影响细胞培养吗？1. 细胞生长我们在出厂前都会对血清进行一系列质检测试，确保血清质量达到严格标准。血清测试和细胞培养经验也表明，其沉淀成分不会影响血清作为细胞培养添加物的表现。这一点得到了众多客户和其他血清供应商的肯定。解冻之后, 血清中纤维蛋白原往往会发生凝集，形成肉眼可见的沉淀。2. 怀疑污染磷酸钙颗粒经常会被当成微生物污染而引发不必要的担忧。一般情况下，当操作人员融化血清后注意到有雾状浑浊时，常将其存放在 4℃冰箱中观察，并考虑接下来是否继续使用。但这样会使沉淀进一步增多，反而会使血清更加浑浊，进而误以为存在血清污染。并且，在倒置显微镜下，可在血清中观察到四处游动的小黑点（磷酸钙颗粒的布朗运动），更容易使人误以为存在微生物污染。为防止这类误解的产生，我们不建议客户培养血清来验证是否存在污染，而是将血清直接接种在细菌培养基上进行培养，以观察是否有细菌的增殖。并且，进行革兰氏染色，并在油镜（100 X 10 倍）下观察可直接确认是否存在微生物污染。怎样操作可以尽量避免沉淀出现？1. 正确解冻首先，应按照逐步解冻的方式正确解冻血清：从-20℃取出后，置于 4℃冰箱缓慢解冻，最后置于室温完成解冻。如果直接从-20℃拿到室温或 37 ℃水浴解冻，则非常容易产生沉淀。在解冻过程中，请注意时不时缓慢摇晃瓶子，减少沉淀的产生。为避免反复冻融，建议您将血清分装使用。2. 使用和保存注意事项血清沉淀很难预测和避免，出现沉淀后也无需担忧，这并不会影响血清的品质。已知血清沉淀在以下条件下会有增多的可能：1) 热灭活；2) 37℃培养；3) 反复冻融；4) 伽马射线照射； 5) 2-8℃长期保存； 6) 长期保存于可自动化霜的冰箱中（温度不稳定）。血清沉淀的形成机理多种多样，具体的机理尚不十分明确。我们尚不能准确预测和控制血清沉淀的产生。目前市面上所有品牌的血清产品都存在沉淀现象，这一点可以在各品牌官方网站上关于沉淀问题的声明上得到证实。出现血清沉淀该如何处理？我们建议您采用2000 rpm 离心5分钟，取上清使用就好，比过滤方便，不需要另外准备滤心和针筒，又不容易污染。总 结：血清产品中出现沉淀属于常见现象，但不会影响血清的品质，对细胞培养而言也是没有任何问题的，大家可以放心使用！

Sigma-Aldrich/Supelco的HybridSPE荣获最佳分离产品奖HybridSPETM-沉淀技术被SelectScience.net评选为2008 最佳新分离产品　　-- HybridSPE(TM)-沉淀技术蛋白质沉淀操作简单快捷并且还具有SPE高灵敏性，适用于在LC-MS/MS分析之前，去除生物样品中的磷脂和蛋白质　　Sigma-Aldrich公司宣布：Sigma-Aldrich公司旗下品牌之一—Supelco(色谱分析和纯化产品供应商)宣布HybridSPE-沉淀技术(http://www.sigma-aldrich.com/hybridspe-ppt)被SelectScience.net评选为2008 最佳新分离产品。SelectScience.net是专门提供应用化学、临床化学和生命科学网络资源著名网站，25,000位科学家通过不记名投票来评选出Scientists' Choice Award，并且在Chicago, IL 举行的Pittconn(R) 2009宣布获奖结果。　　Sigma-Aldrich/Supelco 样品前处理产品经理An Trinh 说：“LC-MS技术的发明大大提高分析速度和分析灵敏度，但是样品前处理依旧是生物分析过程中瓶颈。我们的目标是建立全新的样品前处理平台，该平台不仅操作简单能应用于高通量操作，而且还大大提高研究数据质量。我们非常高兴我们的努力受到广大科研工作者认可。”　　HybridSPE-沉淀技术(HybridSPE-PPT)是一个简单通用的样品前处理平台，主要应用于在LC-MS 或LC-MS/MS分析之前去除血浆和血清中内源蛋白和磷脂干扰。　　在药物生物筛选过程中，研究人员会开发不同实验来药物定量、定量候选药物以及血浆和血清等生物体液中的代谢物。内源杂质引起的过高背景是定量生物分析中的一大难题，因此降低分析时间显得尤为重要。在生物分析质谱，背景过高会引起离子抑制。　　生物分析中产生离子抑制问题的是因为LC-MS或LC-MS-MS分析中磷脂以阳离子电喷雾形式存在。磷脂是生物样品中仅次于甘油三酸脂第二大脂类成分并且在生物血浆样品中有着极高的浓度。如欲了解 HybridSPE 更详细的信息，欢迎登陆西格玛奥德里奇(Sigma-Aldrich/Supelco)网站或直接联系我们：地址：上海市淮海中路398号世纪巴士大厦22楼A-B座 邮编：200020 电话：+86-21-61415566 -8136email: julie.gao@sial.com

问：31种正构烷烃，出现沉淀是什么原因？答：坛墨质检80142JB的31种正构烷烃类这一产品，储存条件为冷冻，运输条件为冰袋运输，所以客户收到产品发现安瓿瓶中有晶体析出是正常现象，需要加热以复溶20±) 。文章来源：国家标准物质中心