气相出现反峰检测器

鬼峰是液相色谱中较常出现的问题之一，导致鬼峰出现的因素有很多，在使用液相色谱仪时任何不当的操作都可能会产生鬼峰，从而影响分析结果的准确性。根据鬼峰出现的频率判断，产生鬼峰的主要因素有溶剂问题，仪器问题、流动相残留气泡以及操作不当等。&emsp &emsp 一、溶剂问题&emsp &emsp 1.有机溶剂&emsp &emsp 甲醇制备工艺相较乙腈的制备工艺来说较为简单，其杂质含量也较少。但甲醇紫外吸收范围比乙腈广，当使用紫外检测器尤其波长较低时，用甲醇做有机相会导致漂移太大产生问题。而用作梯度色谱的乙腈质量要求较高，采用进口梯度色谱专用乙腈能够很好的减少鬼峰的出现。而且如果有机相使用完后未更换新的流动相瓶，直接添加补充到旧的流动相瓶也有可能会产出鬼峰。&emsp &emsp 2.水&emsp &emsp 要保证水的“干净”，避免水中含有较多的杂质，尽量用HPLC级的纯水并且水相要现配现用，避免微生物滋长。&emsp &emsp 3.其它试剂&emsp &emsp 缓冲盐、TFA、EDTA等试剂也会对流动相造成很大的影响，尽量用纯度高的试剂配制流动相。&emsp &emsp 二、仪器问题&emsp &emsp 1.液相的流动相管路被污染&emsp &emsp 长时间使用含水量较高的流动相(尤其是加入了缓冲盐)，细菌很容易在管路中滋生，细菌产生的代谢产物或是细胞碎片会造成鬼峰出现。&emsp &emsp 2.检测器样品残留&emsp &emsp 一些样品组分在检测器流通池内残留，从而产生鬼峰的情况，这种情形，需要对流通池进行彻底清洗。&emsp &emsp 3.单向阀堵塞&emsp &emsp 由于单向阀堵塞而造成系统压力不稳，从而产生鬼峰。&emsp &emsp 4.色谱柱中组分残留&emsp &emsp 色谱柱可对流动相或系统流路内的强保留污染组分起到富集作用，在有机相比例随梯度程序变化的过程中而被冲洗出来，污染组分残留会导致鬼峰的出现。&emsp &emsp 三、流动相残留气泡&emsp &emsp 这种情况下可将流动相超声或鼓He脱除气泡并打开purge阀，大流速冲出仪器管路中的气泡，来减少气泡引起的鬼峰现象。&emsp &emsp 四、操作问题&emsp &emsp 1.流动相配置过程中受到污染&emsp &emsp 主要是盛放流动相的容器或是样品瓶受到污染。这种污染可能来自于洗涤剂、铬酸洗液或是其他实验人员用完后的残留杂质。有时流动相容器的塑料盖碎片都有可能是杂质的来源。对于样品瓶污染情况下的鬼峰，容易排除，仅需要分别将样品溶解或稀释用的试剂以及进样小瓶更换，即可确定鬼峰的来源。&emsp &emsp 2.样品稀释液与流动相极性或者pH相差太大&emsp &emsp 这也是导致鬼峰的原因之一，这种问题很有可能导致样品分为两个不同的阶段出峰，从而产生双峰或者多峰。&emsp &emsp 讨论到这里，大家可以看到鬼峰的来源多种多样的，除了避免实验操作错误、溶剂和仪器错误导致鬼峰出现，使用鬼峰捕集柱能较大减少鬼峰的出现。鬼峰捕集去除柱也称鬼峰小柱，将鬼峰捕集柱安装在梯度混合器和自动进样器之间，不仅能够去除流动相中的杂质，还可以有效捕集管路和混合器中的杂质。柱芯容积约700μL，耐压35Mpa，有多种尺寸、规格可供选择。

最近总有小伙伴咨询我司技术：色谱柱出现基线不稳、噪音较大、出现鬼峰怎么办？到底是什么原因造成的？我司技术把小伙伴提出的问题汇总并给出以下解决方法，快来一起看看吧！今日份疑难解答原因1：没有很好的老化柱子，或者柱子需要重新老化。解决方法：色谱柱老化流程：卸下色谱柱接检测器一端。40°C开始升温，升温速度10°C/min，达到色谱柱最高耐受温度以下20°C，维持1-2小时，老化完成。原因2：没有选择合适耐受温度的进样垫。进样垫在进样口高温下，挥发出杂质进入到毛细柱内，导致噪音变大。解决方法：更换耐受温度更高的BTO进样垫。原因3：进样垫渣滓进入到衬管内，高温下附着在衬管内壁。随载气不断挥发进入到色谱柱内。解决方法：更换进样垫和衬管。原因4：毛细柱安装的顺序不对。导致石墨环内的杂质进入到毛细柱内。解决方法：石墨环安装到毛细柱上以后，切割毛细柱4-5cm，再安装到进样口上。原因5：载气捕集阱到期没有更换。解决方法：载气捕集阱的周期一般是一年更换一次。原因6：自动进样器上的4ml进样针清洗小瓶内的液体没有更换，导致交叉污染。解决方法：定期清洗小瓶，更换内部的清洗溶剂。原因7：PLOT色谱柱的后面没有使用颗粒捕集阱。PLOT毛细柱内的颗粒进入到检测器内造成杆状鬼峰。解决方法：PLOT毛细柱末端与检测器之间安装颗粒捕集阱。原因8：色谱柱在老化过程中或者使用过程中，超出了其最高耐受温度，造成键合相的大量流失。解决方法：老化和使用之前一定要确认色谱柱的最高耐受温度。原因9：老化和使用过程中载气断了或者系统泄露导致空气中的氧气进入到毛细柱内，键合相被氧化流失。解决方法：确保系统没有泄露，载气可以持续供应。原因10：选用了不合适膜厚的色谱柱。解决方法：高温分析，建议选用小膜厚的毛细柱。膜厚越厚，色谱柱的流失越大。原因11：样品前处理过程中受到手套、进样瓶瓶垫等溶解带来的杂质。解决方法：这种杂质呈现规律的尖锐杂峰。原因12：检测器污染，需要更换部件或者进行清洗。解决方法：清洗MS源。更换FID喷嘴等。原因13：膨胀率大的溶剂，进样体积过大或者分流比太小，样品汽化后溢出衬管，接下来的几针样品会有鬼峰出现。解决方法：减小进样量、增大分流比。原因14：查看基线噪音大或者鬼峰是不是柱子流失造成的一个最简便的方法就是使用MS检测器对鬼峰和噪音进行定性。解决方法：荷质比是207，基本可以确认是柱子流失造成的。不是207的话，继续找其他原因。如果以上情况排除后，确保分析系统没有任何问题的情况下，请提供如下信息：分析物列表，基质描述：溶剂、杂质，进样口条件，程序升温条件，检测器种类，色谱仪品牌和型号，色谱柱货号，关键组分峰型图片给到我们，可直接在微信后台留言，也可以直接拨打我们的热线电话，欢迎您的致电！

液相色谱检测器种类较多，如何选择合适的检测器？以及为什么这样选择？之前的推文中我们陆续盘点了UV、DAD、ELSD等检测器，今天再跟大家聊一聊示差检测器。盘点那些年我们用过的液相检测器（一）一、RI 示差折光检测器原理简介关注我们RID是一种偏转式或者斯涅尔式折射率检测器。斯涅尔定律指出，平行光束沿着一个大于零的入射角通过一个将两种具有不同折射率的介质分开的电介质界面时，其折射率将与两种介质的折射率差幅成函数关系。二、示差检测器结构关注我们示差折光检测器结构示意图1、钨灯 2、聚光透镜 3、狭缝 4、准直镜 5、狭缝 6、检测池 7、反光镜 8、零位玻璃 9、光敏接收元件低功率、长寿命的钨灯发射出的光线经过准直透镜和狭缝后，通过参比池（参照池）和样品池（样本池），经平面镜反射回来后，再次通过光学单元，最后通过透镜聚焦到一对光传感二极管上（光传感器）。在测试期间，参比池和样品池中充满流动相。参比池随后与流路隔开，流动相仅流过样品池。如果两个池中介质的折射率没有差异，光线在通过它们时将不会发生折射。1 光束2 样本池3 参照池4 光轴（NsNr）5 光轴（Ns=Nr）6（4）和（5）在光传感器处的间距7 光传感器Ns：样本池中流动相的折射率Nr：参照池中流动相的折射率光线照射到一对光电二极管上，其中每个光电二极管都将给出一个电信号。随后这些信号会被放大，从而测得两个信号之间的差异。如果是零折射，这些信号之间的差异应该为零伏。借助一个电控机械联动装置，用户可以通过光路中的折射透镜来优化光电二极管的零偏转输出。还可以通过额外电路轻松地将信号输出校正为电子零点。1 光传感器A2 光传感器B3 光束当流动相的折射率发生变化时，通过样品池和参比池之间界面的光将被折射，从而使一个光电二极管上的光强增大，另一个电二极管上的光强减小。这种差异产生具有振幅和极性的信号，此信号被放大后，可以驱动图表记录仪。三、应用举例关注我们示差折光检测器是一种通用型检测器，只要被测组分与洗脱液的折光指数有差别就可使用。生命科学中常遇到各类糖类化合物，没有紫外吸收，一般常用示差折光检测器，她的通用性比UVD广，但灵敏度要低，对温度变化敏感，并与梯度洗脱不相容，因而限制了它的使用。应用一：麦芽糖、果糖、葡萄糖、异麦芽糖、麦芽三糖色谱条件色谱柱：月旭Xtimate NH2（4.6×300，5μm）。流动相：乙腈:水=75：25；检测器：RID；柱温：30℃；流速：1.0mL/min；进样量：50μL。色谱图应用二：磷酸果糖二钠、蔗糖、葡萄糖、果糖色谱条件色谱柱：月旭Xtimate sugar-Ca（7.8×300mm，8μm）。流动相：纯水；检测器：RID；温度：柱温75℃，检测器40℃；流速：0.2mL/min；进样量：10μL。色谱图四、示差检测器维护关注我们要想获得良好的实验结果，使用RID的三大法宝：第一、脱气；第二、平衡好流动相；第三、保持恒温恒压。在实际工作中我们会遇到很多典型的问题，接下来我们一起来分析一下这些问题如何破。五、使用注意事项关注我们1、正确放置溶剂瓶和废液瓶。要把溶剂瓶放在比示差监测器和溶剂泵还要高的位置，检测器出口留足够长的废液管通到下方的废液瓶，这样可以使样品池有一定背压，有利于检测信号的稳定。2、循环使用流动相。建议循环使用流动相。在没有进行分析时，打开循环阀，让流动相进行循环，这样泵就可以连续运行不必停止，一直到进行下一个分析。这样操作不仅可以节省流动相，而且检测器可以连续稳定的运行，随时进行样品分析。3、示差折光检测器不能用做梯度洗脱。由于介质的改变和压力的波动都会影响基线的稳定性，所以使用示差折光检测器时不能进行梯度洗脱。4、保证检测器的温度恒定。光学系统和流动相的温度对基线的稳定性影响很大。示差折光检测器可在比室温高5℃到55℃的范围内控温。建议将温度设为比室温高5℃，并确保柱温箱的温度与检测器保持一致。温度不宜过高，因为介质的折光指数随温度升高而降低，温度过高会使灵敏度降低。5、不可让流通池承受过大的压力。示差折光检测器流通池的反压约为1000psi，如果还要在系统里连接其他检测器。即示差折光检测器在流路系统里必须放在最后，以防压力增大时损坏流通池。6、某些溶剂随长时间存放而改变会造成基线的漂移。例如乙腈/水的混合物中乙腈的含量会降低，四氢呋喃会变成过氧化物，在吸湿性有机溶剂中的水量会增加，而保存在参比流通池中的溶剂如四氢呋喃会产生气体。因此，流动相最好做到临用现配或在有效期内使用。对于含有有机溶剂的流动相一般有效期3天，对于不含有机溶剂的流动相如纯盐或者纯水则根据室温情况，可临用现配或是配置好4℃冷藏，取用前先放置至室温。7、避免流动相和特定的色谱柱反应。某些流动相和特定的色谱柱反应，会产生长时间的噪声，例如乙腈/水流动相和氨丙基键合固定相在一起会出现这一现象。要判断长时间的噪声是否是由流动相/色谱柱的反应而产生，应该使用限流毛细管代替色谱柱，考查示差折光检测器的性能。