气相色谱配制方法

俺从事色谱分析和管理工作十余年拉，看见好多板油为购买各种各样的填充柱而四处忙碌和打听，最后还要花费相当多的银子去尝试不知道合适不合适的柱子，我替大家非常着急呀。因为好多方法和标准里面标注的色谱柱的填充和配制方法在实际中产生的效果不一定非常理想，因此大家为什么不自己尝试自己“制造”自己想要的宝贝呢？当然如果有的板油有其他的想法和潜规则俺就不多说拉。为了许多新板油的工作方便我还是从头到尾将色谱柱的：制造过程详细更大家交流以下，希望老专家和老板油为我的作法提出意见和建议，让我们的宝贝柱子更加听话。（听话我觉得用来形容色谱柱的性能是最合适不过的拉，因为我们的目的就是希望样品中各组分在色谱柱的作用下能按我们理想中的顺序和位置出现在谱图上，这就是我们对色谱柱最大的期望！）言归正传，开始陈述。一、所需要的设备和材料：1、真空泵：所需参数为抽气速率1极限压力≤ 6×10-2转速 1440电机功率 0.25进气口直径16泵油温升 ≤40用油量0.55价格一般在1500元左右，也就一两根柱子的价格，而且，它是色谱柱“制造”的最重要部件。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/10/201110110936_322873_1625930_3.jpg2、需要一个250mL或者500mL的玻璃压力缓冲瓶，上口连接真空泵，下口连接色谱柱。连接处使用密封带缠绕密封。缓冲瓶见下图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/10/201110111026_322887_1625930_3.jpg密封带如下图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/10/201110111030_322889_1625930_3.jpg3、空的色谱柱：空的柱子应该根据我们分析方法或者气相色谱仪的要求，有些气相色谱仪只能接2mm的柱子，有些只能接3mm的柱子。或者在柱子两端加上变头也可以兼容，但是那样比较麻烦呀！空的色谱柱可以使用新的，也可以使用失效的老色谱柱，但是都需要清洗一下，然后干燥。干燥的方法可以使用老化柱子的方法，非常好。下面我将我使用的一些柱子贡献出来让大家参观。呵呵http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/10/201110111417_322939_1625930_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/10/201110111417_322940_1625930_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/10/201110111419_322942_1625930_3.jpg4、需要一些色谱柱的堵钭，我一般用细白钢丝。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/10/201110131416_323401_1625930_3.jpg将白钢网撕成宽0.5cm，长1cm左右的长条，卷成一卷，塞入色谱柱。二、色谱柱固定相的配制。 按照分析方法或者标准的要求用烧杯称取固定液和单体。使用合适的溶剂将固定液溶解，然后将单体倒入，轻轻晃动烧杯，一般不要使用搅拌棒，因为容易将单体搅碎拉！在使用红外线烘干！因为我没有红外线设备，所以使用常温（通风条件比较好）或者暖气哄干，效果还不错一般需要一周时间才能完全干燥。千万不要使用干燥箱，因为挥发的溶剂在干燥箱里聚集，容易发生爆炸事故！！！！关于称取单体和固定液的量应该根据自己的需要，一般我是每次配制固定相都是按一年的量计算，每次单体在50克左右。三、装柱等固定相完全干燥后就可以装柱拉。装柱的工作量最大，而且需要耐心，不要急噪。装柱的流程是真空泵，耐压管线（直径大小根据真空泵入口和缓冲瓶的口径决定），缓冲瓶，色谱柱连接检测器一端（使用白钢网封头），色谱柱连接汽化室一端，漏斗。然后使用密封带将各连接处缠绕密封好。接上电源，开启真空泵，检查是否漏气。如果漏气继续使用密封带密封，如果不漏气就可以装柱拉。等真空泵开启稳定1分钟后慢慢将固定相倒入漏斗，越慢越好，固定相在负压的作用下能够迅速到达色谱柱的检测器一端，使用金属工具慢慢敲打和震动色谱柱，使固定相能够填充密实，不要出现有空短的地方。使用这样的方法用固定相将色谱柱装慢，慢慢敲打震动，直到色谱柱的固定相不再下沉后才算柱子装好拉。最后停电源，拆卸刚才的密封连接，将色谱柱取下，从汽化室一端倒出一点点，使用白钢网堵上。最后一点最重要的是在色谱柱上挂上金属铭牌，写上色谱柱的一些参数和配制的日期。因为要是今后填充的柱子多拉容易搞混，如果忘记了这根柱子的参数，那这柱子就废拉，自己的工作也白费拉。四、试柱色谱柱装完后，将两端留在白刚网上的固定相倒出，不要带进色谱仪中。然后将色谱柱连接到汽化室上，另一端放空，使用氮气做载气将色谱柱老化8小时左右。当然有一些色谱柱老化时间更长！老化后将另一端接在合适的检测器上，使用合适的载气，设定好合适的参数，让仪器稳定下来后就可以试柱拉。试柱最主要的目的是考察色谱柱的分离度，如果不能到达我们期望的分离效果，通过调节流速看能不能达到。否则就得延长色谱柱的长度，调整固定液的比例，等等个，这些主要用在开发新的分析方法上。对于成熟的方法和技术，按要求做出来的色谱柱应该是八九不离十。如果色谱柱的分离很理想的话就可以使用拉。使用的使用如果是外标和相对归一法就得进标准样品，计算校正因子。如果是内标，就得往样品中加入内标物分析。好拉，自己说得很多拉。反正我知道自己“制造”色谱柱的好多益处，除了节约银子，工作方便，而且还能按照自己所需开发一些新的分析方法，自己“制造”色谱柱的好多益处，除了节约银子，工作方便，而且还能按照自己所需调节填充柱的一些参数，比如固定液的比例，柱子的长度等等来达到更好的分离效果。当然自己“制造”色谱柱也有一些不足，比如增加自己的工作量，不具备填充色谱柱的条件需要购买一些设备和试剂和耗材等。