气相色谱玻璃衬管清洗方法

GMP的宗旨为最大限度减少污染、交叉污染以及混淆、差错。而分析检测过程中，最容易出现污染的环节就是玻璃器皿的清洗不干净。玻璃器皿的清洗无非是两种方式：人工清洗和仪器自动清洗。两种方试在GMP实验室都是可以接受的。但无论是哪种方式，都需要经过方法验证，并把方法详细写入SOP。本文只概述人工清洗的一般流程。1一般清洗流程：2 玻璃器皿洁净标准2.1目测：玻璃器皿内壁应能被水均匀地润湿而无水的条纹，且无水珠挂壁。2.2 残留检测：一般采用TOC、电导率、气相色谱、液相色谱等检测残留。一般采用挑战极端的模式，如平时检测浓度ug级，可以加大成mg级等。3 手工清洗检查时需要注意事项3.1清洗场地是否干净整齐。3.2一般不太建议成分复杂的清洗剂，如洗衣粉。3.3浸泡的洗液是否标有有效期，是否及时更换等。3.4一般不太建议采用铬酸浸泡，污染环境，检测时容易出鬼峰。 3.5 需要计量的器具一般不太建议较高温的干燥。 您有没有感觉，人工清洗是不是特别复杂？是不是特别容易被挑战？是时候有请实验室器皿自动清洗机上场啦！STIER施启乐实验室器皿自动清洗机，清洗玻璃器皿化繁为简，节省人力成本，根据实验物质设定清洗程序，洁净、安全一键到位，省时省力、经济实惠！

玻璃芯片使用注意事项1. 玻璃芯片及玻璃芯片夹具如图所示，安装时需按夹具使用说明操作。2. 生成微滴粒径大小取决于玻璃芯片结构十字剪切口的下游宽度，客户依据需要选择合适玻璃芯片。3. 通入的液体必须经过0.45 μm滤膜过滤以防止芯片堵塞。4. 使用完毕后必须按照规定步骤对玻璃芯片进行清洗和干燥。5. 玻璃芯片为玻璃材质，使用过程中需避免磕碰损坏。6. 硅胶塞使用时须定期更换，如通二氯甲烷溶液(需每次更换)。清洗步骤1.在A和C口处连接液体排出管，在B口中通入2 mL分散相溶剂(这里特指水包油实验，如易析出的溶质PLGA，可通入二氯甲烷溶剂溶解且必须滤膜过滤)，以此将易析出的溶质快些排出；2.在B口中，通入60s空气，将1中通入的溶剂排出；3.在B口中，通入5 mL去离子水滤膜过滤，将易溶于水的物质排出；4.在B口中，通入5 mL异丙醇滤膜过滤 5.在B口中，通入60s空气干燥。玻璃芯片堵塞检查及常规处理方法1.在使用或清洗过程中，发现流道中有杂质，需及时处理，如改变液体进入口冲出流道中的杂质；若仍无法解决，可参考“堵塞的玻璃芯片处理方法”。2.若从一个端口通入液体时，发现液体无法从另外两个端口流出：① 需要从夹具中取出玻璃芯片，检查三个端口(A、B和C)是否堵塞；②若端口堵塞，需用尖嘴镊子取出杂质；若三个端口无堵塞现象，则需要把芯片放置在显微镜下观察，检查流道内是否有较大杂质堵塞；若仍无法解决，可参考“堵塞的玻璃芯片处理方法”。堵塞的玻璃芯片处理方法1.若杂质可溶于油相溶剂(水包油实验，如溶于二氯甲烷)且芯片未完全堵死，如PCL、PLGA和PLA(由于二氯甲烷的挥发而析出)，可直接通入二氯甲烷以溶解流道中的杂质；若芯片完全堵死，可将芯片泡于二氯甲烷中，使得杂质被慢慢溶解；2.若玻璃芯片中的杂质是水相中的PVA(水包油实验，PVA为表面活性剂)，或者加热易溶解于水(如海藻酸钠，油包水实验)的杂质：可直接将玻璃芯片置于90°C水浴锅中，一段时间后，取出并用洗耳球或从芯片的一端口将溶解后的杂质吹出；3.若杂质为长条纤维状，卡在十字剪切口且与BC线垂直，在B口和C口交替通入水或异丙醇(此外溶液需0.45 μm滤膜过滤)，以此将杂质通过A口排出；4.若杂质为块状，可视情况从一个端口(或水等其他溶剂)加大压力将块状杂质排出；此方法仅作参考，不一定完全能将杂质排出；5.若玻璃芯片被堵但未完全堵死(不符合方法1)，可以选择在芯片中通入浓硫酸(浓硫酸腐蚀硅胶塞，用完需立即更换)以碳化杂质；若玻璃芯片已被完全堵死，可将芯片泡在浓硫酸中以碳化杂质；此方法仅针对于有机物，其他无机物不适用；6.若芯片已完全堵死，可将玻璃芯片上放置于电热板上200 °C(温度过高易损坏玻璃芯片)加热，用于碳化杂质疏通流道；此方法仅针对于有机物，其他无机物不适用。以上方法仅供参考，具体问题需视情况而定。

气相色谱仪常见故障分析与解决方法气相色谱仪由六大单元组成，任一单元出现问题都会反映到色谱图上。这里介绍前三个单元。现代的气相色谱仪很多都具备故障诊断功能，不同程度地给出仪器故障的判断。尽管如此，许多的问题像是操作失误的问题仍须靠工作人员的努力。故障和失误可以采用逐个单元检查排法，这里从分析人员的角度来讨论仪器故障的排和分析人员操作失误或操作不当引起问题的排。气相色谱仪是利用色谱分离和检测，对多组分的复杂混合物进行定性和定量分析的仪器。通常可用于分析土壤中热稳定且沸点不过500°C的有机物，如挥发性有机物、有机氯、有机磷、多环芳烃、酞酸酯等。一、气路气路的检查在故障的排中往往是有果，主要是检查：（1）气源是否足（一般要求气瓶压力须≥3MPa，以瓶底残留物对气路的污染）；（2）阀件是否有堵塞、气路是否有泄漏（采用分段憋压试漏或用皂液试漏）；（3）净化器是否失效（看净化剂的颜色及色谱基流稳定情况）；（4）阀件是否失效或堵塞（看压力表及阀出口流量）；（5）气化室内衬管是否有样品残留物及隔垫和密封圈的颗粒物（看色谱基流稳定情况）；（6）喷口是否堵塞（看点火是否正常）；（7）对化合物的分析，气化室的衬管和石英玻璃毛还须经过失活处理。二、色谱柱系统色谱柱是分析的心脏部分，往往色谱图上的许多问题都与色谱柱系统密切相关，为此按以下步骤检查柱系统：1.色谱柱的连接检查柱后是否有载气；柱子连接是否有问题；毛细管柱的柱头是否堵塞；切割是否平整；是否有聚酰亚胺涂层伸过柱端；毛细管柱两头插入气化室和检测器的位置是否正确；柱子是否过温运行或未老化好；密封圈选择是否合理。毛细管柱在选用密封圈时须考虑；石墨垫易变形，有好的再密封性，其上限温度是450℃；Vespe TM很坚硬，再密封性受影响，其上限温度为350℃，VG1和VG2是由石墨和 VeseyTM组成，再密封性好，可重复使用，上限温度为400℃。不锈钢填充柱在高于200℃时，可选用石墨、不锈钢或紫铜作密封圈：在低于200℃时，可选用硅橡胶或聚四氟乙烯作密封圈。玻璃填充柱可根据使用温度分别选用石墨、硅橡胶或聚四氟乙烯做密封圈。2.色谱柱的柱容量柱容量在柱分析中是很重要的影响因素。柱容量的定义:在色谱峰不发生畸变的条件下，允许注入色谱柱的单个组分的大量（以ng计）。当注入色谱柱的单个组分的量出柱容量，则出现前伸峰。柱容量与单位柱长内所存在的固定相数量有关典型的例子是采用0.25mm内径、液膜厚度为0.25m的毛细管柱，分析组分浓度为1～2，进样1L时，其分流比就须控制在1/100，这时被分析组分的量为125～175n，若分析组分浓度高于1～2，就须减少进样量或增加分流比，否则就会出现前沿峰，其他类推。3.载气的线速载气在气相色谱分析中的影响表现在载气速度影响溶质分子沿柱的移动速度，而且溶质扩散会通过载气影响色谱峰的扩，通常表现在对理论塔板高的影响上。在维持柱效低不大于20的情况下，氢气、氦气、氮气的线速分别可采用35～120cm/s、20～60cm/s、10～30cm/s，从而可以看出采用不同的载气，可适用的线速范围有很大的不同。相同载气在不同管径的气相色谱毛细管柱上的佳线速和流量也略有不同，如He可参考表15-1进行调节以获取佳分离果。内径/mm 0.10 0.25 0.32 0.53线速/（cm/s） 40～50 25-35 20-35 18-27流量/（mL/min） 0.2～0.3 0.7～1 1-1.7 2.4～3.5表1毛细管柱佳线速和流量（He）4.色谱柱的流失柱流失一直是色谱工作者关心的课题，当系统泄漏进入氧气或有样品污染，都会导致色谱柱内固定相分解，后表现在基线上，其现象与处理分别如下:①基线急上升，形成峰后呈下降趋势，这可能是因为系统曾泄漏进入氧气，这时色谱柱需老化至基线正常。②基线急上升，伴有假峰持续出现，基线到达高处后成持续下降趋势，这可能是有非挥发性样品污染色谱柱，导致过量柱流失，解决的方法是先截取色谱柱柱头0.5m，而后在高温下老化色谱柱至基线正常。③基线急上升，一直维持在某一水平，这可能是一个未知因素未被排，须想法排。5.溶剂样晶的分析许多样品分析时会出现异常现象，常见的是溶剂样品的分析，其特例为水样的分析。从气相色谱的角度来看，众所周知水不是一种理想的溶剂，主要由于以下几方面原因：①它有很大的蒸发膨胀体积；②在许多固定相中水的润湿性和溶解性较差；③水会影响某些检测器的正常检测和会对色谱柱的固定相造成化学损。在常用的色谱溶剂中，水具有大的气化膨胀体积。通常色谱仪的进样器的衬管体积200～900μL，当进1μL水样时，其气化后的蒸汽体积（大约1010μL）会膨胀溢出衬管，称为倒灌。其将导致气化的样品返入载气和吹扫气路，由于载气和吹扫气路的温度较气化室低许多，样品会凝结在这儿，在后来的分析中被气体吹入分析系统形成鬼峰。解决方法可采用加衬管体积、减小进样体积、降进样器温度、提进样器压力或增加载气流速以减少倒灌现象。水进入色谱柱，水的形态对色谱柱的固定相具有破坏性。因为水的表面能很高，而大部分毛细管柱固定相的表面能都较低，这导致水对固定相的湿润性很差，不能在色谱柱壁上形成光滑的溶剂膜均匀地流过色谱柱，而形成液滴，导致色谱柱性能变差。由于水的这种很差的润湿性和相对其他溶剂较高的沸点，通常在较低柱温的情况下，一部分水以液体状态流过色谱柱，使在水中具有良好溶解性的溶质也会表现出谱带展宽，在特的情况，表现色谱峰分裂。在柱上进样时，不挥发的化合物，如水溶性的盐类，也会被液态水带入色谱柱，污染色谱柱和分析系统。水也会引起检测器出问题：例如水会使FID和FPD灭火；当进较大水样时，为了避检测器灭火，可以加氢气流量以损失敏度为代价助于稳定火焰；水也会降ECD的敏度，为避水的影响，可采用厚液膜柱，使被分析组分保留够长时间，以保出峰时，ECD的性能可以在水流过检测器后得以恢复。严重的问题是水会引起许多固定相的降解，直接破坏色谱柱的性能。在色谱分析时，反映色谱峰分离性能下降、基流不稳、噪声。所以进水样分析及含水量较大的样品时小心。这在溶剂分析的情况也会出现。典型的是微量有机萃取物的分析，无论用二氯甲烷还是二硫化碳做溶剂，进样1μL时，体积膨胀大约为300L，当进样插管体积小于300μL时，就很容易形成倒灌。所以无论什么样品，其进样量的大小都须与进样器内插管的体积相适应，这方面多种型号的仪器都配有多种不同形式的进样插管以供选用；同时大量溶剂也会对固定相形成洗涤作用，直接破坏色谱柱的性能，在色谱分析时，反映出保留时间提前、色谱峰分离性能下降、基流不稳、噪声。所以在分析稀溶液样品时须注意溶剂和进样量的选择。三、各系统的加热控制各系统加热控制的检查多的是属于仪器上的问题，检查各系统的加热控制是否正常，一般可先用手感，后用测温计测量温度，看是否与显示。有问题先看加热元件和测温元件是否正常，然后检查温控板。常见的是加热元件和测温元件出问题，可以换相应元件。检查温控板是否有问题，可以采用换温控板后重新测试的办法，温控板有问题一般采用换板。