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高效液相示差法中长连脂肪酸的含量测定 近来,越来越多的人开始重视基于脂质的药物制剂在体内外的代谢行为,这就要求对脂质及脂质代谢产物的定量分析。本实验开发了一种简便可操作的液相方法,可用于分离和定量检测常用剂型的脂质及脂质在模拟体内环境的生物基质的代谢物,试验采用了高效液相示差折光检测器,并分别采用了C8和C18色谱柱进行试验,得到批内和批间准确度为92%-106%,而且溶度范围在0.1-2mg/L内的中长连脂肪的分析精确度系数小于10%。 基于脂质的药物制剂旨在于提高难溶性药物的口服生物利用度,脂质体药物通常采用中链脂肪和长链脂肪或两者的混合物,通常和表面活性剂或助溶剂联用。制剂辅料的选择最初是根据其在生物体内最佳的溶解性以及其对药物的增溶性,然而随着脂质体制剂的研究发展,脂质体在体内消化降解对于药物的吸收及生物利用度的影响也越来越受到人们的重视。 口服给药后脂质(如甘油三酯)在体内分两步降解:首先其在胃和胰脂肪酶的作用下降解,首先降解为一份子脂肪酸和一份子二酰基甘油酯,二酰基甘油酯再一次降解为一份子脂肪酸和单酰甘油酯。这些消化物与内源性胆盐形成混合胶束显著增加了药物在胃肠液的溶解能力,从而提高了水难溶性药物的吸收和生物利用度。脂质体体内体外的消化过程已经被广泛报道过了,但其消化产物的分离和定量分析却比较复杂,脂质分析的由于缺乏紫外吸收官能团,限制了高效液相色谱法(紫外和荧光检测)的应用。本试验采用高效液相示差检测器进行分析分析简便、准确性高、可操作性强。 材料:油酸,二辛酸甘油酯,三油酸甘油酯,甘油二油酸酯,甘油单油酸酯,三辛酸甘油酯,辛酸单甘油酯,辛酸;乙腈,甲醇,四氢呋喃,均色谱纯;三氟乙酸,试验用去离子水。 方法:中长链脂肪的分离和定量分析,我们选用的中长链脂肪为普通制剂常用的,其亲油性范围广泛,难以在一个条件下进行同步分离,经过实验研究,我们将其分为四部分,A,长链脂肪酸和单酰甘油酯,B,长链二酰甘油酯和三甘油酯,C,中链脂肪酸和单酰甘油酯,D,中链二酰甘油酯和三甘油酯,这四部分再分别进行分析。 HPLC分析:长链脂肪采用安捷伦1100高效液相色谱仪,Symmetry C18色谱柱(4.6mm x 150mm , 5um),配示差折光检测器;油酸和油酸单甘油酯(A组)采用流动相乙腈:(0.1%TFA)水=85:15,甘油二脂和甘油三酯(B组)采用流动相甲醇:乙腈:水(0.1%TFA)=40:40:20,进样量20ul,流速1ml/min,柱温38度。 中链脂肪采用安捷伦1100高效液相色谱仪,菲罗门色谱柱(4.6mm x 150mm , 5um),辛酸和单甘油酯(C组)使用甲醇:水(0.1%TFA)=(60:40)的流动相,二酰甘油酯和三酰甘油酯(D组)使用乙腈;甲醇:水(0.1%TFA)=45:45:10的流动相。进样量20ul,流速1ml/min,柱温38度。 标准溶液制备:标准储备液按照5或[/font
想用液相色谱测定脂肪酸,现准备购买脂肪酸37种混标,但卖家提供的是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]测定的图谱,想请教一下大家有没有用液相跑出来脂肪酸混标的图谱了
请问有没有人做过红细胞膜脂肪酸的检测啊?例如检测其中反式脂肪酸,用什么方法比较好?可以用液相色谱么?