推荐厂家
暂无
暂无
在实际工作中,当我们拿到一个样品,我们该怎样如何定性和定量,建立一套完整的分析方法是关键,下面介绍一些常规的步骤:1、样品的来源和预处理方法GC能直接分析的样品必须是气体或液体,固体样品在分析前应当溶解在适当的溶剂中,而且还要保证样品中不含GC不能分析的组分(如无机盐),可能会损坏色谱柱的组分。这样,我们在接到一个未知样品时,就必须了解的来源,从而估计样品可能含有的组分,以及样品的沸点范围。如能确认样品可直接分析。如果样品中有不能用GC直接分析的组分,或样品浓度太低,就必须进行必要的预处理,包括采用一些预分离手段,如各种萃取技术、浓缩和稀释方法、提纯方法等。2、确定仪器配置所谓仪器配置就是用于分析样品的方法采用什么进样装置、什么载气、什么色谱柱以及什么检测器。3、确定初始操作条件当样品准备好,且仪器配置确定之后,就可开始进行尝试性分离。这时要确定初始分离条件,主要包括进样量、进样口温度、检测器温度、色谱柱温度和载气流速。进样量要根据样品浓度、色谱柱容量和检测器灵敏度来确定。样品浓度不超过mg/mL时填充柱的进样量通常为1-5uL,而对于毛细管柱,若分流比为50:1时,进样量一般不超过2uL。进样口温度主要由样品的沸点范围决定,还要考虑色谱柱的使用温度。原则上讲,进样口温度高一些有利,一般要接近样品中沸点最高的组分的沸点,但要低于易分解温度。4、分离条件优化分离条件优化目的就是要在最短的分析时间内达到符合要求的分离结果。在改变柱温和载气流速也达不到基线分离的目的时,就应更换更长的色谱柱,甚至更换不同固定相的色谱柱,因为在GC中,色谱柱是分离成败的关键。5、定性鉴定所谓定性鉴定就是确定色谱峰的归属。对于简单的样品,可通过标准物质对照来定性。就是在相同的色谱条件下,分别注射标准样品和实际样品,根据保留值即可确定色谱图上哪个峰是要分析的组分。定性时必须注意,在同一色谱柱上,不同化合物可能有相同的保留值,所以,对未知样品的定性仅仅用一个保留数据是不够的,双柱或多柱保留指数定性是GC中较为可靠的方法,因为不同的化合物在不同的色谱柱上具有相同保留值的几率要小得多。6、定量分析要确定用什么定量方法来测定待测组分的含量。常用的色谱定量方法不外乎峰面积(峰高)百分比法、归一化法、内标法、外标法和标准加入法(又叫叠加法)。峰面积(峰高)百分比法最简单,但最不准确。只有样品由同系物组成、或者只是为了粗略地定量时该法才是可选择的。相比而言,内标法的定量精度最高,因为它是用相对于标准物(叫内标物)的响应值来定量的,而内标物要分别加到标准样品和未知样品中,这样就可抵消由于操作条件(包括进样量)的波动带来的误差。至于标准加入法,是在未知样品中定量加入待测物的标准品,然后根据峰面积(或峰高)的增加量来进行定量计算。其样品制备过程与内标法类似但计算原理则完全是来自外标法。标准加入法定量精度应该介于内标法和外标法之间。7、方法的验证所谓的方法验证,就是要证明所开发方法的实用性和可靠性。实用性一般指所用仪器配置是否全部可作为商品购得,样品处理方法是否简单易操作,分析时间是否合理,分析成本是否可被同行接受等。可靠性则包括定量的线性范围、检测限、方法回收率、重复性、重现性和准确度等。本文摘自《气相色谱方法及应用》
偶然浏览到的一篇资料,个人感觉非常适合初学者,该资料提供了GC分析方法建立的基本思路,同时欢迎各位高手针对此思路提出补充或改进;其中有个地方我想请教各位:“[color=black][font=宋体]氢气、氦气的分子量较小常作为填充柱色谱的载气;氮气的分子量较大,常作为毛细管[b][u][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url][/u][/b]的载气”,载气的选择还和色谱柱的类型有关系吗?[/font][/color]
岛津气相色谱-质谱分析方法的建立过程 为帮助初学者学会建立岛津气相色谱-质谱的分析方法,特撰写本文。首先,打开工作站在线分析窗口(这个应该不用我多讲了吧。),如下图。下图中黄色(背景色)窗口部分为信号采集窗口,点右键可以根据个人的喜爱更改背景颜色,以及显示或取消显示虚线网格。此窗口右下角有两个图标,分别为“+”(放大谱图显示)和“-”(缩小信号显示),点击这两个图标可分别放大和缩小显示的谱图。此外,还可以在窗口内拖拉鼠标左键以放大显示某个区域,点右键选择返回上一步或回到原始显示大小。 黄色窗口下还有一个质谱信号窗口,可以更改信号显示窗口和质谱信号窗口的相对大小,本图根据我的爱好,不显示质谱信号窗口。 再下面就是色谱/质谱条件设置窗口了。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/11/201111291032_333816_1604317_3.jpg下图设置GC 参数http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/11/201111291034_333817_1604317_3.jpg下图设置MS 参数下图是就绪检查。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/11/201111291036_333818_1604317_3.jpg下图显示色谱柱信息的输入http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/11/201111291036_333819_1604317_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/11/201111291037_333820_1604317_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/11/201111291038_333821_1604317_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/11/201111291039_333822_1604317_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/11/201111291039_333823_1604317_3.jpg下图显示设置MS 参数。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/11/201111291041_333825_1604317_3.jpgSIM 和Scan 模式的切换。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/11/201111291042_333826_1604317_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/11/201111291043_333827_1604317_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/11/201111291043_333828_1604317_3.jpg设置完成后,保存或另存方法。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/11/201111291044_333829_1604317_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/11/201111291045_333830_1604317_3.jpg加载方法参数。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/11/201111291046_333831_1604317_3.jpg正在加载中…….http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/11/201111291047_333832_1604317_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/11/201111291047_333834_1604317_3.jpg谢谢!