全自动载网投入冷冻仪

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全自动载网投入冷冻仪相关的厂商

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    广州竞赢有限公司是一家综合性的商贸企业,集实验设备经销、实验室组建策划于一体。 广州竞赢有限公司一直以来专业从事代理和销售国内外知名品牌的各类电镜耗材及电镜附属设备,如Ted Pella 、Gilder Grids、Dumont等众多品牌产品的代理销售,目前已经在全国建立了广泛的商贸联盟和良好的用户群体,从而形成了一个稳固而强大的销售网络。在市场经济的浪潮中,我们竞赢人始终以服务为最高宗旨。并树立了诚信为本的销售理念,与广大用户携手走进微利时代。联络人:陈秋平,13380036316或15360060733 020-38844987邮箱:hotqiu@63.com 公司主营产品:一、电镜室常用设备1、镀膜仪(离子溅射仪)108 镀膜仪(离子溅射仪)、108auto 全自动镀膜仪(全自动离子溅射仪)、108C 镀碳仪(蒸镀仪)、108镀金镀碳联用仪、208HR 高分辨率镀膜仪(离子溅射仪)、208C高分辨率镀碳仪(蒸镀仪) 2、切片机easiSlicer 振动切片机、DTK-1000振动切片机、DTK-ZERO 1振动切片机、PRO 7振动切片机、McIlwain组织切片机、HMT-2258转轮切片机 3、组织处理仪BioWave?微波快速组织处理仪 4、常规设备XP 精密切割机、XP 8研磨抛光机、XP820E双头研磨抛光机、XP810E 研磨抛光机、easiGlow 辉光放电清洁系统、VRP 双联真空泵、UVC3 紫外低温包埋箱、PELCO 脱气真空系统、电子防潮柜、精密切割机、临界点干燥仪、冷冻干燥仪、离子减薄仪、钻石刀清洗器、等离子清洗机、组织包埋台、石腊分配器、石蜡修块机、玻片快速烘烤机、组织浮选水浴仪、微型打孔器、超声波切割机、精密切割机、专业研磨抛光机、电解单喷减薄仪、垂直混合仪、碳棒切削器、手持式显微镜。 二、实验室常用设备KSV材料分析仪器、Velp食品分析仪器、AIRSENSE环境监测仪器、PerkinElmer光谱分析仪器、安捷伦色谱分析仪器、、 “帕恩特”纯水/超纯水系统、 “东方”发酵罐、e-box电子防潮柜、“新芝”超声波粉碎机、“奥特”显微镜、“中佳”离心机、“海尔”冰箱等。 三、电镜耗材1、粘结用品 银导电胶液、(水基/有机系)碳导电胶液、502碳导电胶、双面碳导电胶片、碳导电喷剂、双面碳导电胶带、单面碳导电胶带、单面铝导电胶带、双面铜导电胶带、单面铜导电胶带、银导电记号笔、碳导电记号笔、离子减薄专用树脂。 2、化学生物制样用品 包埋板、玻璃切片刀盒、载玻片、盖玻片。 3、载网系列 铜载网(铜网)、镍载网(镍网)、钼载网(钼网)、金载网(金网)、不锈钢载网、铝载网、方孔载网、圆孔载网、狭缝载网(椭圆/窄条载网)、双联网、双联环、平行载网、有柄载网、多孔载网。 4、支持膜系列碳支持膜、微栅支持膜、超薄碳膜、A型碳膜、小孔微栅膜、微栅。 5、标准样品 能谱标样、法拉第杯、测试标样、SEM中等分辨率测试标样、纳米金分辨率测试标样、碳基金测试标样、单晶硅标样、网状栅格标样、低倍标准标尺、像散矫正标样、放大倍数校准标样。 6、样品存取工具 样品台、样品台专用镊子、样品盒、样品座、SEM柱形样品座、SEM钉形样品座、真空取样笔、真空取样器。 7、专用镊子及工具 高级防磁不锈钢镊子:弯尖镊子、直尖镊子、自动闭合镊子、高精度镀PTFE直尖镊子、钻石刻刀。 8、金属材料制样用品 Unipol?金属抛光膏、Wenol?金属抛光膏、Pikal?专业抛光膏、Pikal? 抛光液, 300g、 Pikal? Care抛光膏、Glaster? 清洗抛光液, 300 g 9、电镜清洁保养用品 骆驼毛刷、红貂毛刷子、超细睫毛刷子、超细单鹿毛刷子、玻璃纤维刷、玻璃纤维刷刷头、黄铜/钢刮刷、精确刮刷套装、Thunderon防静电刷子、Static-Away?防静电刷子、高级洗耳球。 10、图像处理及暗室用品 折叠式袖珍立体观察镜、Traceable?可发音计时器、立体3D眼镜、暗室安全灯、Lollipop? Traceable? 温度计、数字温度计、塑料底片夹、塑料显影槽、相片存放架。 11、真空溅射蒸度用品(金靶/铂靶等)碳棒、碳绳、铝箔、钨篮、蒸发蓝、钼舟、黄金靶材(金靶)、铂金靶材(铂靶)、各种金属靶材。其中金靶/铂靶有国产金靶/铂靶和进口金靶/铂靶二种,金靶/铂靶的常规尺寸是57m*0.1mm。 12、AFM用品AFM云母片、AFM分配器、AFM圆片夹、AFM圆片盒和拾取工具、AFM悬臂镊子、AFM金校准标样、AFM校准标样、高定向热解石墨HOPG 、AFM 探针分辨率测试标样 13、法庭科学用品微量物证提取器、含编号的微量物证提取器、射击残留物提取盒、射击残留物标样、已认证的铝样品座、样品提取器、防损标签、金属箔密封袋、认证的数字式碳纤维卡尺 14、切肖工具Gem单面不锈钢刀片、GEM镀PTFE单面刀片、GEM单面碳钢刀片、钻石刀清洁工具、单面无凹槽碳钢刀片、单面圆角碳钢刀片、蓝色Pal单面刀片、弹出式碳钢刀片分配器、材料科学钻石刀、CD冷冻干型超薄切片钻石刀、CW冷冻湿型超薄切片钻石刀 15、组织学用品免疫组化笔、Manomark?标记笔、STATMARK?标记、发光笔、导电墨笔、Moist Mark Plus ?标记笔、两用组织笔、Securline?实验室标记笔、涂载网笔
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    一、公司简介 四川蜀科仪器有限公司成立于2010年,是一家集实验室系列离心机研发、生产、销售和服务为一体的高新技术企业,地址位于人杰地灵的天府之国-四川.成都,主要服务于全国各级科研院所、高校、医院、疾控、农业科学、食品化工、环保、临检中心、独立实验室和生物医药企业,各级检测机构等各大实验室。 公司地址在成都市温江区生物医学城,现有员工80多人,其中有高级技术职称20多人,约占员工总数的40%。二、发展历程2010年4月 公司挂牌成立2011年5月 取得ISO9001:2008;ISO13485:2003质量管理体系认证和CE认证2011年9月 取得医用离心机和医用冷冻离心机的一类医疗器械注册证2012年6月 高速大容量冷冻离心机LG-21M/LG-25M上市2013年3月 大容量低速冷冻离心机LD-6M上市2014年3月 外贸部成立,此时起产品陆续销往多个国家和地区2015年11月 超大容量低速冷冻离心机LD-8M上市2016年8月 入选由仪器信息网评选的《国产好仪器》名录2017年7月 获得《生物安全型脱盖离心机》国家发明专利(专利号:ZL 2015 1 0469403.5)2018年8月 新一代台式高速冷冻离心机TGL-1650上市2019年2月 具备三轴陀螺仪平衡监测和RFID转子识别系统的多功能台式高速冷冻离心机TGL-21上市2019年12月 入选《全国通用仪器仪表百强》2020年6月 迁入新厂房2020年12月 成功通过高新技术企业认定三、技术研发及荣誉 公司创始人及主要技术骨干均是具有高级技术职称的专业人员,均有10多年的行业从业经历,积累了丰富研发和生产经验,本科学历、高级专业技术职称人才达40%以上,通过创新和研发,公司共取得各项专利及荣誉10余项。 蜀科仪器在国内率先掌握新一代的转子识别技术RFID转子识别,识别更快速、准确、可靠 公司研制的生物安全自动脱帽离心机,具有独特的初、中、高效过滤系统,可及时过滤掉(真空采血管)离心脱帽后产生的有害气体,并配备有紫外灭菌功能,有效解决操作人员和实验室生物安全性问题,得到所有客户一致好评,同时该产品荣获国家发明专利(专利号:ZL 2015 1 0469403.5)。 蜀科系列离心机在国内率先装载的三轴陀螺仪动态平衡监测系统,技术先进,有效保障产品的使用安全。四、产品介绍 公司注重技术创新和核心产品的研发,目前主要有:高速冷冻离心机、大容量离心机、生物安全型自动脱帽离心机,美容离心机,口腔科离心机,血液离心机、石油离心机及常规高速离心机、低速离心机等70多种。 五、市场及客户 公司先后在北京、上海、广州、重庆、西安、南京、郑州、长春,山西,济南,昆明、福建,海南等建立了办事处,主要负责产品的售前、售中、售后服务,更好解决客户的后顾之忧。公司目前年销售离心机产品8000台套。产品先后出口至美国、德国、泰国、菲律宾、马来西亚、英国、以色列、巴西、俄罗斯、印度等多个国家和地区,受到广大客户的一致好评。国内部分客户名单:清华大学、复旦大学、中国疾控中心、中国科学院(微生物所 、遗传所、动物所、成都生物所、昆明植物所、福建省物质结构所 )、军事医学科学院、北京协和医院、四川大学、天津大学、南开大学、深圳大学、华西医院、四川省人民医院、重庆第三军医大学、西南医院、新桥医院、郑大一附院、新疆远东医院、新疆建设和兵团、武汉铁路局疾控所、武汉天佑医院……等等。 竭诚欢迎中外客商来人来函考察合作!
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  • 无锡望尔移动冷暖设备有限公司作为冬夏,master等的地区总代,誓将服务于广大客户,以“优质,高效,迅速,真诚,专业”建立完整的售后服务体系,让广大客户在望尔移动冷暖得到放心,安心,舒心的服务。
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全自动载网投入冷冻仪相关的仪器

  • 德国徕卡自动投入冷冻仪EM GP2升级版 EM GP 自动投入冷冻仪基于我们的座右铭“支持用户、服务用户”而设计,以实际相关的方式将性能和灵活性结合起来。 EM GP2 通过自动吸液除去多余液体后,将摊铺在电子显微镜栅格上的液体或极薄样品快速冷冻为液态乙烷。 样品冷冻前保存在温度和湿度可控的环境箱中,该环境箱温度可在 +4°C 和 +60°C 之间调节,箱内湿度可调至 99%。数分钟内获得可重现结果显微图A、B为标称放大倍数分别为20000倍和39000倍时拍到的穿孔碳膜孔内微管图。冰无外来污染,沿微管长度方向原丝和单个微管蛋白亚基清晰可见。由 Nexperion e.U. 公司电子显微镜解决方案部 Guenter Resch 博士以及维也纳 Biocenter Core Facilities 公司 Thomas Heuser 和 Marlene Brandstetter 博士友情提供。用户安全单颗粒分析和低温断层摄影样品制备安全且可重复特制快速冷凝液化器头方便二次冷冻剂填充且节省冷冻剂二次冷冻剂位置固定,只需移动环境箱可重现性EM GP2自动投入冷冻仪可重现且安全地冷冻载网。传感器吸液使载网的分布表面保持均匀,获得完美的成像效果二次冷冻剂温度稳定环境温湿度可控且受保护连通性在今天,随时随地连接是理所当然的事情。Leica Microsystems 顺应时代发展要求,开始连接电镜样品制备系统,确保在整个工作流过程中样品得到保护。样品安全干氮气流动环境使用带预冷载网盒的转移容器,在液面中储存和转移样品定制连接器使样品从 EM GP2 自动投入冷冻仪转移到不同低温电镜达到优化、安全效果。灵活性可以根据您的需求,使用不同的吸液类型和参数对 EM GP2 自动投入冷冻仪进行不同的配置。传感器控制吸液自动或手动单次、两次或多次吸液环境参数 —— 温度和湿度吸液参数 —— 吸液前时间、吸液时间、吸液后时间、吸液位置和转移位置
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  • 升级版 EM GP 自动投入冷冻仪基于我们的座右铭“支持用户、服务用户”而设计,以实际相关的方式将性能和灵活性结合起来。EM GP2 通过自动吸液除去多余液体后,将摊铺在电子显微镜栅格上的液体或极薄样品快速冷冻为液态乙烷。样品冷冻前保存在温度和湿度可控的环境箱中,该环境箱温度可在 +4°C 和 +60°C 之间调节,箱内湿度可调至 99%。用户安全单颗粒分析和低温断层摄影样品制备安全且可重复● 特制快速冷凝液化器头方便二次冷冻剂填充且节省冷冻剂● 二次冷冻剂位置固定,只需移动环境箱可重现性EM GP2自动投入冷冻仪可重现且安全地冷冻载网。● 传感器吸液使载网的分布表面保持均匀,获得完美的成像效果● 二次冷冻剂温度稳定● 环境温湿度可控且受保护连通性在今天,随时随地连接是理所当然的事情。Leica Microsystems 顺应时代发展要求,开始连接电镜样品制备系统,确保在整个工作流过程中样品得到保护。样品安全● 干氮气流动环境● 使用带预冷载网盒的转移容器,在液面中储存和转移样品● 定制连接器使样品从 EM GP2 自动投入冷冻仪转移到不同低温电镜达到优化、安全效果。灵活性可以根据您的需求,使用不同的吸液类型和参数对 EM GP2 自动投入冷冻仪进行不同的配置。● 传感器控制吸液● 自动或手动单次、两次或多次吸液● 环境参数 —— 温度和湿度● 吸液参数 —— 吸液前时间、吸液时间、吸液后时间、吸液位置和转移位置
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  • 技术优势:l Blot-free,高速投入式急速冷冻:减少空气-水界面效应,满足传统制样困难样品l 全自动化操作,成功率高:全自动制样流程,即使没有冷冻经验经验客户也可确保制样成功率l 重复高:采集所有相关参数,使冷冻制样过程具备重复性l 制样过程可视化:配备专业显微镜,可直接判断制样成功与否,无需占用宝贵的电镜机时l 数据可追溯和记录,具备铜网管理功能l 具备冷冻剂存储和控制安全保护机制:自动抽屉式杜瓦装置,配备精确液面检测和温度控制系统
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全自动载网投入冷冻仪相关的资讯

  • RETSCH推出新型全自动冷冻研磨仪cryomill
    骨头、塑料、生物、植物,这些商检、质检、高校等检测机构最常见样品您处理好了吗?处理后您的样品变性了吗?前处理的结果满足后续检测的需要了吗?您想让处理过程更简单吗? 您希望一款仪器能一次解决以上所有问题,并能让样品前处理的过程更简单更安全吗? 答案就是2009年RETSCH推出的新型研磨仪——全自动冷冻研磨仪cyomill。 她能轻易为您处理各类软性及中硬性材料的样品,特别对于塑料等热敏性材料,与cryomill更是绝佳的搭档。因为cryomill有专为冷冻研磨设置的一套智能系统! 全自动冷冻研磨仪cryomill 现代化的设计外形让人眼前一亮:一个研磨平台,一个平衡平台;特殊接口与液氮罐相连;透明保护盖,可视研磨过程;图形显示菜单,令操作更简单,研磨程序尽在掌握之中。 利用高速撞击的球磨原理对样品进行粉碎,振动频率最大可达25HZ,能量大,可在极短的时间得到极高细度的样品,结果还可用于光谱分析样品制备。并且研磨过程始终处在-196℃液氮中,保证样品绝不变性。 突破样品前处理史上最先进的技术,cryomill可以设置程序,控制整个研磨过程,根据样品的性质及数量你可以设置预冷却时间、研磨频率和研磨时间、冷冻研磨循环次数等。仪器运行时,您只通过图形显示的面板就可以知道研磨所处的阶段,所以在整个研磨过程中你都无需与液氮接触,避免了手动操作的繁琐和危险。 每一个细节,cryomill都为您设想周全:智能系统可以储存9组参数,简化了您的实验室工作;配套液氮罐autofill自动进气功能;多种研磨配件可供选择,根据您的实际需要可以选择25ml、35ml、50ml研磨罐,选用适配器使用4个5ml 的研磨罐。 以韧性的多糖为例,使用全自动冷冻研磨仪cryomill将多糖冷冻2分钟,研磨1分钟,设置3个循环,研磨结果小于100um。 研磨前后的多糖对比 除了低温冷冻研磨之外,cryomill依然可以进行常温的干磨和湿磨,例如对纺织品、PCB板、土壤、矿石等软性、中硬性和硬性样品都能达到要求的粉碎细度。 金属矿样用cryomill常温研磨5分钟,出样尺寸小于150um。 研磨前后的矿石对比 如此智能又方便的仪器您怎能错过,记住RETSCH,记住全自动冷冻研磨仪cryomill——低温粉碎技术的新里程碑。 为让RETSCH的产品帮助到更多的实验室人员,RETSCH在推出的新品的同时举办全球客户回馈活动——”WE R PREPARED”, 登录www.retsch.cn 参与答题您就有机会参加RETSCH全球旅行,选择拉斯维加斯冒险之旅或者瑞典冰雕旅馆的非凡体验,或者直接赢取现金5000.00欧元! 关注RETSCH, 关注2009!
  • 全自动冷冻研磨仪使用方法及注意事项:一款仪器多种功能,正确操作安全保障
    随着科技的不断进步,全自动冷冻研磨仪在科研领域中的应用越来越广泛。这款仪器采用先进的冷冻技术,能够快速、高效地研磨各种冰点以下样品,为实验研究提供了极大的便利。本文将详细介绍全自动冷冻研磨仪的构造、功能、使用方法以及优势,让读者了解这款科研利器的强大作用。一、仪器构造及原理全自动冷冻研磨仪主要由研磨室、研磨棒、样品杯、制冷系统、驱动系统和控制系统等组成。其主要工作原理是利用高速旋转的研磨棒对样品进行冲击和研磨,同时制冷系统将样品维持在较低的温度,以保持样品的物理特性。二、功能及应用领域全自动冷冻研磨仪具有多种功能,主要包括冷冻研磨、组织破碎、细胞破碎等。广泛应用于冰点以下样品的精细研究,如生物医药、化妆品、食品等领域。通过这款仪器,科研人员可以轻松获取高质量、高纯度的样品,为后续的实验分析提供可靠的原料。三、使用方法及注意事项使用全自动冷冻研磨仪使用方法及注意事项,需要按照以下步骤进行操作:准备样品:选择合适的样品杯,将待研磨的样品装入其中。冷冻样品:将样品杯放入制冷系统中,将样品冷却至所需温度。安装研磨棒:取出冷却好的样品杯,将研磨棒安装到研磨室中。开始研磨:将样品杯和研磨棒一起放入研磨室中,关闭研磨室,启动研磨程序。收集样品:研磨完成后,取出样品杯,收集研磨好的样品。在使用过程中,需要注意以下事项:确保样品杯和研磨棒的清洁度,避免污染样品。根据不同的样品性质选择合适的研磨程序和参数,避免样品受损。在研磨过程中,要保持制冷系统的正常运行,确保样品温度维持在所需范围内。研磨完成后,及时清理研磨室和研磨棒,保持仪器的清洁。四、全自动冷冻研磨仪的优势高效率:全自动冷冻研磨仪能够快速、高效地研磨各种冰点以下样品,大大提高了实验效率。高质量:通过精确控制研磨程序和参数,可以获得高质量、高纯度的样品,为后续实验提供可靠的原料。高安全性:全自动冷冻研磨仪具有完备的安全保护装置,能够确保实验过程的安全性。适用范围广:该仪器广泛应用于生物医药、化妆品、食品等领域,具有广泛的应用价值。全自动冷冻研磨仪作为一款先进的科研利器,为冰点以下样品的精细研究提供了极大的便利。通过这款仪器,科研人员可以获得高质量、高纯度的样品,为后续的实验分析提供可靠的原料。同时,全自动冷冻研磨仪的高效率、高质量、高安全性和广泛适用性等特点也使其在科研领域中具有广泛的应用价值。
  • 预算近1亿元|中国疾控中心创新项目采购多套冷冻电镜等
    6月29日,中国政府采购网发布《中国疾病预防控制中心公共卫生创新计划项目-病原冷冻电镜结构研究平台和高通量数字玻片成像系统公开招标公告》,中国疾病预防控制中心拟以9260万元人民币采购一批仪器设备,包含300kv冷冻透射电子显微镜1台(套),200KV冷冻透射电子显微镜1台(套),冷冻双束电镜1台(套),120kv透射电子显微镜1台(套),工作站1台(套),高压冷冻仪1台(套),冷冻电镜投入式冷冻制样设备2台,辉光放电仪1台(套),等离子清洗仪1台(套),真空离子溅射仪1台(套),正置荧光显微镜 (FIB光电联用光镜)1台(套),倒置荧光显微镜1台(套),液氮罐1台(套),高通量数字玻片成像系统1台(套)。以上仪器均接受进口产品。采购需求:包号品目号品目名称数量(台/套)是否接受进口产品分包预算金额(人民币万元)备注11-1300kv冷冻透射电子显微镜1是9000非单一产品采购包核心产品1-2200KV冷冻透射电子显微镜1是1-3冷冻双束电镜1是1-4120kv透射电子显微镜1是1-5工作站1是1-6高压冷冻仪1是1-7冷冻电镜投入式冷冻制样设备2是1-8辉光放电仪1是1-9等离子清洗仪1是1-10真空离子溅射仪1是1-11正置荧光显微镜 (FIB光电联用光镜)1是1-12倒置荧光显微镜1是1-13液氮罐1是22-1高通量数字玻片成像系统1是260单一产品采购包交货期合同签订后12个月内交货地点/项目现场中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所指定地点用途实验备注:本项目采购标的对应的《中小企业划型标准规定》所属行业为:工业采购标的需满足的质量、安全、技术规格、物理特性等要求:第1包 品目1-1 300kv冷冻透射电子显微镜一、技术参数:1、分辨率 ▲1.1、信息分辨率:≤0.12nm1.2、点分辨率:≤0.25nm1.3、线分辨率:≤0.14nm2、电子枪2.1、采用场发射电子枪2.2、使用寿命≥1年2.3、束斑漂移:≤0.5nm/min (10分钟内平均束斑漂移)2.4、亮度:≥7.5*107 A/m2srV2.5、辐射安全:≤0.5uSv/hr@距离0.1米电子枪3、加速电压3.1、最高加速电压:≥300kV3.2、在80kV至300kV间加速电压连续可调4、照明系统4.1、完全平行光系统,可实现多模式照明,在TEM模式中对大视野和可变视野都能够平行照明。▲4.2、线性畸变≤0.5% (TEM模式在18k×和155k×放大倍数之间)5、控制系统:控制软件具备应用脚本软件,用户可自行编写程序控制电镜进行特定或某些复杂的实验。6、真空系统:无油真空系统。7.放大倍数7.1、TEM模式放大倍数范围100×-700,000×7.2 在任何放大倍数实现完全无旋转成像8、物镜8.1、相机长度范围:300mm-2,500mm8.2、焦距≥3.5mm 8.3、物镜极靴间距≥10mm8.4、球差系数:≤3mm8.5、色差系数:≤3mm8.6、物镜光阑:70um、100um9.样品台系统9.1、计算机控制≥4轴样品台9.2、X/Y轴行程≥2mm9.3、Z轴行程≥0.4mm9.4、最大倾斜角度:不少于±70°9.5、最大图像漂移:X/Y方向 ≤1μm(+/- 70°内倾转)9.6、重复性:≤ 400nm(3次重复测试 ) 10. 自动进样系统10.1、一次能够装载≥10个样品,并能够自动更换和转移样品,所有样品均可回收并重复使用。10.2、待用样品在低温样品停泊装置保持在冷冻状态≥120小时。10.3、能够自动补充液氮。10.4、冰生长率:≤1%/24小时 (透射信息损耗)10.5、最低温度:≤-170 ℃10.6、样品交换后漂移:交换40分钟后:≤0.035nm/s▲10.7、同一样品在镜筒内可以保持在冷冻状态,连续收集数据时间≥72小时。11、电镜操作 11.1、具有低剂量曝光功能。11.2、可设置多个用户的等级,每个用户之间的参数 设置相对独立。11.3、要求电镜安装所需房间高度≤4m。12、直接电子探测系统 12.1、像素数≥4000×4000像素。12.2、像素大小≥5μm12.3、电子计数读出模式下量子转化效率(300kV):0 Nyquist,DQE≥ 0.85;1/2 Nyquist,DQE,≥ 0.65;1 Nyquist,DQE≥0.25。 12.4、超分辨读出模式下,最大画幅≥10000×8000像素。12.5、辅助相机:可伸缩式;采集矩阵≥4K×4K, 像素物理尺寸≥5μm。12.6、原厂集成数据采集软件。12.6.1、能够自动进行单颗粒数据收集包括自动扫描整个样品、测定冰层厚度、进行低剂量数据收集。12.6.2、能够进行自动化电子断层扫描数据采集。13、能量过滤器探测系统 (300kV)13.1、温度稳定性(狭缝漂移/24h):≤1.5ev13.2、能量狭缝最小宽度:≤2ev13.3、图像几何畸变:≤0.5%13.4、图像色差畸变:≤0.4%13.5、探测器内部帧率:≥200fps14、相位板系统14.1、对比度增强≥140%14.2、采用无孔相位板系统14.3、可自动加热恢复14.4、可用区域≥80%14.5、相位偏转:40-80nC剂量时,≥0.2πRad二、主要配置:1、300kV冷冻电镜主机:1套2、直接电子探测器:1套(含辅助相机)3、能量过滤器系统:1套4、三维重构软件:1套 5、相位板:1个6、备用场发射灯丝:1根7、冷冻电镜配套UPS电源(断电情况下维持一小时):1台 8、冷冻电镜上样专用耗材:1000套三、验收和培训1、工作流验证工作:采用标准样品,达到出厂要求。2、10天应用专家现场培训。3、根据项目进展情况进行安装。安装调试完成,符合厂家性能参数验收标准,培训后2个月内,用户进行验收,验收合格后开始计算质保期。 4、供货周期:合同签订后12个月内。5、质保期:3年(包括电镜主机,包括相机,循环水机和空压机)。6、负责电镜安装场地(≤80㎡)环境改造,满足设备使用要求的电磁场、震动、温度、湿度、噪声及地线的指标。品目1-2 200KV冷冻透射电子显微镜一、技术参数:▲1、信息分辨率:≤0.23nm。2、加速电压2.1、最高加速电压:≥200kV2.2、加速电压通过软件控制切换2.3、高压稳定性:≤1ppm/10min3、电子枪3.1电子枪类型:场发射超亮型电子枪,使用寿命≥1年▲3.2 束流:≥0.5nA@1nm束斑4、放大系统4.1 放大倍数:低倍≤100倍;高倍≥650,000倍 4.2 相机长度范围:250mm-2.5m5、真空系统5.1、采用无油真空系统,由机械泵、涡轮分子泵和离子泵等构成5.2、真空度:电子枪真空度≤5 x10-7 Pa;样品区真空度≤2.7 x10-5 Pa6、物镜6.1、球差系数:≤3mm6.2、色差系数:≤3mm7、自动进样系统7.1 一次能够装载和更换≥10个样品,并能够自动更换和转移样品。待用样品在低温样品停泊装置保持在冷冻状态连续无污染存放时间≥72小时。样品可以回收和重复使用。7.2、能够自动补充液氮。7.3、冰生长率:≤5%/24小时 (透射信息损耗)7.4、最低温度:≤-170 ℃7.5、样品交换后漂移:交换60分钟后,≤0.05nm/s8、样品台 8.1、X/Y轴行程:不少于±1mm;8.2、Z轴行程:不少于±0.35mm;8.3、最大倾斜角度:不少于±70°;9、直接电子探测系统 9.1、像素矩阵≥4000×4000像素9.2、像素大小≥5μm9.3、超分辨读出模式下,最大画幅≥ 10000×8000像素9.4、原厂集成数据采集软件。9.4.1、能够自动化地进行单颗粒数据收集——自动扫描整个样品,测定冰层厚度,进行低剂量数据收集。9.4.2、能够进行自动化的电子断层扫描数据采集。10、相机系统10.1、像素数≥4000 ×4000像素10.2、像素大小≥10μm10.3、读取速率:≥1 fps@4kx4k;≥25 fps@512x51211、电镜操作11.1、具有低剂量曝光功能。11.2、可设置多个用户等级,每个用户之间的参数设置相对独立。二、主要配置:1、200kV冷冻电镜主机:1套2、直接电子探测器系统:1套3、相机:1套4、备用场发射灯丝:1根 5、配套UPS电源(断电情况下维持一小时):1套6、三维重构软:1套 7、电镜主机配套操作和数据收集软件:1套三、售后服务:1、供货周期:合同签订后12个月内。2、质保期:验收合格后3年(包括相机,循环水机和空压机、电镜主机)。3、负责电镜安装场地(≤60㎡)环境改造,满足设备使用要求的电磁场、震动、温度、湿度、噪声及地线的指标。品目1-3 冷冻双束电镜一、设备用途: 用于冷冻电子断层三维重构样品的制备工作。二、技术参数1、电子源: 1.1、肖特基场发射电子枪;1.2、使用寿命:≥9个月;1.3、束流范围:1.5pA-300nA;1.4、加速电压范围:500V-30kV;▲1.5、冷冻状态分辨率(冷台):≤6nm@ 2kV2、 离子源 2.1、离子源寿命:≥1000小时;2.2、加速电压范围:500V -30kV; 2.3、离子束流:1.5pA–50nA范围内≥12挡可选;2,4、具备针对非导电样品的漂移抑制模式;▲2.5、离子束分辨率(冷冻状态):≤7.0nm@30kV3、真空系统 3.1、无油真空系统;3.2、仓室真空度:室温,≤4*10-4 Pa;冷冻,≤8*10-5 Pa;4、冷冻样品台 4.1、可旋转冷台,冷冻条件下旋转范围:≥360°;4.2、冷冻降温时间:≤30min;4.3、XY轴行程:≥50mm;4.4、Z轴行程:≥40mm;4.5、冷冻状态下倾斜角范围:-10°~ +50°;4.6、冷冻温度:≤ -170℃;5、图像处理 5.1、图像存储格式:TIFF(8bit, 16bit或24bit)、BMP、JPG;5.2、图像存储矩阵:≥ 6000×4000像素;5.3、电子扫描旋转:≥360°5.4、驻留时间范围(扫描):25ns/pixel-25ms/pixel;6、冷冻机械臂6.1、机械臂针尖温度:≤-160°6.2、机械臂漂移:≤250nm/min6.3、集成红外观测相机,用于样品和腔室观测;6.4、内置样品沉积保护层,可以待剪薄切片层保护,避免被离子束损伤; 6.2、内置喷镀装置,对冷冻下的剪薄切片进行导电化处理。三、主要配置:1、双束主机:1套2、空压机、循环水机、UPS电源:1套3、光电联用软件:1套4、电镜主机操作系统软件:1套5、耗材5.1、备用场发射灯丝:1根5.2、备用离子源:2个5.3、上样耗材:100个四、售后服务:1、供货周期:合同签订后12个月内。2、质保期:验收合格后3年(包括相机,循环水机和空压机、电镜主机)。3、负责电镜安装场地(≤40㎡)环境改造,满足设备使用要求的电磁场、震动、温度、湿度、噪声及地线的指标。品目1-4 120kv透射电子显微镜一、技术参数:1、物镜1.1、线分辨率≤0.2nm 1.2、放大倍数:30×-600,000×,放大倍数全程连续可调,包含所有模式。1.3、恒定功率双物镜设计,具备高对比度模式,配置物镜高对比度极靴。1.4、焦距≥3mm1.5、极靴间距:≥10mm2、电子源2.1、热电子型电子源 ▲2.2、加速电压:20 kV-120kV2.3、高电压切换时间:≤1分钟3、照明系统3.1、照明模式:具备平行光模式和汇聚束模式3.2、透镜级数:≥2级聚光镜,用户可选强度限制(用于样品保护)和缩放限度(用于恒定屏幕强度)。4、成像系统▲4.1、成像系统:CPU控制≥6级透镜系统,物镜、中间镜和投影镜均≥2级。4.2、图像不随放大倍数放大而旋转, XY样品移动方向,XY坐标不变。4.3、衍射长度:0.1-8m。4.4、探测相机(速度≥40fps)和主相机,探测相机实现远程控制电镜。4.5、全自动控制聚光镜光阑、物镜光阑系统。4.6、可自动聚焦,并调整欠焦量。4.7、自动补偿:可以自动补偿合轴、自动补偿图像旋转。5、真空系统5.1、配置机械泵、分子泵和离子泵构成的无油真空系统。5.2、镜筒真空度:冷却温度下,≤2×10-5 Pa;环境温度下≤3.5×10-5 Pa6、样品台6.1 样品杆:单倾样品杆6.2、样品移动:6.2.1、样品移动:CPU控制≥5轴马达驱动。6.2.2、样品位移:X/Y:≥2 mm,调节步长≤0.05 μm;Z:≥0.70 mm。6.3、样品台倾斜角:不少于±80◦,调节步长≤0.5◦6.4、漂移:≤1 nm/min(标准样品杆)7、主相机 7.1、像素矩阵:≥4k×4k 7.2、像素大小:≥10um7.3、冷却方式:水冷7.4、图像存储模式:tiff、jpg、bmp、gif等各式自由转换。二、主要配置要求:1、120kV冷冻电镜主机:1套2、主相机:1套3、备用六硼化镧灯丝:3支4、备用钨灯丝:50支 5、120kv配套 UPS电源:1台6、主机配套标准操作软件:1套三、售后服务:1、供货周期:合同签订后12个月内。2、质保期:验收合格后3年(包括相机,循环水机和空压机、电镜主机)。3、负责电镜安装场地(≤20㎡)环境改造,满足设备使用要求的电磁场、震动、温度、湿度、噪声及地线的指标。品目1-5 工作站一、用途:用于300kv和200kv 冷冻电镜的数据存储和数据处理。二、技术参数: 1. 工作站:4台1.1架构:4U机架式服务器 1.2内存:32*32G DDR4 ECC1.3 GPU:8*英伟达 V100 1.4 CPU:2*英特尔Gold 6230R CPU1.5 SSD:2*4TB;机械硬盘≥14T1.6网络连接:2*万兆网口 1.7电源和风扇:配置2000W冗余电源及风扇2.存储服务器:1台2.1架构: 4U机架式服务器 2.2内存: 4*32G DDR4 ECC2.3 CPU:2*英特尔Silver 4210 CPU2.4 SSD:2*480G2.5加速盘:4*480G SSD2.6机械硬盘:1P 2.7网络连接: 2*万兆网口 2.8电源和风扇: 配置2000W冗余电源及风扇3. 下载服务器:1台3.1 CPU:1*英特尔W-22453.2 内存:2*32GB DDR4 ECC 3.3 硬盘:1*480G SSD;2*8T HDD4.提供配套的机柜,万兆网线,交换机,服务器搭建的配套附属设备。5.提供配套的软件部署,数据采集,数据处理等技术支持培训的服务。6. 负责工作站安装场地(≤40㎡)环境改造,满足设备使用要求的电磁场、震动、温度、湿度、噪声及地线的指标。品目1-6 高压冷冻仪一、主要技术指标:1. 电量消耗2. 维持主机运行液氮消耗≤80L/天。3. 高压冷冻每样品液氮消耗≤80mL。4. 允许冷冻不同样品,≥9(3x3)个冷冻循环。5. 样品存储杜瓦瓶可自动旋转定位多个存储位置。6. 无需乙醇等溶液作为冷冻同步溶液。7. 每次冷冻循环之间的复原时间≤1分钟。8. 维持主机运行时噪声值9. 高压冷冻样品时噪声值10. 玻璃化厚度(有效冷冻固定厚度),≥200μm。11. 工作压力2000-2600 bar。12. 彩色图像触摸屏设计控制面板,(用户可自行设置工作流程),冷冻完成后数据可通过USB导出。13. 冷冻速率:12000K/s -25000K/s。14. 剩余液氮自动排放。15. 设有工作照明灯:LED环形照明。16. 样品冷冻杜瓦瓶监测液面高度,自动填充。17. 配备观察用显微镜。 17.1光学系统:变焦,变倍式光路系统,保证在任何倍率下都可以呈现鲜明、清晰的图像。17.2变焦比≥6.3 :1,变焦范围:0.65X-4X。17.3观察镜筒:高眼点双目镜筒,大倾角(≥35°),瞳距可调节。 17.4配备宽视野*10倍目镜、视场数≥23 mm,屈光度可调节。17.5 至少内置1倍物镜,且工作距离≥110mm。品目1-7 冷冻电镜投入式冷冻制样设备一、数量:2套二、主要技术指标:1. 工作温度:18-25℃2. 相对湿度:90%-100%3. 液氮环境下栅格从冷却剂转移至栅格盒:半自动4. 双面拍合或单面拍合5. 可编辑拍合时间6. 吸附压力可调7. 有杜瓦瓶液氮可烘烤8. 触屏控制和踏板控制9. 一次可转移≥2个Grid box10. 小体积样品:可使用吸液管通过人工气候室左侧和右侧的小口手动应用11. 应用时间和等待时间:由软件控制,可在用户界面设置。12. 多样品应用、吸干动作和玻璃化时间控制:精确定时控制13. 吸干设备14. 样品吸干方式: 过滤纸吸15. 吸干动作次数和吸干持续时间:≥10次/样品,由软件控制,可在用户界面设置。16. 吸干补偿及排液时间:软件控制,可由用户定义17. 玻璃化18. 自动遮板控制19. 冷却剂容器和微栅样品杆温度控制:同步降低温度可保持微栅浸没在冷却剂内20. 冷却剂容器包括整合式抗污染圈品目1-8 辉光放电仪一、主要技术指标1. 辉光放电电流 0-30mA2. 样品台直径≥75mm,带玻片用滑槽3. 样品台高度1-25mm可调4. 样品腔内腔尺寸:直径≥100mm,高度≥90mm5. 工作真空范围1.1-0.20mbar 品目1-9 等离子清洗仪一、主要技术指标1. 清除系统:芯片控制系统2. 工作模式:真空清除透射样品杆和污铜网样品的污染3. 样品杆:TEM4. 时间设定:0-30min , 1min/步5. 真空系统:干泵无油真空系统6. 真空级别:120秒内达到最高真空7. 室温控制:15℃-30℃8. 电源:AC100V-240V,50Hz±1 Hz品目1-10 真空离子溅射仪一、主要技术指标1. 真空度:5x10-5 mbar2. 样品仓大小:硼硅酸盐玻璃工作腔室,内径≥100mm,高≥125mm3. 靶面至样品台距离:可调范围为20-50mm4. 溅射电流:0-40mA5. 溅射时间:0-999s6. 溅射速率:(在压力为7Pa,放电电流40mA,靶材距离样品30mm时)Pt≥15nm/min,Pt-Pd≥20nm/min,Au≥35nm/min,Au-Pd≥25nm/min7. 最大样品尺寸:直径≥60mm,高度≥20mm8. 靶材:根据需要,可选配Au,Pt,Au-Pd,Pt-Pd,C 品目1-11 正置荧光显微镜 (FIB光电联用光镜)一、主要技术指标1. 光学系统:无限远校正光学系统,保证光通过目镜到物镜整个光路中的所有棱镜及镜片时的绝对平行;2. 具有明场、相差功能,具有顶部双摄像出口;3. 物镜转换器≥七孔位;4. 放大倍数:50X-1000X;5. 透射光照明:12V100W卤素灯照明器;6. 调焦:带有三档调焦装置;调焦旋钮高度可调节;7. 宽视野三目镜筒:视野≥25mm,分光比例0/100%,50/50%,100/0%(可100%分光给照像部分);8. 载物台:低位置同轴驱动旋钮的高抗磨损性陶瓷覆盖层载物台;用户可自己将操作杆左右手更换;X-Y移动无暴露齿条;9. 荧光光源:光源寿命≥2000h,红绿蓝三色带滤块;10. 光学部件:10.1万能聚光镜:带有孔径光阑的聚光镜,有效光阑刻度上具有彩色标注且与物镜颜色代码对应;10.2目镜:10X宽视野目镜,视野数为≥22mm;11. 图像捕捉及分析系统;12. 摄录系统;12.1数字式科研级数码、彩色冷CCD;12.2 CCD芯片规格:≥2/3”,≥500万像素;12.3像素大小≥3μm;13. CCD工作温度:低于室温20℃;14. 曝光时间:1msec- 60sec;15. 彩色深度:36位RGB色彩深度。品目1-12 倒置荧光显微镜一、主要技术指标1. 研究级高端倒置显微镜手动版,支持明场、荧光、相差功能。支持多模块扩充功能;2. 主机:2.1手动物镜转换器和手动粗微轴调焦(最小微调刻度单位:≤1μm),行程≥12mm,粗调旋钮扭矩可调,备有上限调节;2.2侧光路出口,视野直径≥19mm;2.3具有控制面板,含光强控制和光强按钮;2.4备有6孔物镜转盘;2.5具有侧接口,可百分百手动分光至相机或目镜。3. 光学系统:无限远校正光学系统,齐焦距离≥45mm。4. LED透射光照明装置:带TTL光闸,寿命≥30000小时。5. 观察镜筒:双目镜筒,观察角度可在30-45度范围内调节。6. 目镜:10×,视场直径为≥24mm。7. 手动载物台,配有样品移动尺、通用型标本托板和各种孔板夹,可匹配多种培养板、皿及玻片。8. 聚光镜:8.1编码型固定式,配备相差环。8.2聚光镜顶透镜:数值孔径≥0.4;工作距离≥40mm。9. 物镜:9.1 4X或5X:平场半复消色差荧光相差物镜,数值孔径≥0.12,工作距离≥14.0mm。9.2 10X:平场半复消色差荧光相差物镜,数值孔径≥0.32,工作距离≥11.13mm。9.3 20X:半复消色差长工作距离荧光相差物镜,数值孔径≥0.55,工作距离≥6.9mm。9.4 40X:半复消色差长工作距离荧光物镜,带矫正环,数值孔径≥0.6,工作距离3.3-1.9 mm。10. 荧光设备:10.1光学载体:保护荧光无杂散光干扰。10.2手动外置荧光轴模块,内含透镜组。10.3荧光滤块转盘:≥6位,可最多安装5个荧光滤块。10.4荧光挡板:荧光使用期间可保护使用人眼睛。10.5荧光激发块 10.5.1 DAPI(蓝色)荧光滤块,激发350/50nm,分光镜400 nm, 发射460/50 nm 带通10.5.2 FITC(绿色)荧光滤块,激发470/40 nm,分光镜510 nm,发射515 nm长通10.5.3 TXR(红色)荧光滤块,激发560/40 nm,分光镜585 nm,发射630/75 nm带通10.6荧光光源:长寿命荧光光源,质保寿命≥3000小时,随开随关,不影响使用寿命,≥5档光强调节。11. 彩色制冷相机:≥500万真实像素,拍摄时分辨率可调,支持彩色、黑白模式,致冷温度-20℃,曝光时间4微秒-200秒,全像素模式下≥40帧/秒。品目1-13液氮罐一、技术参数1. 250L 22psi低压液氮罐 6个2. 165L 22psi低压液氮罐 1个3. 200L 350psi高压液氮罐 1个4. 35L样品存储罐 4个 5. 4L样品转移罐 8个6. 样品运输盒 8个6.1 旋转透明盖,底座内螺纹,四孔各有编号6.2 常温TEM载网和冷冻载网通用第2包 品目2-1高通量数字玻片成像系统一、工作条件1、环境温度:20°C-30°C;2、环境湿度:≤85%(25℃);二、技术要求1、扫描系统主机:1.1、全自动数字玻片扫描系统具有明场扫描、荧光扫描等多种成像功能,不同成像方式电动切换;1.2、单次样品装载量≥90张,可以持续添加玻片;1.3、系统具有显微成像光路,明场科勒照明;1.4、可通过软件编辑控制流程;1.5、多相机配置。预览相机快速识别拍摄样品及标签,明场扫描通过彩色相机成像;荧光扫描通过黑白相机成像;1.6、聚光镜:电动聚光镜1个,兼容强度传输方程(TIE)成像模式;1.7、像素分辨率:20x物镜下,≤0.50μm/pixel;40x物镜下,≤0.50μm/pixel;60x以上物镜下,≤0.30μm/pixel;1.8、电动扫描载物台,行程≥300×100mm;1.9、Z轴对焦范围≥3mm;1.10、可识别条形码,二维码,OCR码;2、物镜:2.1、≥20×物镜:平场复消色差物镜,数值孔径≥0.75,W.D.工作距离≥0.6mm2.2、≥40×物镜:平场复消色差物镜,数值孔径≥0.95,W.D.工作距离≥0.2mm▲2.3、≥60×物镜:平场复消色差物镜,数值孔径≥1.4,W.D.工作距离≥0.1mm▲2.4、配自动加油器,配合60X以上油镜使用,实现全自动扫描;3、样品舱室及兼容玻片:3.1、单次装载数量≥90片(玻片尺寸≥25mmx75mm),可以持续添加玻片;3.2、每张玻片相互隔离,待机和扫描时始终保持水平状态;3.3、配备样品上样器,用于快速装载玻片;3.4、兼容多种规格的玻片。4、扫描速度:4.1、明场扫描:使用20×/0.75物镜、扫描分辨率≤0.50μm /pixel、扫描面积15mm×15mm时,所用时间≤75s;4.2、荧光扫描:使用20×/0.75物镜,≥6个荧光通道成像,扫描分辨率≤0.50μm/pixel、扫描面积15mm×15mm时,所用时间≤500s。5、明场扫描:5.1、光源:LED光源,波长范围:400-700nm;▲5.2、具有自动Z轴扫描成像及景深扩展功能;5.3、明场扫描配置彩色相机,物理像素≥2400(H)×2000(V)。6、荧光扫描: 6.1、光源:配备LED光源或长寿命金属卤化物光源,激发波长范围400-700nm; ▲6.2、电动荧光转盘孔位≥6位,通道之间切换时间≤50ms;6.3、具有强度传输方程(TIE)照明模式,并能为一个单独通道成像,可与荧光图像叠加;6.4、荧光滤色片:可实现多色荧光标记的样品成像;6.5、荧光扫描单色相机:物理像素≥2000(H)×2000 (V)。7、扫描工作站:7.1、硬件7.1.1、CPU:≥6核,主频≥3GHz7.1.2、内存≥128G;固态硬盘≥4TB7.1.3、独立显卡,显存≥8GB7.1.4、彩色液晶显示器≥32英寸7.1.5、操作系统:Windows系统 7.1.6、打印机:彩色激光打印机7.2、扫描及图像处理软件:7.2.1、控制所有电动硬件、识别处理信息、图像可视化;7.2.2、自动程序化图像采集:个性化设定图像采集程序,自动完成≥150张样品扫描;7.2.3、具有预扫描和导航功能;7.2.4、多维图像采集:多通道成像、Z-Stacks成像、拼图及多点成像等;7.2.5、多种聚焦策略可选,满足不同类型样品的大视野拼图;7.2.6、自动对焦:可设定相应的聚焦地形图,自定义编辑样本聚焦点位置;7.2.7、具备图像压缩模式,可设定图像压缩比率7.2.8、图像格式:JPG、TIFF、BMP等;7.2.9、可进行同屏比较;7.2.10、测量参数包含长度、面积和角度等7.3 图像分析软件7.3.1 全景图像数据分析软件,具有免疫组化/免疫荧光切片中细胞核、细胞质、细胞膜染色的识别、阴性/阳性细胞计数、 染色强度分析、细胞阳性比率统计。7.3.2可进行明场图像免疫组化组织及细胞定量分析,自动化进行单个视野或者整张玻片阳性及阴性组织的精确识别,阳性及细胞的细胞核,细胞浆,细胞膜等区域的精确识别,并导出各类分析结果数据;7.3.3免疫荧光组织及细胞定量分析,自动化进行单个视野或者整张玻片多通道荧光图像的阳性及阴性组织的精确识别,量化细胞核、细胞膜、细胞浆中免疫荧光标记物表达,并导出各类分析结果数据。7.3.4 可自定义输出分析数据,包括:组织面积,阳性及阴性区域面积数据及阳性区域百分比等数据;阳性及阴性细胞数量、细胞长度、面积、周长、交界长度、H-Score评分等数据;光谱特征、真实染色空间、滤镜和(前后关联)特征。8、数字玻片成像系统的全部软硬件均为同一厂家提供,产品软硬件售后支持和维修也由同一厂家负责。三、主要配置:1、高通量玻片成像主机:1台2、图像扫描工作站:1台3、图像扫描软件:1套4、图像分析计算机:1套5、图像分析软件:1套6、校正用明场校正玻片、荧光校正玻片各1个四、售后服务1、质保期:安装完毕后24个月或发货之日起30个月免费质保,以先到为准。2、安装调试及应用培训:由专业人员负责安装、调试;安装过程中负责介绍仪器操作、日常保养注意事项;提供现场操作培训及操作手册。3、培训:仪器到位之后,由工程师完成培训,帮助用户掌握仪器的基本操作。4、出现问题在报修后24小时内相应,3个工作日内相关人员到达机器所在地点启动后续维护维修工作。

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  • 冷冻电镜单颗粒技术样品制备载网支持膜的选用

    冷冻电镜单颗粒技术样品制备载网支持膜的选用

    冷冻电镜技术是现今结构生物学里最常用的解析生物大分子三维结构的技术之一。虽然其样品制备过程比另一种同样非常常用的技术——X射线晶体学简便,但成功制备出一个适合进行高分辨数据收集的样品仍然是经验、运气、努力与创新相结合的结果。为了承载样品,使其能送入透射电镜进行观察,样品需要与带支持膜的载网接触并冷冻固定在一起。目前,可供选用的载网支持膜大体分两种:一种是有孔支持膜,包括常用的微栅碳支持膜、碳微阵列支持膜(如Quantifoil,GiG,Cflat等)、金属微阵列支持膜(如Quantifoil金膜,镍钛膜等)等,可直接购买使用。另一种是在有孔支持膜上再加一层连续超薄支持膜,添加的超薄支持膜常用的为超薄碳膜,近期又出现了氧化石墨烯膜等基于石墨烯的超薄膜类型。这种通常需要使用者对市售的有孔支持膜再加工,在其表面多加一层超薄支持膜。无论使用哪种膜,由于提供支撑的有孔膜较厚引入的噪音很高,数据收集都发生在孔内。[align=center][img=,690,728]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811260954438579_6129_3224499_3.jpg!w690x728.jpg[/img][/align][align=center]图1.常用有孔支持膜类型[/align][align=center][img=,690,550]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811260954588204_7034_3224499_3.jpg!w690x550.jpg[/img][/align][align=center]图2.有孔支持膜加连续超薄支持膜类型[/align]适合单颗粒技术数据收集的冷冻电镜样品需符合以下要求:①生物大分子群体主要为同种分子或者组分相同的复合体,且它们稳定在一种或有限的几种彼此能被计算机图像处理分类技术区分的构象;②样品颗粒彼此分离,同时分布密度又能满足在一次数据采集区域内获得足够的颗粒数量;③样品颗粒的空间取向随机分布。[align=center][img=,690,262]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811260955256336_8129_3224499_3.jpg!w690x262.jpg[/img][/align][align=center]图3.理想化的样品颗粒在冰层中的分布示意图[/align]这些要求看似与载网支持膜的选用无太大关联,但实践经验告诉我们,有时同一个样品使用不同的载网支持膜进行样品制备,其数据收集质量有区别。导致这种差别的原因之一是支持膜表面性质的不同对进孔样品分布密度的影响。使用有孔碳支持膜常见的一个问题是样品大部分粘附在支持膜上,而在孔内的样品数量很少。根据经验,碳支持膜对部分样品的吸附性能相当强,溶液中的样品会优先吸附到碳膜上,以至于游离的样品颗粒浓度大大降低,而分布在支持膜孔内的样品来源于游离的样品颗粒群体。使用添加了连续超薄膜的载网则少有这个问题,毕竟孔内孔外都有碳膜,同时由于碳膜对样品的吸附在一定程度上具有样品富集效应,还可降低制样时所需样品浓度。此外,使用金属材质的有孔支持膜(如金膜,镍钛膜等)能缓解这种情况,因为金属支持膜表面性质与碳支持膜有区别,其对样品的吸附也可能有差异。[align=center][img=,690,263]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811260955370487_1473_3224499_3.jpg!w690x263.jpg[/img][/align][align=center]图4.连续碳膜上的样品颗粒在冰层中的分布示意图[/align]导致这种差别的原因之二是冷冻样品制备时气液界面对样品的影响。由于电子能穿透的样品厚度很有限,样品被冻住前必须先进行减薄。目前最简单也最通用的减薄法是使用滤纸移除大部分液体而仅剩厚度在几十至上百纳米范围的水膜。根据现今通用的制样方式,从水膜的形成到它被快速冷冻成非晶态冰膜的时长在秒的量级。水膜的上下两层气液界面之间的距离如此短,水膜中样品被冷冻固定前的时间如此长,以至于样品颗粒有成千上万次机会与气液界面接触。每次接触样品颗粒都机率变性,或变成无定形的多肽链,或解体成更小的亚基组合。最终我们看到的样品颗粒或是被“已牺牲”的变性样品所保护而未能接触气液界面,或是幸运地多次接触气液界面而仍未变性。更多关于气液界面对样品影响的介绍,可参考孙飞(2018)以及Glaeser 和Han (2017)发表的综述。[align=center][img=,690,285]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811260955485024_3909_3224499_3.jpg!w690x285.jpg[/img][/align][align=center]图5.现实的样品颗粒在冰层中的分布示意图[/align]使用有孔支持膜无可避免地会受到来自上下两层气液界面的影响,某些样品会因此而在冷冻后无法观察到完整颗粒。而使用连续超薄支持膜一面由气液界面转换为固液界面,另一面由于支持膜对样品的吸附而远离气液界面,有效地降低了气液界面对它的影响。既然添加连续超薄支持膜的载网有这么多好处,为什么很多样品仍然使用有孔支持膜呢?原因之一是长期使用的超薄碳支持膜对于小蛋白(特别是分子量小于500kDa)仍然太厚,引入的噪音太多,导致小蛋白数据取向搜索结果不够精确,影响重构分辨率提升。而石墨烯类超薄支持膜理论上为单分子层,比超薄碳膜更薄,在这方面可以帮上忙。但石墨烯类支持膜添加到载网上的方法仍在发展中,目前使用上仍不及有孔支持膜便利。[align=center][img=,690,541]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811260956026943_9251_3224499_3.jpg!w690x541.jpg[/img][/align][align=center]图6.样品直径与碳膜厚度的选择(感谢友情出镜的大蛋黄颜值担当评审嘉宾)[/align]原因之二是添加超薄支持膜更大机率引起样品的取向优势,导致某些取向数据采集量远远不足,同样影响重构分辨率提升。[align=center][img=,690,396]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811260956143795_3302_3224499_3.jpg!w690x396.jpg[/img][/align][align=center]图7.样品颗粒取向优势示意(感谢友情出镜的大蛋黄实力客串样品颗粒)[/align]纯有孔支持膜与添加超薄支持膜两种方案可谓各有优缺。有孔支持膜的缺点很明显,在于受气液界面的两面夹击。如果有一种方法能缩短样品减薄到冷冻固定的时长至毫秒级别,那么样品颗粒将没有足够的时间多次接触气液界面,同时也减少与支持膜本身的接触,从而使用有孔支持膜的各种问题将可能迎刃而解。Bridget Carragher实验室研发了一种特殊的载网,命名为纳米线载网(nanowire grids)。这种载网具有自减薄功能,即载网孔内多余的液体会被固定在载网梁上的纳米线所吸走,留在载网孔内的液体厚度自然下降。当然纳米线吸附液体体积是有上限的,需要配合他们实验室研发的微量加样设备(Spotiton robot)加注皮升级别的样品量。虽然目前还未得到普及,但这种设置可以实现将减薄步骤的时长降低到百毫秒级别的水平。目前该文章未正式发表。推荐阅读文献:Fei Sun. Orienting the future of bio-macromolecular electronmicroscopy. Chin. Phys. B. 2018, 27(6): 063601Glaeser RM, Han BG. Opinion: hazards faced by macromolecules whenconfined to thin aqueous films. Biophys Rep. 2017, 3(1):1-7Noble AJ, Wei H, Dandey VP, Zhang Z, Potter CS, Carragher B.Reducing effects of particle adsorption to the air-water interface in cryoEM.doi: https://doi.org/10.1101/288340Palovcak E, Wang F, Zheng SQ, Yu Z, Li S, Bulkley D, Agard DA, ChengY. A simple and robust procedure for preparing graphene-oxide cryo-EM grids.doi: http://dx.doi.org/10.1101/290197Russo CJ, Passmore LA. Electron microscopy: Ultrastable goldsubstrates for electron cryomicroscopy. Science. 2014, 346(6215):1377-80.Sader K, Stopps M, Calder LJ, Rosenthal PB. Cryomicroscopy ofradiation sensitive specimens on unmodified graphene sheets: reduction ofelectron-optical effects of charging. J Struct Biol. 2013, 183(3):531-536来源:【生物成像中心】欢迎大家分享讨论使用过的载网支持膜[img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09505.gif[/img]

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