液相免疫分析仪

http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/04/201204261141_363473_1699466_3.jpg ACS全自动化学发光免疫分析系统由拜耳公司生产，采用化学发光技术和磁性微粒子分离技术相结合的免疫分析系统。20世纪90年代初首次推出全自动化学发光免疫分析系统ACS：180。90年代中期推出第二代产品为ACS：180SE分析系统(图2)，最 近该公司又推出了ACS：CENTAUR。第二代产品将微机与主机分开，软件程序加以改进，使操作更灵活，结果准确可靠，试剂贮 存时间长，自动化程度高等优点。 1.仪器测定原理 该免疫分析技术有两种方法：一是小分子抗原物质的测定采用竞争法；二是大分子的抗原物质测定采用夹心法。该仪器所用固相磁粉颗粒 极微小，其直径仅1.0µ m，这样大大增加了包被表面积，增加抗原或抗体的吸附量，使反应速度加快，也使清洗和分离更简便。其反应基本过程：⑴竞争反应： 用过量包被磁颗粒的抗体，与待测的抗原和定量的标记吖啶酯抗原同时加入反应杯温育，其免疫反应的结合形式有两种，一是标记抗原与 抗体结合成复合物；二是测定抗原与抗体的结合形式。⑵夹心法：标记抗体与被测抗原同时与包被抗体结合成一种反应形式，即包被抗体 -测定抗原-发光抗体的复合物。 上述无论哪种反应凡所结合的免疫复合物均被磁铁吸附于反应杯底部，上清液吸出后，再加入碱性试剂；其免疫复合物被氧化激发，发射 出 430nm波长的光子，再由光电倍增管将光能转变为电能，以数字形式反映光量度，计算测定物的浓度。竞争法是负相关反应。夹心法 是正相关反应。 2.实验操作 本仪器测定所用试剂均包括两种：固相磁粉和液相发光试剂。每套试剂可放置于试剂托盘的任意位置上，由仪器扫描标签条码后自动加样 。根据测定项目不同，试剂用量在50~450µl之间。测定标本必须用血清，禁止用血浆，以防纤维蛋白将管路堵塞。 由于是自动化仪器，其操作极其简单：①将样品编号排入样品盘。②按试验项目将所用试剂放入试剂盘，并观察辅助试剂。③自由编排程 序，按“START”键运行，根据所编工作表，在微机的控制下，仪器自动放置反应杯，自动加样与试剂，并根据实验项目不同进行温育。温育时间一般在 2.5~7.5分。从第一个测定开始至16分钟，分析仪自动计算报告结果。然后每20秒有一个结果报出，即每一分钟报告3个结果 。如果60个样品同时测定，120个实验项目仅用一个小时即可完成。④随时可加入急诊检查项目。⑤打印报告方式可有三种：按测定 混合项目排列报告；按病人编号排列报告；按每一种项目排列报告。 3.仪器组成及特点 该仪器由主机和微机两部分组成。主机部分主要是由仪器的运行反应测定部分组成，它包括原材料配备部分、液路部分、机械传动部分及光路检测部分。微机系统是该仪器的核心部分，是指挥控制中心。该机设置的功 能有程控操作，自动监测，指示判断，数据处理，故障诊断等，并配有光盘。主机还配有预留接口，可通过外部贮存器自动处理其他数据 并摇控操作，以备实验室自动化延伸发展。 ACS：180SE分析仪为台式，其主要特点为：①测定速度：每小时完成180个测试，从样品放入到第一个测试结果仅需要15分 钟，以后每隔20秒报一个结果。②样品盘：可放置60个标本，标本管可直接放于标本盘中，急诊标本可随到随做，无需中断正在进行 的测试。③试剂盘：可容纳13种不同的试剂，因此每个标本可同时测定13个项目。④全自动条码识别系统：仪器能自动识别试剂瓶和 标本管，加快了实验速度。⑤灵敏度：达到放射免疫分析的水平。 4.测定项目 现有检测项目 47项，更多的项目还在开发之中。①甲状腺系统：总、游离T3，总、游离T4，促甲状腺素，超敏促甲状腺素，T3摄取量。②性腺 系统：绒毛膜促性腺激素，泌乳素，雌二醇，雌三醇，促卵泡成熟素，促黄体生成素，孕酮，睾酮。③血液系统：维生素B 12，叶酸，铁蛋白。④肿瘤标记物：AFP，CEA，CA15-3，CA125，CA19-9，β2 微球蛋白，PSA。⑤心血管系统：肌红蛋白，肌钙蛋白T，肌酸激酶-MB。⑥血药浓度：地高辛，苯巴比妥，茶碱，万古霉素，庆大 霉素，洋地黄，马可西平。⑦其他：免疫球蛋白E，血清皮质醇，尿皮质醇，尿游离脱氧吡啶。

[size=16px]　　酶联免疫分析(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA)是一种常用于检测生物分子(如蛋白质、抗体、激素等)在样本中的定量或定性测量的实验技术。以下是使用酶联免疫分析仪检测生物实验的一般步骤：　　准备实验材料和试剂：　　样本：可以是血清、尿液、细胞上清等。　　标准品：已知浓度的目标分子，用于绘制标准曲线以计算未知样本中的浓度。　　酶标抗体：用于与目标分子结合的抗体，被标记上酶以便后续检测。　　捕获抗体：涂覆在微孔板上，用于捕获目标分子和酶标抗体复合物。　　涂覆微孔板：　　向微孔板中加入捕获抗体，使其在孔底吸附。　　将孔板放置在冰箱或其他适当条件下孵育，让抗体吸附稳定。　　加入样本和标准品：　　加入待测样本和一系列已知浓度的标准品到不同的孔中。　　标准品的浓度通常是一个浓度梯度，用于绘制标准曲线。　　孵育和洗涤：　　孵育样本和标准品，使目标分子与捕获抗体结合。　　之后，使用洗涤缓冲液洗涤孔板，去除未结合的物质。　　加入酶标抗体：　　加入带有酶标记的抗体，它会与样本中的目标分子结合形成复合物。　　孵育和洗涤：　　孵育酶标抗体，使其与捕获的目标分子结合。　　再次用洗涤缓冲液洗涤孔板，去除未结合的物质。　　加入底物：　　加入含有底物的溶液。底物被酶催化后会产生颜色或荧光，信号强度与目标分子的浓度成正比。　　停止反应：　　加入停止液终止底物的反应，防止颜色或荧光的继续产生。　　测量信号：　　使用酶联免疫分析仪读取每个孔的颜色或荧光信号强度。　　将信号与标准曲线进行比较，计算样本中目标分子的浓度。　　数据分析：　　根据标准曲线和信号强度，计算样本中目标分子的浓度。　　请注意，每个实验都需要根据具体的样本和目标分子进行优化和调整。操作过程中应严格遵循实验操作规程，以确保结果的准确性和可重复性。如果你是初次进行ELISA实验，建议在有经验的实验室或专业人士的指导下进行。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308311608055074_5122_6098850_3.png!w690x690.jpg[/img][/size]