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液相新手 求助 色谱柱怎样才叫平衡好了呢 是看基线是否平稳还是要看哪里 或者还有其他指标要看一般平衡多久算色谱柱平衡时间足够 仪器开机气泡没有后再开始连接色谱柱,色谱柱要在流动相中走多久才叫色谱柱平衡好了 按时间算还是按照 几倍柱长算请各位指点 谢谢
反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈/水中的;由于色谱柱在储存或运输过程中固定相可能会干掉,这会引起键合相的空间结构发生变化。因此,新的色谱柱在用来分析样品之前,请一定要充分平衡色谱柱。反相色谱柱的平衡方法如下:以纯乙腈或甲醇作流动相,首先用低流速0.2ml/min将色谱柱平衡过夜(请注意断开检测器!),然后,将流速增加到0.8ml/min冲洗30分钟既可以进行样品的分离。请一定确保您所使用的流动相和乙腈/水互溶。如果您所使用的流动相中含有缓冲盐,应注意首先用20倍柱体积的5%的乙腈/水流动相“过渡”,然后使用分析样品的流动相直至得到稳定的基线 * 相对于反相色谱柱来讲,硅胶柱或极性色谱柱需要更长的时间来平衡:这些色谱柱在出厂测试后是保存在正庚烷中的。如果极性色谱柱需要使用含水的流动相,请在使用流动相之前用乙醇会异丙醇平衡 * 请注意将预柱和分析柱一起平衡每天用足够的时间以流动相来平衡色谱柱,您就会在处理问题方面获得最大的"补偿",而且您的色谱柱的寿命也会变得更长!
新色谱柱:建议使用50倍柱体积的50/50的乙腈/水相缓冲溶液(缓冲液的最终浓度为10mM)平衡。进样前:用20倍柱体积的起始流动相平衡色谱柱。进行梯度分析时,进样间隔需要用10倍柱体积起始流动相平衡色谱柱,色谱柱平衡不充分将导致保留时间漂移。