二极管和柱后衍生仪工作原理

德祥旗下Pickering品牌折扣活动已告一段落！除了活动中涉及的许多性价比试剂耗材，Pickering柱后衍生仪也是Pickering旗下的王牌产品之一，其优异性能深受广大客户青睐。那当客户将仪器拿到手后该如何定期对仪器进行正确维护保养能使其发挥更高的效能呢？本文德祥售后来教您如何独立完成仪器的排查维保。柱后衍生仪故障检修常规步骤● 全面检查系统， 处理漏液问题；● 对设置参数、缓冲液、试剂、阀等根据说明进行核实；● 特别核实所有所用试剂规格，标准品，有效期，是否过期变质；● 系统是否有改变；● 根据文献条件对比：标准样品、色谱柱、参数日志是否有变化；● 收集信息：观察信息、手册、书、技术支持；● 得出关于问题原因的结论；● 开始工作；● 在改变梯度、温度或其它操作条件之前， 针对同一问题至少连续得到两张色谱图。改变之后， 至少有两张色谱图显示了同样的改变效果。尤其是在优化梯度条件的时候。柱后衍生仪常见问题和解决方法试剂泵压力低可能原因 …● 试剂泵系统中存在气泡；● 试剂流速低；● 泵系统中有漏液处；解决方法 …● 检查泵系统中所有接头是否正确；● 重点检查试剂瓶盖处peek接头是否松动；● 检查泵头底部是否有漏液；● 检查泵头出口是否有液体流出；试剂泵压力高可能原因 …● 沉淀物堵塞流路；● 接头拧的过紧；● 检测器流通池的堵塞；● 0.5um过滤芯，10um过滤芯，脉冲阻尼器，限流管，加热反应器等部位是否堵塞；解决方法 …确定堵塞的精确位置，接下来一次断开一个位置， 从检测器废液管向前逐级断开检查，直到压力下降；若部分堵塞，清洗管路，若完全堵塞，更换配件；过压泻放阀打开可能原因 …● 加热反应器堵塞；● 检测器流通池堵塞；● 泄压阀处有异物堵塞；解决方法 …确定堵塞的精确位置，接下来一次断开一个位置， 从检测器废液管向前逐级断开检查，直到压力下降；若部分堵塞，清洗管路，若完全堵塞，更换配件。柱后衍生仪的维护保养不仅限于日常故障问题的排查，下面我们以Pickering的Vector PCX柱后衍生仪为例为大家介绍一下。Pickering Vector柱后衍生维护保养使用前维保注意事项● 检查压力开关进出连接管是否正确，并在运行HPLC压力最大时，检查是否有漏液；● 检查试剂瓶及管路洁净度，如需要充分清洗干净；● 连接好柱子出口至混合器1，环境反应器至检测器等接口；使用中维保注意事项● 运行中一直将界面显示在压力模式下，以便观察柱后运行情况；● 压力低：漏液（查找漏液处），进气泡（从试剂瓶-输液管-瓶盖-泵出入口-排空阀-压力传感器等）；使用后维保注意事项Vector柱后衍生仪做完样品检测后，应及时清洗。因为衍生液都是含盐溶液，如果不及时清洗可能会有固体物质析出导致管路系统堵塞。所以每次测试完后，应及时用20%甲醇水溶液冲洗系统管路。具体操作流程如下：1. 将Vector衍生液瓶换成装有20%甲醇水溶液瓶，旋松排空阀，用注射器灌注泵前管路，一般抽出10ml左右液体即可，再旋紧排空阀；2. 启动Vector流速，一般默认流速是0.3 ml/min，设定流速冲洗管路后，可以同时将高温反应池温度设低（建议设置到50℃或以下），一边冲洗系统管路的同时让反应池温度降下来，建议反应池温度降至60℃或以下时再停流速，这时系统管路也冲洗好了；3. 如果只是短时间停机（一般3天或以下），按上面步骤冲洗好后关机即可，如果是长时间停机不用，建议用20%甲醇水溶液冲洗完后，再用纯甲醇冲洗一下系统管路再关机保存。使用Vector柱后衍生仪时，我们需要关注Vector的泵压力值，一般新机压力值是600-800psi的范围（使用厂家标配试剂包试剂），随着使用时长的增多，仪器相关的耗材上杂质的累积会越来越多，导致泵压有慢慢变高的趋势，所以当泵压上升到一定程度后，我们就要更换相关耗材。关于泵压升高的耗材更换注意事项导致泵压力升高的主要耗材如下：1. 0.5μm在线过滤器（PN 3102-9042），一般建议这个过滤器导致泵压力上升300psi左右更换；2.限流管（PN 1100-0161），一般建议限流器导致泵压力高至一定程度（压力值约到1200psi时）更换；3. 10μm在线过滤器（PN 3102-9040），一般建议这个过滤器导致泵压力上升300psi左右更换。同时建议Vector PCX柱后衍生仪使用一年后，做泵的维护保养，泵的PM维护包（PN 3106-1255）。密封组件* 每个密封套装包括：柱塞清洁布、密封圈嵌入/移除工具、密封圈、垫圈、O型圈、隔膜。如何维修泵？* 建议专业工程师进行维护维修● 试剂更换为80水/20甲醇；● 开启液相，设置相应的流速以开启柱后衍生仪；● 开启Vector，设置加热反应器为关闭状态 ；● 开启试剂泵，用水/甲醇冲洗系统至少30分钟；● 冲洗完成后，关闭液相泵，柱后衍生仪也会跟着关闭；● 关闭Vector电源，从试剂泵上拆卸下输液管路。如何拆除泵？● 将单向阀上的管路接头断开；● 移除柱塞清洗管；● 使用 5/32”内六角扳手松开位于泵头前方的两个螺丝。*注意：拆卸泵头时不要损坏柱塞杆，旋转泵头会导致柱塞杆损坏。如何移除泵？● 小心将泵头、自动清洗架拆下。拆卸时，保持水平拉出小心不要损坏柱塞杆；● 拆下O型圈；● 使用镊子将隔膜拆下。德祥售后服务德祥售后团队由一群具备专业技能及丰富经验的技术人员组成，拥有极强的解决问题能力及极快的响应速度。依托于德祥30多年的相关行业经验与百年技术厂家的合作支持，德祥售后可为客户提供专业贴心的全方位售后服务：如果您在仪器的排查维护过程中遇到任何问题，可拨打热线400-006-9696/售后专线020-32568787，德祥售后会在第一时间安排专业人员为您服务，关注“德祥售后服务”我们将会不定期分享仪器维保内容。Pickering促销活动虽结束618活动仍然在继续目前，Pickering旗下试剂耗材促销活动已结束，但是慧淘618活动中还有其他品牌的高性价比产品可供选择。同时，6月18日19点，还有专业主播教你如何选择最适合你的科研产品！德祥科技德祥科技有限公司成立于1992年，总部位于中国香港特别行政区，分别在越南、广州、上海、北京设立分公司。主要服务于大中华区和亚太地区——在亚太地区有27个办事处和销售网点，5个维修中心和2个样机实验室。30多年来，德祥一直深耕于科学仪器行业，主营产品有实验室分析仪器、工业检测仪器及过程控制设备，致力于为新老客户提供更完善的解决方案。公司业务包含仪器代理，维修售后，实验室咨询与规划，CRO冻干工艺开发服务以及自主产品研发、生产、销售、售后。与高校、科研院所、政府机构、检验机构及知名企业保持密切合作，服务客户覆盖制药、医疗、商业实验室、工业、环保、石化、食品饮料和电子等各个行业及领域。2009至2021年间，德祥先后荣获了“最具影响力经销商”、“年度最佳代理商“、”年度最高销售奖“等殊荣。我们始终秉承诚信经营的理念，致力于成为优秀的科学仪器供应商，为此我们从未停止前进的脚步。我们始终相信，每一天都在使这个世界变得更美好！

产品介绍：通微PCD-3000柱后衍生系统专门面向柱后衍生分析，适用范围广：1.采用模块化设计的衍生泵和反应器，配置灵活，提供一级柱后衍生系统和二级柱后衍生系统可供选择，满足不同柱后衍生实验操作的需求；2.全流路惰性材料设计，可耐强酸、强碱性衍生环境，适用性广泛；3.衍生泵配有柱塞清洗功能，可实时清洗柱塞，减少酸、碱、盐类试剂对泵柱塞的腐蚀，延长仪器使用寿命。专门面向柱后衍生分析: l 独立可调节无脉冲恒流泵，保证衍生液输送的准确性和稳定性。l 衍生泵配有柱塞清洗功能，可实时清洗柱塞，减少酸碱盐类试剂对泵柱塞的腐蚀，延长衍生泵使用寿命。l 衍生泵具有过压保护功能，可根据要求设定衍生泵限制压力，超压力自动停泵，防止仪器受到损坏。l 准确控温的可加热反应器，可根据衍生反应要求设定反应器温度。l 反应器体积大小可根据具体衍生反应需求进行实际调整，满足不同衍生化实验的需求。l 反应器具有过热保护功能，过热保护温度限制反应器温度不超过150℃，防止仪器受到损坏。全流路惰性材料设计，可耐强酸、强碱性衍生环境，适用性广泛。应用领域：氨基甲酸盐杀虫剂、草甘膦除草剂、胍基类化合物、毒枝菌素、致人瘫痪或麻痹的甲壳类或贝类水生动物毒素、百草枯和杀草快、聚醚类抗生素、磺胺药、单端霉烯霉菌毒素、维生素B1、B6、甲醛等。创新点：通微PCD-3000柱后衍生系统专门面向柱后衍生分析，适用范围广，性能优秀：1.采用模块化设计的衍生泵和反应器，配置灵活，提供一级柱后衍生系统和二级柱后衍生系统可供选择，满足不同柱后衍生实验操作的需求；2.全流路惰性材料设计，可耐强酸、强碱性衍生环境，适用性广泛；3.衍生泵配有柱塞清洗功能，可实时清洗柱塞，减少酸、碱、盐类试剂对泵柱塞的腐蚀，延长仪器使用寿命。通微PCD-3000系列柱后衍生系统

2020年版中国药典收载了5种复方氨基酸注射液、9种多肽类药物及1种中药品种，均需要采用氨基酸分析方法测定药品中氨基酸含量或氨基酸组成。为了指导药典标准执行过程中如何选择适宜的方法，国家药典委员会委托中检院牵头承担完成了“药品中氨基酸分析法的建立课题”，拟定了中国药典氨基酸分析指导原则，填补之前药典中关于选择测试方法的空白。 图1：各国药典介绍的氨基酸分析方法问题来了这么多的检测方法应该如何选择？蛋白质和多肽的氨基酸分析，需要将样品先水解成游离的氨基酸才能进行分析。由于氨基酸本身并没有发色集团或荧光基团，所以游离氨基酸通常需要衍生化才能测定。药品中氨基酸测定常用方法一共有6种，分别是：① 柱前PITC衍生氨基酸测定法；② 柱前AQC衍生氨基酸测定法；③ 柱前OPA和FMOC衍生氨基酸测定法；④ 柱前DNFB衍生氨基酸测定法；⑤ 柱后茚三酮衍生氨基酸锂离子交换系统测定法；⑥ 柱后茚三酮衍生氨基酸钠离子交换系统测定法。按照衍生顺序可分为柱前衍生和柱后衍生。柱前衍生法原理：根据氨基酸与衍生试剂反应，生成有紫外吸收的衍生物，后经反相液相色谱分离后用紫外检测器在一定波长处检测，在一定的浓度范围内其响应值与氨基酸浓度成正比；优点：对仪器配置要求不高，实验成本低。缺点：某些衍生物不稳定，无法定量，分离效果一般。柱后衍生法原理：通过调节系统pH值及离子强度，采用锂/钠离子交换系统，实现离子交换色谱柱对混合氨基酸的分离，经离子交换色谱分离的氨基酸与茚三酮反应，一级氨基酸生成紫色化合物，在570nm波长处有*吸收。二级氨基酸（如脯氨酸）生成*化合物，在440nm波长处有*吸收。在440nm和570nm波长处分别检测，在一定的浓度范围（20～500pmol）内，氨基酸衍生化产物的吸光度与氨基酸浓度成正比；优点：自动化程度高，不易受基质干扰。缺点：针对《氨基酸分析指导原则草案公示稿（第二次）》提到的采用柱后茚三酮衍生氨基酸锂离子交换法，分析时间长，异亮氨酸和亮氨酸间的分离难以达到要求。改善建议采用温度梯度可以改善分离效果。Pickering |氨基酸分析解决方案 1、Pickering参照欧洲药典8.0，提供了完整的氨基酸分析解决方案——方案包括Onyx-PCX 柱后衍生仪、色谱柱和保护柱、缓冲液和茚三酮衍生试剂。Pickering Onyx-PCX可以修改运行条件，执行温度梯度程序，缩短运行时间加速氨基酸分离,符合欧洲药典8.0的系统适用性要求,（亮氨酸和异亮氨酸分离度要大于1.5）。 表1：欧洲药典8.0参考指南2、分析条件：色谱柱：高效钠离子交换柱 4.6*110mm，货号1154110T；流速:0.6mL/min；流动相:见表2；进样体积:50ul； 表2：HPLC梯度程序（115411T）3、柱后衍生条件：柱后衍生系统:Onyx PCX；反应器体积:0.5mL；试剂:Trione茚三酮 ；反应温度:130ºC；柱温:见表3；流速:0.3 mL/min；检测波长:UV/Vis 570nm一级氨基酸；440nm二级氨基酸。 表3：柱温程序 图1：欧洲药典8.0方法分析氨基酸的钠柱色谱图一 _(浓度3 ug/mL, 进样体积50 uL) 图2：氨基酸分析钠柱色谱图，以欧洲药典8.0方法计算系统适应性检查 _(参考表1).Proline – 1.2 ug/mL Isoleucine – 3 ug/mL Leucine – 3 ug/mL Ammonia – 0.12 ug/mL. 进样体积50 uL.4、结论：今年3月份发布的针对《氨基酸分析指导原则草案公示稿（第二次）》中，以欧洲药典为参照,填补了我国2020版药典之前对氨基酸分析指导意见的空白，详细的阐述了几个常用方法的原理以及特点。Pickering参照欧洲药典8.0，提供完整解决方案，HPLC+Onyx PCR 即可实现药典中提到的柱后茚三酮衍生氨基酸锂离子交换系统测定法和柱后茚三酮衍生氨基酸钠离子交换系统测定法，完美实现方法扩增。引用：氨基酸分析指导原则草案公示稿（第二次）关于Pickering Laboratories 美国Pickering Laboratories公司是全球*专业提供人工测试体液和柱后衍生化学试剂、色谱柱、分析方法等柱后衍生分析整体解决方案的机构，其不断创新及良好的信誉被众多的美国政府机构如EPA、ATF、FDA、AOAC和世界*的厂商所认可。