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我现在因工作需要检测植物秸秆中的叶黄素和花青素含量,希望能够得到大家的帮助!
最近,要开展食品中叶黄素的检测,存在叶黄素的标准品很贵,也很难购买在这里,也很想请高人们指点一下,检测过程中应注意哪些注意事项?
叶黄素是人类日常食用生果及蔬菜时可吸收到的营养素,但吸收利用率一般较低。如果缺乏叶黄素,可服用补充剂。如果是消化系统较差的老年人,可以使用舌下的喷剂来补充叶黄素。早在 1996 年叶黄素已被加入到膳食补充剂。另外,过量吸取叶黄素会对肝脏造成多余的负担,建议用量每日大约为 12 毫克。一般在绿叶的蔬菜中可以找得到。叶黄素本身是一种抗氧化物,并可以吸收蓝光等有害光线。[align=center][img=,324,276]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101153518939_6860_932_3.jpg!w324x276.jpg[/img][/align][color=#646464]本实验主要针对果汁中叶黄素的测定[/color][align=center][color=#646464][img=,600,405]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101153577234_9508_932_3.jpg!w640x433.jpg[/img][/color][/align][color=#646464][color=#646464]参考标准:《GB 5009.248-2016食品安全国家标准 果汁中叶黄素的测定》[/color][/color][b][color=#646464] [/color]萃取溶剂称取 1g BHT(二丁基羟基甲苯),以 200mL 环己烷溶解,加入 400mL 乙醚和 400mL 正己烷,混匀。1、样品提取称取 10g 果汁试样于 50mL 离心管中,加入 10mL 萃取剂,避光旋涡震荡提取 3min,4000r/min 离心 3min,重复提取两次,合并三次萃取液,室温减压浓缩至近干,用 3mL 萃取溶剂溶解待净化。2、样品净化Welchrom Alumina-N, 500mg/3mL活化: 5mL 萃取溶剂淋洗,保持柱体湿润,弃去。上样:将上述萃取液,以 1滴/s 的速度通过Welchrom Alumina-N 柱至鸡心瓶中。洗脱:用 3mL 萃取液洗脱至鸡心瓶中,室温减压浓缩近干,用甲醇定容至 10mL,过 0.45μm 滤膜待 HPLC 分析。3、仪器条件HPLC条件色谱柱:Ultimate AQ-C18 4.6×150mm,5μm仪器型号:Waters2695+PDA2996流动相:甲醇-乙腈=20:80柱温:35℃流速:1.0mL/min检测波长:445nm进样体积:10μL4、实验图谱及结果[/b][align=center][img=,600,488]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101326381133_6340_932_3.jpg!w640x521.jpg[/img][/align][align=center]图1 叶黄素样品加标 5mg/kg 液相色谱图[/align]由图1可看出经 Alumina-N 柱净化,采用月旭 Ultimate C18 色谱柱检测峰形良好,保留时间稳定。[color=#646464][/color][align=center][color=#646464][img=,600,486]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101154109028_1819_932_3.png!w640x519.jpg[/img][/color][/align]图2 叶黄素样品加标 10mg/kg 液相色谱色谱图[align=center][b][img=,600,111]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101154198884_9526_932_3.jpg!w640x119.jpg[/img][/b][/align][align=center]表1 叶黄素加标回收实验结果(n=10)[/align][b]由表1可知,采用月旭 Welchrom Alumina-N 小柱结合液相色谱法检测叶黄素,加标量为 5mg/kg 和 10mg/kg 的样品进行了检测,回收率在86.29%~97.27%,能够满足检测要求。5、实际样品检测为了保证果汁样品的代表性,从多家超市以及菜场选择具有代表性的 10 个果汁样品进行检测,结果均为未检出。6、结论本实验建立了叶黄素检测的 HPLC 检测方法,对于加标量为 5 和 10mg/kg 的样品进行了检测,回收率在 86.29%~97.27%,固相萃取柱方法稳定并且色谱柱重现性良好,说明本方法能够用于检测食品中的叶黄素的含量。7、订购指南[/b][align=center][img=,600,524]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101154281505_9762_932_3.jpg!w581x508.jpg[/img][/align]