故障排除方法

产品详情：LC 和LC/MS 故障排除HPLC 故障排除症状类型可能的原因解决方案负峰 示差折光检测器 — 溶质的示差折光指数 小于溶剂无故障；反转极性使之为正 UV 检测器 — 溶质的吸光值比流动相小 使用紫外吸光率较低的流动相；溶剂循环时间不要过长基线噪声大 随机性 — 污染物积聚冲洗色谱柱、净化样品，使用液相色谱级溶剂连续性 — 检测器灯故障更换检测器光源偶然性 — 外部电气干扰使用 LC 系统专用稳压器双峰 样品量过大减少体积，例如，减半并重复进样进样溶剂过强使用较弱的进样溶剂或流动相滤芯堵塞更换并使用 0.5 μm 孔隙率的在线过滤器柱有空隙或气沟用玻璃珠或填料填充空隙、重填柱进样器流路不通畅更换进样器转子柱头有空隙更换色谱柱，用填料填充色谱柱顶部柱上样品过载 使用更高负载量的固定相增加色谱柱内径减少样品量单峰 — 存在干扰组分样品净化，预分离拖尾峰 开始出双峰请参见“双峰”存在未扫的死体积 减少接头的数量确保进样器密封垫紧密确保接头正确固定碱性化合物 — 硅醇基相互作用 选择封端键合相改用聚合物固定相碱性物质 — 硅醇基相互作用使用更强的流动相或添加竞争碱（例如，三甲胺）硅胶基 — 色谱柱降解使用特殊色谱柱、聚合物色谱柱或空间保护HPLC 故障排除症状类型可能的原因解决方案峰展宽 进样量过大降低进样溶剂的强度以集中溶质进样阀中的峰扩散在进样前/后引入气泡以减少扩散数据系统的采样速率过低增大采样频率检测器时间常数低调节时间常数使之与峰宽匹配流动相粘度过高提高柱温检测器池容积过大使用尽可能小的池容积（系统中无热交换器）注射器体积过大减少进样量保留时间长使用梯度洗脱或较强的流动相压力波动 单向阀泄漏更换单向阀泵密封垫泄漏更换泵密封垫微粒积聚过滤样品；在线过滤器；过滤流动相压力渐增 微粒积聚过滤样品；在线过滤器；过滤流动相水/有机系统 — 缓冲盐沉淀测试缓冲液-有机混合物；确保兼容性保留超出总渗透体积体积排阻 — 特异性相互作用添加流动相改性剂或更换溶剂保留时间改变 柱温不断变化使柱恒温；绝缘；保证实验室温度恒定平衡时间不足以适应梯度洗脱要求， 或等度洗脱流动相起变化确信在溶剂改变或梯度结束后至少 10 个柱容积通过色谱柱流动相组分选择性蒸发 减少氦气的剧烈脱气；保持溶剂贮器盖好；制备新的流动相缓冲能力不足用 20 mM 浓度的缓冲液在线流动相混合不一致 保证梯度系统输送恒定组成；与手动制备流动相核对污染积聚用强溶剂不定期冲洗色谱柱来去除污染物最初几次进样 — 吸附在活性部位用浓样品进样冲洗柱，使其处于正常状态HPLC 故障排除症状类型可能的原因解决方案保留时间减少 流速在增加检查泵以确保正确；否则需重调柱上进样超载减少样品量键合固定相的流失保持流动相 pH 值在 2-8.5 之间保留时间延迟 流速在减慢 解决液流中的漏液现象，更换泵密封垫， 检查泵的涡流和气泡硅胶填料的活化点使用流动相改性剂键合固定相的流失保持流动相 pH 值在 2-8.5 之间流动相组成在变化确保流动相容器盖好硅胶填料的活化点流动相中加竞争碱硅胶填料的活化点固定相用更高覆盖度的填充料灵敏度问题 峰位于检测器线性范围之外稀释或浓缩使之处于线性区内最初几次进样 — 样品在样品池 或柱中被吸附用浓样品处理样品池/柱 自动进样器流路阻塞检查液流，确定没有堵塞进样器样品定量环未充满确保样品池中已充满样品样品前处理时相关的样品流失 用内标法在前处理样品，优化样品前处理方法放慢色谱柱平衡时间（离子对现象）长链离子对试剂的平衡时间慢使用较短烷烃链的离子对试剂LC/MS 故障排除症状类型解决方案无峰 雾化器喷雾保证毛细管电压设置正确保证 LC/MSD 调谐正确保证 LC/MSD 检测器压力在正常范围内检查干燥气流量和温度确保碰撞诱导解离电压设置正确质量准确度差 重新校正质量轴确定调谐用离子，估计样品离子的质量范围并显示强稳定的信号信号低 检查溶液化学性质；确保溶剂适合样品保证用新样品，并且正确存储样品保证 LC/MSD 调谐正确检查雾化器条件清洁毛细管入口检查毛细管有无损坏和污染信号不稳定 保证干燥用气流和温度对溶剂流动是正确的保证溶剂彻底脱气保证 LC 反压稳定；指示溶剂流动稳定LC/MS 故障排除症状类型解决方案质谱噪音高 采用合适的质量过滤器值检查喷雾形状；雾化器可能损坏或放置不当保证干燥用气流和温度对溶剂流动是正确的保证溶剂彻底脱气保证 LC 反压稳定；指示溶剂流动稳定如果您将水作为流动相的一部分，请确保其为去离子水（ 18 M? cm）雾化器出口是小液滴而不喷雾 确保雾化气压设定足够高以利液相色谱流动相气化检查雾化器中针头的位置停止溶剂流动，卸下雾化装置检查雾化器末端是否损坏无液流 确保 LC 在工作，在正确的瓶中有足够溶剂检查 LC 故障提示检查阻塞情况修理或更换任何阻塞部件检查是否存在渗漏保证 MS 气流选择器设定在与液相色谱仪联通的位置不需要的裂解现象 (APCI 相对于电喷雾)APCI 温度过高裂解电压设置过高

毛细管电泳常见故障排除现象可能的原因解决方案 分离效率差宽色谱峰 样品超载降低样品浓度或进样量过量的焦耳热降低电压、缓冲液电导率或毛细管内径。变形的色谱峰 样品和缓冲液的离子淌度不匹配调节淌度或增大缓冲液和样品的电导差异样品超载降低样品浓度或进样量峰拖尾 样品吸附到毛细管壁 使用 pH 极值、高的缓冲液浓度、聚合物添加剂或涂 层毛细管 迁移时间重现性差样品吸附到毛细管壁 缓冲液导致的 EOF 变化（特别是磷酸盐和表 面活性剂）或样品吸附老化毛细管并要有足够的平衡时间。更换毛细管 管壁电荷滞后 在高（或低）pH 条件下老化毛细管和使用低 （或高）pH 运行缓冲液引起避免 pH 差异 要有足够的平衡时间缓冲液组分变化 电解导致的 pH 变化更新缓冲液缓冲液挥发扣紧缓冲液瓶盖和降低样品盘温度再生溶液废液流进了出口缓冲液瓶使用单独的样品瓶收集废液再生溶液的残留溶液流入缓冲液瓶先将毛细管插入单独的缓冲液瓶或水瓶中缓冲液瓶液面不一致 生成层流 使缓冲液瓶液面一致。如果不更新缓冲液，就不要使用 入口瓶冲洗毛细管不同批次毛细管的硅 羟基含量不同内壁电荷差异和 EOF 波动 测定 EOF 并归一化 温度变化粘度和 EOF 的变化使用带有可控温毛细管的系统

毛细管电泳常见故障排除现象可能的原因解决方案 电流不稳定波动或无电流 毛细管中形成气泡 冲洗毛细管、程序升高电压以限制初始加热和/或对缓冲液 脱气毛细管堵塞 用吸收溶液（如 NaOH）冲洗毛细管。当观察 200 nm 的在 线信号时，应该看到基线上有“台阶”。如果仍然堵塞， 就用注射器或高压气体手动冲洗毛细管断裂更换毛细管缓冲液瓶中没有缓冲液或者装错缓冲液灌装/改变缓冲液瓶大体积进样正常情况。分析过程中电流应该稳定 基线不稳定基线有毛刺 缓冲液沉淀采用 0.2 或 0.45 μm 的滤膜过滤缓冲液缓冲液中有微小的气泡用超声波或真空对缓冲液进行脱气样品沉淀验证样品组分在缓冲液中有足够的溶解度基线噪声大 毛细管接口中的光狭缝堵塞用甲醇或水清洗狭缝。在放大镜下观察氘灯老化 使用 DAD 测试来测定氘灯的光强度和工作时间。若必要就 更换数据采集速率太高确定峰宽，需要的话降低采集速率参比波长设置不合适 分析过程中采集 UV 光谱图。在不影响样品吸收的情况下 采用尽可能低的波长。并且采用宽的带宽缓冲液在检测波长有吸收 使用紫外吸收最低的缓冲液，如磷酸盐和硼酸盐，特别是 在低于 210 nm 检测时基线漂移 毛细管准直定位不合适重新在检测器块中安装毛细管卡套温度未平衡打开顶盖之后要有 10-20 分钟的平衡时间氘灯刚刚开启开启氘灯后要有 15-30 分钟的平衡时间