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[align=center][b][font=宋体][font=Times New Roman]APOE[/font][font=宋体](载脂蛋白[/font][font=Times New Roman]E[/font][font=宋体])不同表型分型[/font][/font][/b][/align][b][font=宋体]背景[/font][/b][font=宋体][font=宋体]载脂蛋白E([/font][font=Times New Roman]apolipoprotein E, ApoE[/font][font=宋体])作为脂质转运蛋白和低密度脂蛋白受体的主要配体,在胆固醇代谢和心血管疾病中发挥重要作用。[/font][font=Times New Roman]ApoE[/font][font=宋体]有多种异构体,即 [/font][font=Times New Roman]ApoE2[/font][font=宋体]、 [/font][font=Times New Roman]ApoE3 [/font][font=宋体]和 [/font][font=Times New Roman]ApoE4[/font][font=宋体],分别由[/font][font=Times New Roman]APOE[/font][font=宋体]的等位基因 ε[/font][font=Times New Roman]2[/font][font=宋体],ε[/font][font=Times New Roman]3 [/font][font=宋体]和ε[/font][font=Times New Roman]4[/font][font=宋体]来编码;[/font][/font][font=宋体][font=Times New Roman]APOE4[/font][font=宋体]等位基因是阿尔茨海默病的主要危险因素,血清[/font][font=Times New Roman]ApoE[/font][font=宋体]增高与心血管疾病死亡率增加有关,而降低则与[/font][font=Times New Roman]AD[/font][font=宋体]相关死亡率增加有关;[/font][/font][font=宋体][font=宋体]这些研究发现是基于免疫法,如免疫透射比浊法。但基于免疫法的[/font][font=Times New Roman]apoE[/font][font=宋体]的研究数据差异较大;而基于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]串联质谱法([/font][font=Times New Roman][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS[/font][font=宋体])的研究数据一致程度较高;[/font][/font][font=宋体][font=Times New Roman][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS[/font][font=宋体]在定义被分析物和抗干扰方面具有优势,且在血清载脂蛋白的绝对定量上已有较为成熟的应用。[/font][/font][b][font=宋体]实验方法[/font][font=宋体][font=Arial]1[/font][/font][font=Arial].[font=宋体]样品制备[/font][/font][font=宋体][font=Times New Roman]1.1 APOE[/font][font=宋体]混合轻标[/font][font=Times New Roman]mix[/font][font=宋体]线性[/font][font=Times New Roman]1[/font][font=宋体]溶液配制:[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]稀释剂:[/font][font=Times New Roman]0.1%SDC[/font][font=宋体]作为稀释剂[/font][/font][font=宋体][font=宋体]取浓度为[/font][font=Times New Roman]10 ng/[/font][font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]L[/font][font=宋体]的[/font][font=Times New Roman]APOE1234[/font][font=宋体]各轻标肽段溶液[/font][font=Times New Roman]10 [/font][font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]L[/font][font=宋体]至于离心管中(共[/font][font=Times New Roman]40 [/font][font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]L[/font][font=宋体]),再加入[/font][font=Times New Roman]10 [/font][font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]L[/font][font=宋体]稀释剂,混合成为[/font][font=Times New Roman]APOE[/font][font=宋体]混合轻标[/font][font=Times New Roman]mix[/font][font=宋体]线性溶液起始浓度最高点:[/font][font=Times New Roman]2 ng/[/font][font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]L[/font][font=宋体],共[/font][font=Times New Roman]50 [/font][font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]L[/font][font=宋体];[/font][/font][font=宋体][font=宋体]从[/font][font=Times New Roman]APOE[/font][font=宋体]混合轻标[/font][font=Times New Roman]mix[/font][font=宋体]线性溶液起始浓度[/font][font=Times New Roman]2 ng/[/font][font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]L[/font][font=宋体]继续往下梯度稀释,[/font][font=Times New Roman]2000 pg/[/font][font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]L[/font][font=宋体]、[/font][font=Times New Roman]1000 pg/[/font][font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]L[/font][font=宋体]、[/font][font=Times New Roman]500 pg/[/font][font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]L[/font][font=宋体]、[/font][font=Times New Roman]200 pg/[/font][font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]L[/font][font=宋体]、[/font][font=Times New Roman]100 pg/[/font][font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]L[/font][font=宋体]、[/font][font=Times New Roman]50 pg/[/font][font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]L[/font][font=宋体]、[/font][font=Times New Roman]20 pg/[/font][font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]L[/font][font=宋体],以上[/font][font=Times New Roman]7[/font][font=宋体]各浓度点作为[/font][font=Times New Roman]APOE[/font][font=宋体]混合轻标[/font][font=Times New Roman]mix[/font][font=宋体]线性[/font][font=Times New Roman]1[/font][font=宋体];[/font][/font][b][font=宋体][font=Times New Roman]1.2 APOE[/font][font=宋体]混合重标[/font][font=Times New Roman]mix[/font][font=宋体]溶液配制:[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]取浓度为[/font][font=Times New Roman]10 ng/[/font][font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]L[/font][font=宋体]的[/font][font=Times New Roman]APOE1234[/font][font=宋体]各重标肽段溶液[/font][font=Times New Roman]10 [/font][font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]L[/font][font=宋体]至于离心管中(共[/font][font=Times New Roman]50 [/font][font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]L[/font][font=宋体]),再加入[/font][font=Times New Roman]50 [/font][font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]L[/font][font=宋体]稀释剂,混合成为[/font][font=Times New Roman]APOE[/font][font=宋体]混合重标浓度最高点:[/font][font=Times New Roman]1 ng/[/font][font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]L[/font][font=宋体],共[/font][font=Times New Roman]100 [/font][font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]L[/font][font=宋体];[/font][/font][font=宋体][font=宋体]将[/font][font=Times New Roman]APOE[/font][font=宋体]混合重标浓度最高点稀释[/font][font=Times New Roman]10[/font][font=宋体]倍至终浓度为[/font][font=Times New Roman]200 pg/[/font][font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]L[/font][font=宋体]作为混合重标[/font][font=Times New Roman]mix[/font][font=宋体],共[/font][font=Times New Roman]500 [/font][font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]L[/font][font=宋体];[/font][/font][b][font=宋体][font=Times New Roman]1.3 [/font][font=宋体]配制[/font][font=Times New Roman]APOE[/font][font=宋体]混合线性标曲梯度:[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]稀释剂:[/font][font=Times New Roman]0.1%SDC[/font][font=宋体]作为稀释剂[/font][/font][font=宋体][font=宋体]取[/font][font=Times New Roman]APOE[/font][font=宋体]混合轻标[/font][font=Times New Roman]mix[/font][font=宋体]线性[/font][font=Times New Roman]1[/font][font=宋体]各浓度点[/font][font=Times New Roman]10 [/font][font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]L+[/font][font=宋体]混合重标[/font][font=Times New Roman]mix10 [/font][font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]L[/font][font=宋体],加入[/font][font=Times New Roman]40 [/font][font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]L[/font][font=宋体]稀释剂,涡旋混匀,总体积为[/font][font=Times New Roman]60 μL[/font][font=宋体];[/font][/font][b][font=宋体][font=Times New Roman]2[/font][/font][font='Times New Roman'] [/font][font=宋体]仪器方法[/font][font='Times New Roman']2.1 [/font][font=宋体]质谱检测[/font][font=宋体]条件[/font][/b][font=宋体][font=Arial]Column:[/font][/font][font=宋体][font=Arial]ChromCore AQ C18 1.8 [/font][font=宋体]μ[/font][font=Arial]m[/font][font=宋体],[/font][font=Arial]2.1[/font][font=宋体]×[/font][font=Arial]100 mm[/font][/font][font=宋体][font=Arial]Mobile Phase:[/font][/font][font=宋体][font=Arial]A) 0.1%FA-H2O[/font][/font][font=宋体][font=Arial]B) 0.1%FA-ACN[/font][/font][font=宋体][font=Arial]Gradient:[/font][/font][font=宋体][font=Arial]t (min)[/font][/font][font=宋体][font=Arial]%A[/font][/font][font=宋体][font=Arial]%B[/font][/font][font=宋体][font=Arial]0[/font][/font][font=宋体][font=Arial]95[/font][/font][font=宋体][font=Arial]5[/font][/font][font=宋体][font=Arial]1[/font][/font][font=宋体][font=Arial]90[/font][/font][font=宋体][font=Arial]10[/font][/font][font=宋体][font=Arial]10[/font][/font][font=宋体][font=Arial]80[/font][/font][font=宋体][font=Arial]20[/font][/font][font=宋体][font=Arial]10.5[/font][/font][font=宋体][font=Arial]60[/font][/font][font=宋体][font=Arial]40[/font][/font][font=宋体][font=Arial]11[/font][/font][font=宋体][font=Arial]10[/font][/font][font=宋体][font=Arial]90[/font][/font][font=宋体][font=Arial]13[/font][/font][font=宋体][font=Arial]10[/font][/font][font=宋体][font=Arial]90[/font][/font][font=宋体][font=Arial]13.5[/font][/font][font=宋体][font=Arial]95[/font][/font][font=宋体][font=Arial]5[/font][/font][font=宋体][font=Arial]15[/font][/font][font=宋体][font=Arial]95[/font][/font][font=宋体][font=Arial]5[/font][/font][font=宋体][font=Arial]Flow Rate:[/font][/font][font=宋体][font=Arial]0.3 mL/min[/font][/font][font=宋体][font=Arial]Temperature:[/font][/font][font=宋体][font=Arial]40 [/font][font=宋体]℃[/font][/font][font=宋体][font=Arial]Injection:[/font][/font][font=宋体][font=Arial]10 [/font][font=宋体]μ[/font][font=Arial]L[/font][/font][font=宋体][font=Arial]MS:[/font][/font][font=宋体][font=Arial]TSQ Altis[/font][font=宋体]三重四级杆质谱采用[/font][font=Arial]SRM[/font][font=宋体]模式进行检测,检测周期[/font][font=Arial]15 min[/font][font=宋体];[/font][/font][font=宋体][font=Arial]Sample: [/font][/font][font=宋体][font=Arial]APOE[/font][font=宋体](载脂蛋白[/font][font=Arial]E[/font][font=宋体])[/font][/font][b][font=宋体][font=Times New Roman]2.2 APOE[/font][font=宋体]标样检测条件[/font][/font][/b][img=,526,]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/02/202302081625152027_6822_3237657_3.jpg!w658x478.jpg[/img][b][font=宋体][font=Times New Roman]3 [/font][/font][font=宋体]实验结果[/font][/b][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=Times New Roman]3.1 APOE[/font][font=宋体]标样检测结果[/font][/font][/b][img=,552,]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/02/202302081625266439_6227_3237657_3.jpg!w690x380.jpg[/img][b][font=宋体][font=Times New Roman]3.2 APOE[/font][font=宋体]标样检测结果[/font][font=Times New Roman]-[/font][font=宋体]线性范围及内标重现性[/font][/font][/b][font=Calibri] [/font][img=,553,]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/02/202302081625429789_7475_3237657_3.jpg!w690x312.jpg[/img][b][font=宋体][font=Times New Roman]3.3 [/font][font=宋体]实际样品检测结果[/font][/font][/b][img=,552,]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/02/202302081625543206_6217_3237657_3.jpg!w690x318.jpg[/img][img=,553,]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/02/202302081626061074_8109_3237657_3.jpg!w690x317.jpg[/img][img=,553,]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/02/202302081626164568_1650_3237657_3.jpg!w690x269.jpg[/img][b][font=宋体][font=Times New Roman]4 [/font][font=宋体]讨论与总结[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]简单地说,本研究使用了[/font][font=Times New Roman]APOE1/2/3/4[/font][font=宋体]作为定量肽段,绝对定量方法使用合成的同位素标记肽作为内标物,检测样品中目标肽段的浓度;[/font][/font][font=宋体][font=宋体]结果表明,本实验室优化的前处理方法可尽可能实现该类肽段的释放,回收率达到[/font][font=Times New Roman]50-60%[/font][font=宋体];[/font][/font][font=宋体][font=宋体]更重要的是,在实际样本的检测中,根据[/font][font=Times New Roman]APOE1/2/3/4[/font][font=宋体]四条肽段的出现情况,可以得出实际血浆提供者的[/font][font=Times New Roman]APOE[/font][font=宋体]基因型,此结果已经与基因检测结果进行核对,且成功率达到[/font][font=Times New Roman]100%[/font][font=宋体];[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]公司名称:[/font][/font][font=宋体][font=宋体]南京品生医疗科技有限公司[/font][/font][font=宋体][font=宋体]色谱柱信息:[/font][/font][font=宋体][font=Arial]ChromCore AQ C18 1.8[/font][font=宋体]μ[/font][font=Arial]m, 2.1[/font][font=宋体]×[/font][font=Arial]100mm[/font][/font]
众多流行病学研究证实,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平与动脉粥样硬化(AS)呈负相关。美国Framingham的研究显示,HDL-C每减少0.026 mmol/L(1 mg/dl),冠心病(CHD)发生的风险将增加2%~3%。目前临床上已广泛采用HDL-C 众多流行病学研究证实,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平与动脉粥样硬化(AS)呈负相关。美国Framingham的研究显示,HDL-C每减少0.026 mmol/L(1mg/dl),冠心病(CHD)发生的风险将增加2%~3%。目前临床上已广泛采用HDL-C下降作为CHD危险因素指标。低HDL-C是CHD的主要危险因素,而高HDL-C被认为是负危险因子,具有保护性。作者参考美国国家胆固醇教育计划(NCEP)有关文件及新近文献资料,对HDL-C检测方法及标准化问题作一简述。 一、HDL的生物化学 与乳糜微粒(CM)、极低密度脂蛋白(VLDL)和低密度脂蛋白(LDL)相比,高密度脂蛋白(HDL)是密度最大的脂蛋白(d=1.063~1.210kg/L)。其组分中蛋白质(Pro)、磷脂(PL)、胆固醇(chol)和甘油三酯(TG)各约占50%、25%、20%和5%。HDL中Pro主要是载脂蛋白(apo)AI和AII;chol占总胆固醇(TC)的25%~35%,酯化胆固醇(CE)和游离胆固醇(FC)之比约为3∶1。HDL可通过酶和受体的作用,将周围组织的chol移至肝脏降解处理,同时抑制细胞结合和摄取LDL-C,阻止chol在动脉壁的沉积,故HDL被认为是AS的预防因子。
https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/09/202409271156371091_6921_3971926_3.jpg!w690x920.jpg样品做4氨基偶氮苯的时候油脂蛋白质很多,咋办呢?大家如何处理的呢?