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[b][size=15px][color=#595959]健脾调肝饮(JPTGY)[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]具有[b]疏肝、理气、健脾、化痰[/b]的功效,长期临床实践发现其可[b]有效治疗肥胖[/b]。前期研究发现,JPTGY对肥胖患者的减肥效果令人满意,显著降低了患者的总胆固醇和甘油三酯水平,没有任何副作用。然而,由于中药制剂具有多途径和多靶点的特点,JPTGY治疗肥胖症的[b]机制尚不充分[/b]。[/color][/size] [size=15px][color=#595959]该研究旨在采用[b]高脂饮食(HFD)诱导的肥胖小鼠[/b]模型来评估[b]健脾调肝饮(JPTGY)的作用与肠道微生物群和粪便代谢变化之间的关系[/b]。[/color][/size] [align=center] [/align] [size=15px][color=#595959]通过HFD诱导C57BL/6小鼠建立肥胖动物模型。采用[b]脂质代谢的血清生化指标[/b]评价JPTGY在肥胖小鼠中的药效学。[/color][/size] [size=15px][color=#595959]通过16s rDNA基因序列结合基于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-质谱([url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url])的[b]非靶向粪便代谢组学技术[/b],对对照组、HFD组和JPTGY暴露肥胖组的[b]粪便样本中的细菌群落和代谢产物[/b]进行了研究。[/color][/size] [align=center] [/align] [size=15px][color=#595959]JPTGY显著降低总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白(HDL-C)。[/color][/size] [b][size=15px][color=#595959]JPTGY可以上调粪便微生物群的丰度和多样性[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959],其特征是蛋白质细菌门较高。一致地,在属水平上,补充JPTGY诱导毛螺菌科NK4A136组、大肠杆菌、Turicibacter、梭状芽胞杆菌1和拟杆菌的富集,它们与14种关键的粪便代谢产物密切相关,对JPTGY治疗有反应。[/color][/size] [size=15px][color=#595959]代谢组学进一步分析表明,JPTGY对肥胖的治疗作用涉及亚油酸(LA)代谢途径、α-亚麻酸(ALA)代谢途径,甘油磷脂代谢途径、花生四烯酸(AA)代谢途径和嘧啶代谢途径,这暗示了JPTGY治疗肥胖的潜在机制。[/color][/size][font=mp-quote, -apple-system-font, BlinkMacSystemFont, &][size=15px][color=#595959][/color][/size][/font][size=15px][color=#595959][/color][/size][color=#3573b9]结论[/color][b][size=15px][color=#595959][/color][/size][/b][font=mp-quote, -apple-system-font, BlinkMacSystemFont, &][size=15px][color=#595959][/color][/size][/font] [b][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959]肥胖表型与肠道菌群和粪便代谢的联系揭示了JPTGY治疗高脂血症和肥胖的潜在因果关系[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]。[/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size]
前言 药物代谢(drug metabolism)是研究药物在生物体内的吸收、分布、生物转化和排泄等过程的特点和规律的一门科学,即药物分子被机体吸收后,在机体作用下发生的化学结构转化。也是药物研发产业链中的重要环节,贯穿药物研究过程的始终。本实验涉及黄酮类成分在大鼠体内代谢的研究,大鼠灌胃给予药物,累积24h尿液,尿液经处理,运用各种色谱手段,分离得到目标代谢产物。在此过程中有一关键的因素时刻威胁着我们,即代谢产物的降解,因此要设法保证代谢产物的稳定,如低温保存样品,调节尿液的酸碱性,等等。 本实验利用Ultimate XB-C18对两个重要的代谢产物在尿液中的稳定性进行简单的考察。1.Chemical and reagents 甲醇(色谱纯,天津大茂),水(哇哈哈纯净水,杭州),三氟乙酸(TFA, Dikma, USA),其它试剂均为分析纯。2.animals Wista大鼠(220-250g,SPF级,由本校动物实验中心提供)3.HPLC analysis of two important metabolites Waters 高效液相色谱系统,由Waters Model 600 controller液相色谱,Millennium 32 工作站,Model Delta 600 泵,以及Waters 996 DAD检测器组成。 色谱柱:Ultimate XB-C18柱(5μm, 4.6x250mm) 流动相:A通道:甲醇,B通道:水(0.05%TFA)=(20:80, v/v) 流 速:1mL/min 柱 温:35℃ 检测波长:190-400nm扫描 进样量:20μL3.Sample preparation 代谢产物M1和M2之前已制备分离得到,各取1mg,混合溶于2mL水中(M1和M2水溶性很强,也可溶于甲醇),取20μL进样分析;剩余部分置于250mL锥形瓶中,加入新鲜收集的大鼠尿液10mL,室温放置24h,之后该混合溶液,过ODS亲水柱,先用水洗脱,弃去,再用甲醇洗脱,收集甲醇洗脱溶液,45℃浓缩并定容至2mL。取20μL进样分析。4.Results and discussionhttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/07/201107010000_302457_2160661_3.jpg图1. M1与M2纯品混合色谱图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/06/201106302310_302433_2160661_3.jpg图2. M1与M2纯品混合色谱图(局部放大图10-20min)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/06/201106302310_302434_2160661_3.jpg图3. M1与M2在尿液中放置24h后色谱图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/06/201106302310_302435_2160661_3.jpg图4. M1与M2在尿液中放置24h后色谱图(局部放大图20-30min)5.conclusion 1. M1与M2在尿液中放置24h后发生了降解,在保留时间为25分钟左右,出现2个降解产物,其紫外吸收与M1和M2分别对应相似,M1紫外吸收(~271nm, ~310nm), M2紫外吸收(~273nm, ~343nm)。 2. 降解产物可能为M1与M2水解产物,因为M1与M2为极性较大的代谢产物,推测可能为葡萄糖醛酸或硫酸结合产物,其降解过程可能为水解脱掉葡萄糖醛酸基或硫酸基。 3. 这样的结果提示我们,在研究黄酮类成分的代谢过程中要注意样品的保存,在收集到尿液后要快速处理,或者在收集的过程中就进行预防,所采用的方法文献报道有加入乙醇或加酸调pH至5左右,可以防止该类代谢产物的降解。Acknowledgement感谢月旭公司提供Ultimate XB-C18柱。
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