黄夹环烯醚萜苷对照品

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  • 环烯醚萜苷分离?

    环烯醚萜苷分离?

    小弟,最近在做玄参的质量标准分析,玄参的有效成分为环烯醚萜苷来,在跑薄层的过程中,其中梓醇和桃叶珊瑚苷的斑点老是在混合一起而分不开,用过药典的色谱条件氯仿:甲醇:水=12:4:1,增大或减小展开剂极性,都分不开。。。还望各位哥或姐指点哈http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/07/201107071346_303679_2107158_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/07/201107071348_303680_2107158_3.jpg

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  • 专家视角丨药物研发过程中的化学对照品探讨
    精准药物分析的工作,离不开稳定的分析系统和可靠的标准物质(标准品/对照品等)。标准物质具有复现、保存和传递量值的基本作用,对实现测量结果的溯源性,保证测量结果在时间与空间上的连续性与可比性,进而确保测量结果的准确可靠、有效与国际互认具有关键作用。 岛津为制药行业客户提供稳定可靠的标准品/对照品制备解决方案:制备液相系统(Prep LC)、质谱引导的制备液相系统(MS-trigger Prep LC),超快速制备纯化液相色谱系统(UFPLC)、制备超临界流体色谱(Prep SFC)。 超快速制备纯化液相色谱系统(UFPLC)可在线完成从分离、浓缩、纯化到回收的制备全过程。 2020年,中国药科大学药物分析系吴春勇博士于新药仿药CMC实操讨论群进行了精彩而全面的主题分享,并发表在“新药仿药CMC实操讨论”公众号,经过“新药仿药CMC实操讨论”的授权,在此分享吴春勇博士的《化学药物研发过程中的对照物探讨》。 概述案例 对于吴春勇博士的《化学药物研发过程中的对照物探讨》,新药仿药CMC实操讨论群也进行了较为热烈的探讨。PPT正文后续延申的讨论内容如下(基本按照时间先后顺序列出)。 沈晓斌博士(前FDA资深审评员,FDA报批咨询顾问):very nice.吴博士论述的非常全面、非常细。我们就说比如说在FDA做review的时候呢,我们个人不会接触那么全面,各种各样的方式,这个标准品的这个去就是抽点它的含量呀,就是拿到他的COA,通常不会把各种方法都是看过一遍的。 就是它这个PPT呢,把所有的东西都给想细细的捋了一遍,个人觉得就是这是一个对知识体系的全面的补充,有些东西,因为你以前没有接触过,你不会考虑那么细,当在FDA的时候你看到的是公司怎么做,然后你来评估他是否合理,是否可以接受,或者跟FDA的现有要求,来评估。 想要就说一点,FDA本身他不去说去该怎么去定量,这个标准品他只是负责审评,就是评审你(的资料),外界可以自己去建议你想要的方式,但是你要有足够多的科学依据,然后他(FDA)来评估是否可以接受,就是完全靠自己来论述清楚。 另外就是说国内看起来,这个我以前对国内这个没有太多的,而且也没有特别去关注,因为我这个工作最早才从FDA报批方面的东西,吴教授这个主题一讲,觉得国内在有些方面其实要求是似乎是比USP、FDA的要求更细更多一些,有一种感觉就是弯道超车已经超了,在有些方面实际上是做的更好。只不过,过去这些年,西方就是设定了这种既定的质量标准,那其他国家,就因为你要照着西方去做仿药嘛,你就必须根据他的规则来走,更多的是这方面的区别。 孙亚洲老师(长沙晶易首席科学家):意见1:研发人员买的非法定对照品,外标法测定杂质含量时,很多人直接采用了COA的赋值,也直接采用相应的测定结果订入了标准,有些不妥。包括批检验,最初的朔源需要是法定对照或者经过标定的对照品。 意见2:在吴博士的ppt中,对于非法定来源的如百灵威,sigma等买到的杂质对照品,拿到后是否需要再行进行研究工作或者分析一下是否存在风险,似乎没有提出来。这个问题建议大家是否深入思考一下。 群主补充:只有经过标化赋值且可溯源(过程,方法,验证)的,风险才是最低的。 群主补充:尽管杂质测定中,如5%的误差是可以接受的(这属于科学性的范畴);但不等同于对照品/标准品可以草率拿来,草率采用他人的赋值,这完全是两个范畴。也许某份杂质对照品中含水量10%,无机成分包括前处理过程带来的硅胶等30%,若草率定量,杂质的真实含量会被低估如40%。 沈晓斌博士:同意以上的观点。 群友1:通过药品杂质的公司购买的对照品,我们就碰到了,欧美的一家知名公司提供的对照品结构出现偏差,我们通过多次比对都无法拿到和代谢产物吻合的结果,多次交涉和讨论之后才发现该公司的产品是另外一个同分异构体。 吴春勇博士(中国药科大学药物分析系副教授):看来概率虽然小,这个问题还是客观存在的。 沈晓斌博士:提供化合物的公司没有责任和义务。使用者必须做该做的来证明给监管机构标准品的使用是合理的。 刘国柱博士(长沙晨辰医药创始人、技术总监):我请教吴博士一个问题,目前国内杂质对照品市场非常混乱,大部分购买的杂质对照品都是经几手倒卖才到厂家手里,对照品塑源存在问题,谱图与赋值真实性也存在问题,请问对此引入的风险有何看法? 群友2:在购买对照品的时候,在COA的同时能否得到该合成方法的信息,这个在技术层面上是有难度的。没有哪个合成公司愿意提供产品合成路线给对方的。 群友3:好多杂质对照品本身不稳定,需要在-20℃保存,有可能在运输过程中就发生了变化,拿到的第一时间应该进行确认,遇到好几次这种情况。 吴春勇博士:在现有的条件下,购买的商业化对照品全部自己赋值,实践上还是存在相当的困难,成本上也没法控制。所以我个人观点:1)尽量选择知名公司;2)自己对风险进行评估,尤其是校正因子与各国药典不同,或者结构上与待测药物的生色团类似,分子量相当,校正因子却有显著不同。 【插话:知名公司依旧有风险或风险大】 是的,分享的那个案例,购买公司是业界相当知名的! 群友4:购买杂质时能同时获得合成信息的可能性非常小,最多提供四大谱(还不带解谱的),那就需要公司内部有比较强大的解谱能力,有碰到过解谱结果和供应商提供的不一致的情况,所以购买“商业化”的杂质对照风险是很大,市场良莠不齐,缺乏有效的管控。 群友5:我们碰到问题的那家公司就是业界知名对照品公司,也有出失误的概率。 刘国柱博士:另请教吴博士及大家一个问题,目前国内许多企业对于杂质对照品的结构确证,很多时候都只做了质谱与NMR氢谱与碳谱,不做二维;而事实上不做二维NMR谱,NMR信号是无法归属的,从而不足以确定杂质结构,有可能确证的结构是错的;请问这个问题大家如何看待? 吴春勇博士:我个人只要做结构确认,一定做二维。 刘国柱博士:那我和您观点一致,强烈呼吁大家做结构确证一定要做二维。 购买的杂质对照品一般只提供质谱与NMR氢谱与碳谱,不做二维与结构解析;在此习惯引导下,国内许多企业自已做杂质结构确证也只做个质谱与NMR氢谱与碳谱,个人观点这是存在风险的做法。 代孔恩(安士研发总监):法规有明确规定必须这么表征,很多标准品量很小,做全应该不容易。【插话:情况多,复杂,没法一刀切】 黄常康博士(南京百泽医药创始人):有些杂质是定向合成的,或者是有文献数据的。我觉得根据实际情况来判断需不需要。不用二维定不了结构的,该做就做,有些简单的杂质,其实氢谱已经足够了,质谱只是多一个证据。 自己做的话,还需要加上做结构确证的杂质的钱,很多时候会差很多。 群友6:对照品的检测分析,既要有普遍性的,也要特殊性的,这个普遍性与特殊性的界点怎么界定,很难有一个文件化的说法。 以上讨论内容来源: 新药仿药CMC实操讨论公众号
  • 化学药品研发中对照品(标准品)有关技术要求
    药物的质量研究与质量标准的制订是药物研发的主要内容之一,药品标准物质也是质量标准和质量研究中不可分割的一部分,是药品质量标准的物质基础。药品标准物质在新药研究中与产品定性、杂质控制及量值溯源密切相关,标准物质的运用贯穿于质量研究与质量标准的制订工作中。一、概述标准品、对照品系指用于药品鉴别、检查、含量测定的标准物质,即药品标准中使用的具有确定的特性或量值,用于对供试药品赋值、定性、评价测定方法或校准仪器设备的物质,其中标准品系指用于生物检定、抗生素或生化药品中含量或效价测定的标准物质。《药品注册管理办法》规定“中国药品生物制品检定所负责标定和管理国家标准物质”,“申请人在申请新药生产时,应当向中国药品生物制品检定所提供制备该药品标准物质的原材料,并报送有关标准物质的研究资料”。但在新药研究中,普遍存在对照品(标准品)的应用超前于中检所制备和标定的情况,鉴于新药研究的连续性以及标准物质在新药研究中涉及量值溯源、产品定性、杂质控制及其在药品质量控制中的重要性,标准物质的制备和标定与药品的质量研究、稳定性研究乃至药理毒理学研究中剂量的确定等临床前基础研究间存在密切关系,因此,药品对照品(标准品)的研究(制备与标定)也是药品审评的一项重要内容。二、对照品来源1、所用对照品(标准品)中检所已经发放提供,且使用方法相同时,应使用中检所提供的现行批号对照品(标准品),并提供其标签和使用说明书,说明其批号,不应使用其他来源者;如使用方法与说明书使用方法不同(如定性对照品用作定量用、效价测定用标准品用作理化测定法定量、UV法或容量法对照品用作色谱法定量等),应采用适当方法重新标定,并提供标定方法和数据;若色谱法含量测定用对照品用作UV法或容量法,定量用对照品用作定性等,则可直接应用,不必重新标定。2、申报临床研究时,如中检所尚无供应,为不影响注册进度,可先期与中检所接洽制备和标定,申报时提供标定报告、标签(应标明效价或含量、批号、使用效期)和使用说明书;也可与省所合作标定,申报时提供标准品或对照品研究资料,“说明其来源、理化常数、纯度、含量及其测定方法和数据”;标定有困难时,可使用国外药品管理当局或药典委员会发放的对照品(标准品)或国外制药企业的工作对照品(标准品),进行标准制订和其他基础性研究,但应提供其标签(应标明其含量)和使用说明书,能保证其量值溯源性;也可使用国外试剂公司(如sigma公司等)提供的对照品(标准品),但应提供试剂公司该批对照品(标准品)的检测报告(用作含量测定时,应有确定的含量数据),如为高纯度试剂,提供了国外试剂公司检测报告(用作含量测定时,应有确定的含量数据)时,也可使用,并应能保证其量值溯源性,但申请人应及时与中检所接洽对照品(标准品)的标定事宜,临床研究期间完成此工作。3、直接申报生产品种,如中检所尚无供应,可参照2中要求进行,并提供相应研究资料,但申请人在标准试行期间应与中检所接洽并完成的标定事宜。三、对照品(标准品)标定的技术要求1、创新药物应说明对照品(标准品)原料的制备路线、精制方法、质检报告,提供理化常数和纯度的测定数据及分析结果(包括相关图谱),提供标定方法的研究和验证资料(如与原料药质量研究项下相同,可不再提供)、含量测定数据及经统计分析得到的对照品(标准品)含量结果,并说明进行临床前药学研究、药理毒理学研究所用样品的含量是否用该批对照品(标准品)确定或可用该批对照品(标准品)进行量值溯源。纯度测定方法应选用色谱法,并采用两种以上不同分离机理或不同色谱条件并经验证的色谱方法相互验证比较,同时采用二极管阵列检测器或其它适宜方法检测HPLC法的色谱峰纯度,而后根据测定结果经统计分析确定对照品(标准品)原料的纯度。对于组份单一、纯度较高的药物,对照品(标准品)标定方法宜首选可进行等当量换算、精密度高、操作简便快速的容量法。可根据药物分子中所具有的官能团及其化学性质,选用不同的容量分析方法,但应符合如下条件:(1)反应按一个方向进行完全;(2)反应迅速,必要时可通过加热或加入催化剂等方法提高反应速度;(3)共存物不得干扰主药反应,或能用适当方法消除;(4)确定等当点的方法要简单、灵敏;(5)标化滴定液所用基准物质易得,并符合纯度高、组成恒定且与化学式符合、性质稳定(标定时不发生副反应)等要求。标定方法的选择要关注如下事项:(1)供试品的取用量应满足滴定精度的要求(消耗滴定液约20ml);(2)滴定终点的判断要明确,提供滴定曲线。如选用指示剂法,应考虑其变色敏锐,并用电位法校准其终点颜色;(3)为排除因加入其它试剂而混入杂质对测定结果的影响,或便于剩余滴定法的计算,可采用“将滴定的结果用空白试验校正”的办法;(4)要给出滴定度(采用四位有效数字)的推导过程。标定结果要根据3个以上实验室各不少于15组测定结果经统计分析,去除离群值和可疑值后的结果,并报告可信限。如该药物没有可进行等当量换算并符合要求的容量法时,可采用反复纯化的原料,色谱法确定纯度后扣除有关物质、炽灼残渣、水分和挥发溶剂等后的理论含量确定为标准品含量,以此为基准进行对照品(标准品)的换代和量值传递。用于抗生素微生物检定法的第一代基准标准品可参照上述方法标定,如为多组份抗生素,其组份比例应与拟上市产品组份比例一致或接近,或以其中某一组份纯品为基准标准品,但要注意标准品换代时量值传递的恒定。仅用于鉴别定性的化学对照品,注重其结构确证的研究资料,纯度和含量的要求一般可适当降低。杂质对照品,用作限度要求时,应提供其来源(合成路线)、结构确证的研究资料,应具备较高的纯度和含量,并提供纯度和含量的的测定结果,提供质量控制标准。2、其他类别药物用于抗生素微生物检定法的标准品须用上市国的国家标准品或原发厂的工作标准品为基准标准品进行标定。标定时采用的原料药应符合相应要求,并提供原料的制备路线、精制方法、质检报告,提供理化常数和纯度的测定数据及分析结果(包括相关图谱)。标定须用现行版中国药典附录收载的“抗生素微生物检定法”-三剂量法,并提供详细的方法学研究,包括检定菌和培养基的选择、剂量和剂距选择、缓冲液选择(如与质量研究项下相同,可不再提供)。每次标定结果均应照“生物检定统计法-量反应平行线测定法(3.3)”法进行可靠性测验及效价计算。对照品是质量标准的重要组成部分,从日常工作中发现,研发单位在对照品的制备、研究、标定、使用及保存过程中,仍存在部分问题。作为对照品,其研究工作的质量以及质量标准的高低直接影响新药研究的质量,对其提出技术要求是为了保证药品的质量控制与新药研究的结果准确有效,需重视起来。
  • 396万!甘肃省药品检验研究院2022年实验用试剂、耗材、对照品项目
    项目编号:2022zfcg00371项目名称:甘肃省药品检验研究院2022年实验用试剂、耗材、对照品项目预算金额:396.48(万元)最高限价:396.48(万元)采购需求:具体品目、技术参数和数量详见招标文件第五章 技术规格书合同履行期限:按合同约定执行本项目(是/否)接受联合体投标:否

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  • Sanotac致力于天然产物和中药对照品分离纯化、化学药物杂质对照品分离纯化应用的中压制备色谱、制备液相色谱技术的开发,系统软件符合“CFDA GXP和FDA 21CFR Part 11 ”法规要求,可实现多达 4元梯度洗脱和自动馏分收集,同时兼容ge AKTA、isco、biotage,buchi、biorad等中压分离纯化制备色谱的色谱柱和纯化柱,是一款高效、功能强大的模块化快速纯化制备液相色谱,在中药化学对照品分离纯化领域已经得到广泛应用:皂苷类对照品分离纯化 ,黄酮类对照品分离纯化,异黄酮类对照品分离纯化,香豆素类对照品分离纯化,色原酮类对照品分离纯化,生物碱类对照品分离纯化,酚酸类对照品分离纯化,萜类对照品分离纯化,蒽醌类对照品分离纯化,木脂素类对照品分离纯化。快速纯化制备液相色谱系统技术特点: *微处理器控制,高速双驱动和平行的泵头具有高速的腔室压力反馈,补偿再填充和溶剂压缩效果,实现在宽动态范围内获得精确高重现的流速。 *采用轮曲线补偿技术有效控制流量脉动,保证最低的基线噪声。 *多点流量校正曲线,保证在全流量范围内的流量精度。 *浮动柱塞设计,保证高压密封圈的使用寿命。 *10个用户程序,可实现流量和梯度编程。 *双波长检测、波长时间程序和停泵扫描——三种测定方式使得基线噪音和漂移降到最低,获得了最高的灵敏度和最低检测限,以及更宽的线性范围。对应各种测定需求,可以同时对主要成分、副产物和杂质进行可靠的定量。 *可快速便捷的更换灯和流通池,氘灯钨灯实现智能切换,确保正常运行时间的最大化。系统自动收集器特点: ?独创的运动原理,直线和旋转运动结合,可最迅速地到这任意收集位置 ?体积、时间、闺值、斜率组合多种收集模式,满足各种收集需要,可设 立普通模式、顺序收集和循环收集 ?精确的最小管路设计,减少样品在流通池后扩散带来的收集不准确 ?软件延迟体积的设置,使收集更精准,产品更纯净 ?采用高精度切瓶技术,废液通道独立,切换瓶过程无滴漏 ?分于动和自动两种收集方式,操作简单、方便 ?配套软件可以实时采集多路波长信号,收集信号可任意选择 ?实时显示设备状态、连接和收集瓶位置,收集直观,位置清晰 ?兼容多种收集容器,最多可允许收集瓶: 13--15mm 试管 120 支 ?具有收集容器自识别功能,可防止使用不同型号收集容器时安放错位 ?最大程度的空间利用,设备占用空间小,使用方便。 快速纯化制备液相色谱技术参数: 泵头316L不锈钢泵 高精度、低脉冲、耐腐蚀 (peek泵头可选)流速范围0.01-100.00ml/min(梯度)流速精度±0.5%压力范围0-20MPa压力脉动≤0.2MPa梯度类型台阶、线性变化梯度、可在线修改梯度和流速最小梯度调节1%检测器光源氘灯+钨灯(进口)检测波长190-800nm 全波长检测器 双波长同时检测波长精度±1nm吸光度范围0-2AU收集全自动收集器收集管架2×60支试管(Φ15mm*150mm试管) 其他规格可以选配收集模式普通模式(按时间收集、峰收集、阈值收集)、顺序收集、循环收集手动上样阀制备色谱阀(标配10ml定量环)上样方式固体上样或液体上样电源220V±10% 50Hz色谱软件控制通过sanochrom色谱软件控制泵、紫外、自动收集器等组件设置与运行控制界面图形界面,USB接口+RS-232可接口,采用基于Windows7/Windows 8/Windows 10的PC软件工作站,软件符合“CFDA GXP和FDA 21CFR Part 11 ”法规要求
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  • 蛋黄派变压吸附制氮机AYAN-150LB食品保鲜PSA变压吸附氮气发生器的性能怎么保证1.PSA变压吸附制氮机的核心部件是碳分子筛,应用碳分子筛对于工作环境的要求shi严苛的,像是空压机压缩空气的油、水、杂质在过滤的时候要保证洁净,而且净化系统的排污情况要定期做好检查,定期更换过滤干燥耗材,以免错过佳的保养期。制氮机碳分子筛里面要是进水进油,是会导致制氮机碳分子提前进入更换,这样的话是会增加设备使用成本。2.制氮机压紧装置是有区别的,现有气缸压紧,弹簧压紧,气囊压紧,虽说能够实时监控,可要是没有及时添加式会造成碳分子粉碎性损坏,这就会造成制氮机喷粉冒黑烟,这个时候是需要把整个系统更换碳分子筛。这个时候可以正常添加碳分子筛,更是会出现碳分子筛不停地喷出的现象,不然的话后果是会变得越来越严重,更是会让整个氮气管道系统里面都会留有制氮机碳分子筛粉末。3.要是制氮机系统结构有所损坏的话,往往是会让管道脱焊等让制氮机碳分子缺失,这个时候要对制氮机吸附塔结构气密性进行检测,然后找到脱焊的位置,其主要的一个目的是为了把全新碳分子筛更换。PSA变压吸附制氮机碳分子筛更换时间是看制氮机出口氮气实际氮气的纯度来决定,不管是什么故障都是会对制氮机氮气有着直接的影响。PSA制氮机的操作注意事项:1、吸附塔、缓冲罐、除油器、空气储罐均属Ⅰ类压力容器,应根据国家有关规定,定期加以检查。并接受当地锅检所的监督检查。2、在检修设备时,一定要将仪表气路和各管路的压力降为零后才能拆卸各元件。3、开流量调节阀时务必缓慢,否则,气体流速过快会损坏流量计。4、详细阅读冷干机、过滤器、流量计、氮气分析仪、调节阀、调压阀等配套设备和仪器的使用说明书,正确使用,严格按照使用说明书的要求进行维护保养。应清楚有关注意事项。5、本机运行期间须有人值班,每半小时检查一遍仪表读数是否正常,有无报警现象,并做好日志记录。若有报警,必须及时检修。
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  • 德国皇家微生物快速检测系统德国皇家微生物快速检测系统RVLM德国RBG公司荣誉出品,RVLM微生物快速检测系统的分析法已通过ISO 16140:2003 食品和动物饲料的微生物学-代替法的验证协议全球最高品质的微生物检测系统RVLM 可完全取代传统微生物实验室的高科技结晶.德国皇家微生物快速检测系统RVLM主要特点:1)可检测固态、液态、表面、膏状、浆状样本;2)样本在检测时无需任何的前处理过程,直接丢入摇摇瓶即可;3)检测样本只需1ml/1g;同一温度下可同时检测8个样品;4)灵敏度高达可检测到1目标微生物;特异性高达99.999%;5)简单三个操作步骤,傻瓜型,无需专业操作人员;6)仪器便携式,可直接连接电脑出定量分析检测报告,并可随时随地进行检测、100%定量分析。检测原理:集传统检验方法优点于一身:-培养皿法-酶法(&beta -葡萄糖苷酸酶分析)-免疫法(抗原搜寻)-基因法(基因搜寻)检测范围:活菌总数 大肠菌群 大肠杆菌 肠道杆菌科 金黄色葡萄球菌 绿脓杆菌 沙门氏菌 李斯特菌 肠球菌 亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌 产气荚膜梭菌 霉菌(曲霉属真菌、曲霉菌) 酵母菌。 以后还有陆续有其他微生物菌种的检测瓶相继面世。包括军团菌等应用范围:卫生控制:-食品(HACCP)-厨房、工具、表面(HACCP)-水质-(CDC)疾病控制、进出口检验检疫-药品及化妆品与我们的生活息息相关,例如:咖啡馆、餐厅水 分析实验室和HACCP诊断农产品及相关加工公司药厂、药房、化妆品厂环境监测机构水配送公司消费者保护团体、工商管理机构室内空调调节公司源检测、制水厂 检验样本无需任何前处理-液态样本,固态样本和表面样本均无需前处理定性和定量分析-搭配检测机:100%的定量分析-肉眼判读:定性或半定量分析简单便捷-简单的三个步骤得到检测结果检验迅速-是传统检验方法速度的2~5倍高灵敏性-可以检测到1目标微生物(理论极值)高特异性-特异性高达99.999%(理论极值)检测瓶就是实验室-微生物检测瓶随时可用-未受过严格专业训练的检测人员也可随时随地进行检测使用后安全丢弃-和过期药物同样处理微生物快速诊断 RVL@产品 Q&A 1. 微生物检测瓶除可以检测活菌外,死菌可以检测么? 答:不能检测死菌。 2. 微生物检测瓶可以检测厌氧菌么? 答:检测瓶的检测范围即包括厌氧菌(亚硫酸盐梭状芽胞杆菌 Sulphite reducing Clostridia,产气荚膜杆菌 Clostridium perfrigens),也包括需氧菌。 检测不同种微类生物的检测瓶中试剂不同。对于厌氧菌,我们有特殊的试剂,如检测产气荚膜杆菌 Clostridium perfrigens。 3. 检测瓶的检测原理都分别用到了哪些检测方法? 答:培养皿法、酶法、免疫法、基因法。 4. 对于第 3 题,你能简要叙述这些方法的优劣势么? 答:与传统的培养基法、胶体金、酶免法和 PCR 法不同,德国皇家微生物检测仪是多种方法的集合。单独使用一种检测方法都有自己的缺点:比如, PCR 法需要专业技术人员和昂贵设备; 培养基法操作复杂; 胶体金法灵敏度低; 酶免法特异性捕捉不充分。 德国皇家微生物检测瓶快速检测系列产品是以上多种方法的综合运用,吸收了每种方法的优点,弥补了各种方法的不足。5. 用微生物检测瓶进行微生物检测时,第一步是先放样本还是无菌水? 答:都可以。 6. 对样本进行微生物接种时,需要在无菌环境下进行么? 答:检测瓶是通过捕捉特异性,结合多种检测法进行分析。无菌环境与否均可(临检的场所大都是非无菌环境)。 7. 检测瓶可以检测表面样本和固态样本么? 答:可以检测固态、液态、表面样本(用所配棉棒沾湿无菌水后涂抹表面)。纸浆等膏状、糊状、粘稠状昂本都可以检测。 8. 检测瓶在检测固态样本时需要对进行研磨、稀释等前处理过程么? 答:直接将样本放入检测瓶,无需任何前处理。 9. 每次检测的无菌水用量是多少? 答:一般是 11ml。如果是检测液态样本或水样本,建议加样 1ml,加无菌水 10ml。 10. 放入样本和无菌水后,&ldquo 摇匀使其充分溶解和混合&rdquo 这一操作步骤,无论定性分析还是定量分析,都是必要的步骤么? 答:是的,摇匀无论是定性还是定量分析都是必要步骤。 11. 不同的微生物对应的孵育温度是一样的么?请举例说明。 答:不一样。37 摄氏度居多:活菌总数、沙门氏菌、李斯特菌等,大肠杆菌 44 摄氏度等,详细请参考对照表。 12. 若是检测冷菜或者冰欺凌这样的样本,孵育是否应该低温进行? 答:对检测样本自身的温度没有限制,检测样本中微生物,请严格遵照所检测微生物对应的孵育温度,依然根据对照表。 13. 如果想加快检测时间,孵育温度可以调至高于所检测微生物对应的孵育温度? 答:不可以,严格遵照对照表。 14. 操作手册规定放入的样本量为多少? 答:0.1g‐1.0g 或 0.1ml‐1.0ml。 15. 若放入的样本量高于规定的样本量,检测结果会不同,或者检测结果(定量时)增加么? 答:样本量多一些或少一些,定量分析结果不会有变化。 原因:传统的微生物学检测方法,包括官方参考方法,即基于固体选择性培养基的菌落计数法内在的统计分散度(统计名词,也称为统计变异,是变量或概率分布蔓延,常见的例子是方差,标准差和四分位距。)大于 50%。很多实验室已经证实皇家生物检测法与其他检测方法比统计分散度低,可信度高。但不管怎样,25‐30%的统计分散度还是有的。另外,由采样产生的统计分散度同样应该考虑在内,尤其是微生物经常容易繁殖的固态的肉制品类。 因此,加样是 0.5g 或 1.5g 所得的结果在统计上是等价的(和其他任何方法获得的结果相等)。16. 对于面粉这类低密度的散装样本,可以照常检测么? 答:可以。 17. 对于酱油这样的深色样本,会影响定性检测结果的判读么?您有什么好的建议? 答:如果搭配检测仪进行定量分析,不存在这个问题;如果只是通过肉眼观察变色进行定性分析,深色样本如果担心肉眼不能够清晰的辨认,建议进行稀释后再进行检测。还记得第 15 题得答案么?加样是 0.5g 或 1.5g 所得的结果在统计上是等价的和其他任何方法获得的结果相等)。稀释同样的道理。 18. 如果是检测水样,还需要加入无菌水么?加多少? 答:建议加水样 1ml,无菌水 10ml。 19. 不同的微生物对应的开始颜色和呈阳性的颜色都相同么?请举例说明。 答:不同。 例如,沙门氏菌孵育 10 分钟左右出现的开始颜色为红色,阳性颜色为黄色;李斯特菌,开始颜色为蓝色,阳性颜色为黄色。具体请参考对照表。20.微生物检测仪兼备孵育机的功能么? 答:是的。将检测瓶充分摇匀后立即放入检测仪,在软件上进行检测菌类设置后。检测仪会自动进行孵育,并自动给出定量分析检测报告。 21. 微生物检测仪兼备振荡器的功能么? 答:不具备。需用手用力摇 2‐3 分钟,或振荡器摇 20 秒左右,直至充分溶解或混合。 22. 微生物检测仪的判读原理是什么? 答:微生物检测仪是一款精密的光学判读仪。通过光学原理精密探测检测瓶中的颜色变化,并给出精确的定量分析检测报告。 23. 微生物检测仪是外接电源,还是自带充电电池? 答:两者都有。电池是标准的笔记本电脑电池,更换、维修方便。 24. 微生物检测仪可以同时、独立地检测多少个检测瓶? 答:8 个。同时、独立的探测,并分别给出定量分析报告。 25. 微生物检测仪定量分析,需要在电脑上安装分析软件么? 答:需要按照配套分析软件。 26. 怎样的计算机操作系统对该分析软件兼容? 答:XP, Vista, Windows 7 27. 如果检测仪是初次开机,接通电源后需要稍等多少时间再进行下一步操作? 答:若初次开机,开机后停留 40 秒左右继续操作为宜。 28. 检测仪进行定量分析时,充分混合后的检测瓶是应该立即放入检测仪,还是稍等片刻后再放入? 答:充分混合后立即放入检测仪。 29. 检测瓶放入检测仪后,在检测仪分析软件点击开始,软件界面上对应检测孔的灯会变成什么颜色? 答:在所检测检测瓶对应的操作界面上点击&ldquo Start&rdquo (开始),对应孔的指示灯由绿色变为红色。表明检测开始并进行中。 30. 当检测结束后,分析软件界面对应孔的灯光会恢复为什么颜色,说明检测结束,可以放入新样本? 答:在检测进行时,指示灯为红色。当检测结束后,指示灯变为绿色。此时在对应的检测仪检测孔放入新的检测瓶开始下一轮检测是可以的。检测时间由细菌的存在量决定(当微生物含量较高时),或由对照表对应的检测时长决定(当微生物含量很低时,应超过对照表中检测 1CFU 对应的检测时间)。 31. 微生物检测瓶的分析时间和检测瓶中微生物含量之间是什么关系? 答:反比关系。即微生物含量越多,对应的检测时间越短;微生物含量越少,对应的检测时间越长。 如果样本中微生物含量过高,几分钟甚至几秒钟内检测仪的定量分析结果就会显著变动;如果微生物含量很低,(由于 RVLM 是非常精密灵敏的仪器)有经验的使用中可以通过几小时甚至几分钟的数据变化初步判断微生物目标含量是否达到规定要求。 32. 分析检测前是否应该有明确的实验目的以确定你要检测的微生物含量(根据国家标准规定微生物的存在量。)? 答:这样是最好的。 例如,根据国家 GB 标准,或根据国际 EC 标准等,都有明确(或部分明确)地注明微生物在不同家禽、畜牧物种中的允许最大存在量。具体地说,在进行微生物检测时,我们首先要明确检测目的。如、国际 EC 2073:2005标准中规定,大肠杆菌在鲜肉中允许的最大存在量为 CFU 10^2/g,即每克鲜肉中大肠杆菌的含量不允许超过 CFU 10^2。此时我们根据对招表,找到大肠杆菌所在列,查 log CFU 10^2=2,即在大肠杆菌行中找到数字 2 所对应第一列的数字为 14。无论是肉眼进行定性分析,还是检测仪进行定量分析,要检测样本中大肠杆菌含量是否超过 CFU 10^2,最长在 14 小时即可得到严格精准的分析结果。 如果是检测瓶进行定量分析,有经验的实验员会在很短时间内(譬如十几分钟)根据定量分析数据的动态变化情况,初步判断出检测瓶中的微生物含量。 33. 明确要检测微生物含量的目的是什么,对照表起到什么作用? 答:是确定所检测微生物对应的孵育温度、开始颜色、分析时间、阳性颜色的标准对照的依据。具体的使用方法请参考上一题答案。 34. 什么是 CFU? 答:colony‐forming unit,菌落形成单位。 经培养所得菌簇形成单位的英文缩写。 细菌(可见)和真菌的测量单位。CFU:colony‐forming unit,菌落形成单位,将稀释后的一定量的菌液通过浇注或涂布的方法,让其内的微生物单细胞一一分散在琼脂平板上,待培养后,每一活细胞就形成一个菌落。与常规利用显微镜对微生物数量进行测量不同,主要是对可见(即多数情况下形成菌落)的细菌数量进行测量的单位。 意思就是每毫升菌液中含有多少单细胞! 传统上就叫&ldquo 个&rdquo 。但是,我们知道,一个菌落并不一定是一个细菌所生成,也可能是由一簇细菌(一个细菌团)所生成,这时候再叫&ldquo 个&rdquo 就不太准确啦,准确的叫法就是&ldquo 菌落形成单位&rdquo ,英文缩写&ldquo CFU&rdquo 。就像&ldquo 公斤&rdquo 和&ldquo 千克&rdquo ,只是叫法不同,数量上没有变化。 CFU 代表&ldquo colony forming units&rdquo 。CFU/mL 指的是每毫升样品中含有的细菌群落总数,也有用 CFU/g 即对应固体培养基。 35. 假如我要检测样本中大肠菌群的菌落含量不得超过 106CFU/g 或 106CFU/ml, 用肉眼观察瓶中颜色变化进行定性分析,请对照&ldquo 孵育温度和比色对照表&rdquo 详细叙述检测步骤。 答:第一步:放入样本 放入所要检测的样本(0.1‐1.0g,或 0.1‐1.0ml),加入 11ml 无菌水(根据检测物情况,若为液体,建议加样 1ml,加无菌水 10ml。差别不大),盖紧瓶盖。 第二步:摇动瓶子直到溶剂充分溶解或混合。 如果用手需有力摇 2‐3 分钟左右;或用振荡器摇,需时 20 秒左右。 第三步:在适当时间判读检测结果 (1)若肉眼定性分析。根据对照表确定大肠菌群对应的孵育温度、开始颜色、检测时间、阳性颜色等信息。 孵育温度:根据对照表为 37℃; 开始颜色:即摇匀后放入 37℃恒温箱孵育 10 分钟左右会呈现的颜色。根据对照表为红色; 检测时间:我们要检测标准为大肠菌群含量不超过 106CFU/g 或 106CFU/ml。根据对照表,对应列log 106=6,找数字 6 对应行的数字为 6,即检测时间为 6 小时。即,观察时间确定为 6 小时。 阳性颜色:根据对照表,大肠菌群的阳性颜色为黄色。 确定了以下信息后,我们把充分混合后的检测瓶放入 37℃恒温箱,这样一直放置。孵育 10 分钟左右,我们观察会发现检测瓶会呈现检测大肠菌群对应的开始颜色&mdash &mdash 红色。继续放置,到 6 个小时的时候进行观察,如果颜色变为黄色,说明样本中大肠菌群含量超过 106CFU/g 或 106CFU/ml,样本为不合格品;若没有变为黄色,而是始终保持开始颜色红色,或其他中间颜色,说明样本中大肠菌群含量未超过 106CFU/g 或 106CFU/ml,样本为合格品。 (2)若检测仪进行定量分析 此步骤请参见下一题。 第四步:无菌处理 最后别忘记按下检测瓶的瓶盖上方对检测瓶进行灭菌处理。按下瓶盖后摇一摇,好了,可以安全丢弃了。 注意:在进行实验操作时,不要碰到检测瓶的瓶盖顶部,以免在不当的时候进行了无菌处理,影响试验结果。 36. 若第 34 题搭配检测仪进行精确的定量分析,请详述操作步骤。 答:(2)若检测仪进行定量分析 将充分混合后的检测瓶立即放入检测仪。 启动检测仪软件,点击&ldquo Station&rdquo (状态)录入相关信息(包括:检验员姓名、检测、检测样本所属客户、检测时间等信息);在软件操作界面&ldquo analysis type&rdquo (检测种类)下拉菜单中勾选所检测的微生物种类,点击 ok,点击开始,指示灯变红, 开始进入分析状态。观察检测仪的定量分析数据变化,进行判断。 37. 为什么在检测结束之前,不能按下检测瓶的瓶盖? 答:无菌处理。瓶盖中还有无菌处理物质,按下瓶盖,瓶盖中的无菌处理物进入瓶内,与瓶内溶剂进行反应,完成无菌处理。因此,实验过程中请不要轻易触碰检测瓶的瓶盖。 技术人员选答题,销售人员必答题:1. 检测瓶可以检测多少种微生物,分别是什么? 答:活菌总数、大肠菌群、大肠杆菌、肠道杆菌科、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、沙门氏菌、李斯特菌、肠球菌、亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌、产气荚膜梭菌、曲霉属真菌、曲霉菌、酵母菌。 以后还有陆续有其他微生物菌种的检测瓶相继面世。包括军团菌等。 2. 检测瓶在检测大肠杆菌时,可以检测到所有的大肠杆菌菌株么(包括目前流行的 EHEC?) 答:是的,可以检测到全部的大肠杆菌菌株,包括 EHEC 肠出血性大肠杆菌(E.coli O104, O111, O157 等) 3. 检测瓶的应用范围有哪些? 答:卫生控制:食品(HACCP),厨房、工具、表面(HACCP),水质,(CDC)疾病控制、进出口检验检疫、药品及化妆品。 与我们生活息息相关的:环境监测机构,农产品及相关加工公司,水源检测和制水厂,水配送公司,药厂、药房、化妆品厂,分析实验室和 HACCP 诊断,奶制品厂,咖啡馆、餐厅,消费者保护团体、工商管理机构,室内空调调节公司,尤其能应用于军事、大型展会等的食品快速检测。 4. 你认为大肠杆菌检测瓶、李斯特菌检测瓶、沙门氏菌检测瓶除了是用于食品安全检测外,适用于医疗么? 答:大肠杆菌(EHEC)、李斯特菌、沙门氏菌,这三款检测瓶可用于体外临床检测。 Royal 微生物检测瓶系列的全球定位依然是食品安全。在欧洲,对人体进行微生物的临床体外检测是非常少的,欧洲的各方面安全控制的很好。然而,在发展中国家,以上三款微生物的人体体外临床检测经常发生。而以上三款检测瓶用于体外临床检测的安全性和准确度都可以保证。 4 合 1 试纸片和检测瓶市场定位的区别 1)4 合 1 试纸片和检测瓶比较  4 合 1 试纸片配合其分析仪,一台分析仪可以同时检测 48 个试纸片。因此,从经济成本的角度考量,最好一开机就是 48 片同时检查。对于医院,攒够 48个粪便样本后,一次性进行分析。 检测瓶,一个样本就可以进行检查。而且更大的优势在于,这款产品会非常受医生的欢迎。因为医生可以不用接触样本,这是目前大多数的医院检测无法做到的。把瓶子给病人,让病人自己将粪便样本放入后送回给医生。医生拿到检测瓶,在医院的振荡器上摇匀后,放入孵育机,等待结果判读即可。 2)检测瓶与医院目前传统检测法的比较  目前医院的检测方式依然是培养皿法居多。这种方法最令医生反感的地方是医生要接触样本。如果医生处于怀孕期,接触到李斯特菌的后果就是流产。如果检测台没有处理干净,也容易导致微生物的传播。  检测瓶,医生完全不用接触样本。样本放入检测瓶的的这个过程交给病人在卫生间去操作就可以。医生要做的就是简单的摇匀和放入孵育器孵育(振荡器和孵育器都是医院的常规设备)。 5. 无论固态、液态还是表面样本,在检测时是否都无需进行前处理? 答:是的 6. 检测仪的特异性是多少? 答:99.999%(理论极限值) 7. 检测仪的灵敏度是多少? 答:可以检测到 1 个活菌的理论极限值。 8. 做定性分析时,检测需要几步,分别是什么? 答:三步:加样;摇动瓶子直到充分溶解和混合;在适当时间判读结果(根据对照表)。最后不要忘记按下瓶盖上方进行无菌处理。 9. 做定量分析时,检测需要几步,分别是什么? 答:同上。具体请参考检测仪操作文档。 10. 检测后按下检测瓶瓶盖的目的是什么? 答:无菌处理,请参考上第 45 题。
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