女贞子对照药材

高效液相色谱法检测女贞子药材中女贞苷含量 药材女贞子为木樨科植物，具有滋肝肾、明目黑发，也可治疗眩晕耳鸣、腰膝酸软等症状。其中女贞苷是女贞子中重要成分之一。相应饮片和药材都要求检测女贞苷含量。 以下的方法采用的是高效液相色谱法，检测的是女贞子药材中女贞苷含量。实验部分原理 取适量样品粉碎、溶解、超声提取、定容、滤过，由进样系统进样，色谱柱分离，紫外检测器检测，保留时间定性，峰面积定量计算。仪器及试剂 仪器：高效液相色谱仪（紫外检测器），超声波清洗仪，粉碎设备，三号筛，电子天平，具塞锥形瓶，溶解过滤器，针筒式过滤器 试剂：甲醇（色谱纯），超纯水，稀乙醇样品制备 对照品溶液的制备：精密称取女贞苷对照品12.5mg于50ml容量瓶中，加甲醇制成0.25mg/ml女贞苷溶液，备用。 供试品溶液的制备：取女贞子药材样品适量，充分粉碎后过三号筛，准确称取过筛后的粉末0.5g，置于具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，称定重量，超声波超声30min，待样品完全溶解后，放冷，再称定重量，用稀乙醇补充减少的重量，摇匀，微膜滤过，待测。色谱条件检测器：紫外检测器色谱柱：C18，4.6 X 250mm，5um波长：224nm流动相：甲醇：水=40：60（V:V）流速：1.0ml/min柱温：30℃进样量：5ul对照品溶液色谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410191706_518997_2498430_3.png供试品溶液色谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410191706_518998_2498430_3.png 看看这效果，很羡慕吧，峰形、分离度都很完美吧。 该方法检测女贞子药材中女贞苷含量操作简单、方便，实验快速，结果准确、可靠，是一种坚持女贞子的好方法。 注意的是样品前处理时如果取样量较大或样品粉碎的不够充分，样品提取时可能不能提取完全。那样的话一是样品量要适中，不要太多；二是样品粉碎的要尽量充分；三是超声波提取时间要适当长一些，或提取时温度湿度高一点，或分成几次或几批提取等。 另外这个样品杂质和目标物干扰物都较少，检测时可以适当考虑下缩短检测时间的问题，比如适当增加流动相中甲醇含量，适当升高色谱柱温度控制等。下面我们就看看流动相甲醇：水=50:50，柱温40℃的效果吧。对照品溶液色谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410191706_518999_2498430_3.png供试品溶液色谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410191706_519000_2498430_3.png 效果很好吧，这种方法我们在检测时是不是可以考虑下。哈哈，经验之谈，祝大家工作顺利，天天开心！

作者：丁雪（第二军医大学）摘要：女贞子为传统补益类中药，应用已有数千年历史，具有广泛的临床应用基础。制定、完善和建立现代中药质量标准评价体系，使中药具备国际认可的标准规范是中药现代化的战略目标之一。用代表中药药效学物质基础的化合物群所表征的指纹图谱来综合评价中药质量，符合中医理论和中药化学成分的特点，能较全面地反映中药质量的本来面貌，并为国际认可。本文联用几种现代检测分析技术，如 HPLC/UV 和 UPLC-ESI-TOF/MS，建立起女贞子药材及其复方制剂的指纹图谱，并分离和鉴别重要的活性成分，将化学信息学和药效学相结合，并进行质量评价和相关研究。第一部分 女贞子药材脂溶性成分和水溶性成分的提取分离目的：提取女贞子不同部位群，保留不同部位的活性成分。方法：比较了 100％、75％、50％不同比例的乙醇溶液和不同的提取方法，超声提取法和冷浸提取法；再按照极性差异选用不同的萃取剂分层萃取；将提取样品经合适的 HPLC 条件分析测定，比较共有峰面积和数目，确定合适的前处理方案。结果：确立了合适的对脂溶性成分和水溶性成分的提取方法：以 75％的乙醇溶液超声提取 2 次，每次 30min；再分别以氯仿和乙酸乙酯为萃取剂分层萃取，挥去萃取剂后，即得到脂溶性成分和水溶性成分。第二部分 女贞子药材 HPLC 指纹图谱研究目的：建立 HPLC 分析方法，建立女贞子药材的 HPLC 指纹图谱，评价不同产地女贞子药材的质量。方法：采用高效液相色谱法以 Platisil（铂金）C18ODS (250×4.6mm，5μm)为色谱柱，流动相为水和乙腈，梯度洗脱，脂溶性成分的检测波长为 240nm，洗脱程序为：t:0-15-23-33-80min，A％（乙腈比例）:15％-30％-40％-90％-100％;水溶性成分的检测波长为 220nm，洗脱程序为：t：0-25-35-40-60min，A％（乙腈比例）：20％-30％-60％-90％-100％，流速均为 1.0ml·min，柱温为 25℃。结果：用梯度洗脱得到的色谱图各色谱峰分离效果较好，达到指纹图谱要求。为更好地控制女贞子的内在质量提供了可靠的分析方法。10 个产地的相似度差异较大，不同产地的女贞子药材水溶性成分指纹图谱相似度均在 0.85 以上，而脂溶性成分指纹图谱相似度则在 0.45～0.93 不等，表明不同产地的女贞子药材之间存在较大差异，而其差异主要体现在脂溶性成分上。运用聚类分析证明产地来源是影响女贞子质量差异的重要因素。其中，江苏地区 GAP 基地的女贞子药材有效成分含量较高，说明在我国推行 GAP 制度对保障中药质量十分重要。第三部分 女贞子药材化学成分UPLC-ESI-TOF/MS 定性目的：运用 UPLC-ESI-TOF/MS 技术对中药材女