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[align=center][b][size=18px]空球藻的形态学和生活史观察[/size][/b][/align][align=left] 空球藻属绿藻门绿藻纲团藻目团藻科,由16、32或64个(最多不超过256个)衣藻型细胞排列成[b]中空[/b]的球形。群体内细胞形状相同,球形、卵形,前端略尖尾部钝圆类似漏斗形状也很常见。橘红色眼点位于细胞外侧前端,中央伸两条等长鞭毛,群体自旋式运动。细胞位于群体胶被边缘,排列规则,彼此之间有一定距离,由微细的原生质丝相连。[/align][align=center][/align][align=center][img=,350,350]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/08/202008241437413804_321_3247383_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/align][align=left] 空球藻群体遇不良环境时常停止运动,分泌大量不分层胶质,进入胶群体时期。当环境适宜,胶群体的细胞长出鞭毛,离开胶被,恢复到运动状态。还有一些种类可形成休眠孢子、厚壁孢子或者静孢子。[/align][align=left] 适宜条件下,无性繁殖是空球藻主要繁殖方式,由群体内所有细胞或部分细胞参加,母细胞连续分裂,一分为二、二分为四,产生2个、4个、8个或者16个子细胞,分裂面与群里表面垂直。分裂前期母细胞鞭毛脱落,群体运动能力下降。似亲群体形成后子细胞长出鞭毛,开始原位活动。连接群体子细胞的原生质丝溶解或断裂,字体离开原来固定位置。后期胶被溶解或破裂,子体释放,各自形成新的个体。 [/align][align=left][/align][align=left] [img=,300,400]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/08/202008241444156102_5654_3247383_3.jpg!w690x920.jpg[/img][/align][align=left][/align][align=left] [/align]
ELISA酶联免疫法因其灵敏度高,特异性好的有点被广泛运用与各种实验。在ELISA试剂盒实验虽然时间短,但是过程十分复杂,且实验中的每个步骤都需要实验人员百分之百的投入。稍有疏忽很可能就会导致实验结果背景值过高、白板等现象。为了能让大家在ELISA实验前有个充分的了解,今天要为大家讲解的是ELISA试剂盒实验操作之标本采集及贮存。血清标本宜在新鲜时检测,严重溶血标本禁用。一般说来,在 5 天内测定的血清标本可放置于4℃,标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合,使间接法的 试剂 本底加深。超过一周测定的需-20℃保存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使 抗体 效价跌落,所以测 抗体 的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存;最好使用一次性玻璃试管或真空管采血管;并使用非抗凝标本,肝素抗凝血浆会增加OD值,可能与高浓度肝素具有强大的负电荷能吸附酶标记物不易洗脱有关;EDTA、酶抑制剂(如NaN3)可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性;血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清,或标本采集时用带分离胶的采血管或于采血管中加入适当的促凝剂。严重溶血,以 HRP 为标记的ELISA 测定中,残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性,催化底物显色造成假阳性; 混有红细胞的血清 易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净;如有 细菌污染 ,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应; 标本凝固不全 ,有时为了争取时间快速检测,常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清,使血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果; 采血试管洗涤不彻底 、反复使用易交叉污染; 塑料试管能吸附抗原物质 ,样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。所以为了保证我们实验的结果,在标本采集和贮存的时候我们需要保证其不被污染不受到破坏。
1、 干制标本植物腊叶标本 植物腊叶标本要保管在密封干燥的腊叶标本橱内新制标本 因为常有害虫和虫卵寄生,入橱最好用 药消毒。就是用二硫化碳约0。5KG盛在容器内,放入杀虫箱(1。7平方米)中,两日后开箱,使毒气散尽,拿出标本。二硫化碳气体比空氧重。药品应放在标本上面。或者把未上台纸的标本放入0。5%升汞酒精(工业用75%)溶液中浸一次,制好后入橱。升汞)有毒,并不能与金属起化学作用,切忌使用金属器械。用时要带橡皮手套,事后用肥皂北朝洗手,标本用什么药品杀虫,应在台纸上注明,以防中毒。腊叶标本橱内要放樟脑精以防虫害。分类 入橱标本要进行分类才便于利用。植物根、茎、叶花果实的干制标本,可按课本上的次序排列。分类标本在按照分类系统,分科排列。目前标本室常用的分类系统有恩格斯(AENGLER)、克朗奎(A。CRONGUIST)等分类系统。橱门上应有分科目录表,橱内要有分科标签,便于查找。维修 如果标本中的叶片脱落,可用毛笔刷胶水(植物胶)在叶背面,按照自然姿态贴好,阴干。枝茎断裂的要用醋酸乙烯胶粘贴,再贴上胶水纸。发霉和虫蛀的标本,用毛笔蘸95%酒精或10%福尔马林液洗刷,干后用毛笔刷除霉斑。台纸和盖纸破损的要调换新的。 移动标本,手脚要轻,不要翻转颠倒。入橱标本,不要太挤。标本外借,要多用填纸包装,注意防潮。植物种子标本 要选择典型无病虫害的新种子,清除杂质后晒干,装入种子瓶中,并贴上标签,经常检查,以防发霉虫蛀。昆虫标本和植物病虫害等盒装标本 大型昆虫的腹部和柔软部分以及烘干的幼虫,都容易发霉。盒装的昆虫生活史、病虫害等标本里的安瓿容易破碎和标签脱落,可将损坏部分掉换℃℃。植物损坏部分可按照维修腊叶标本方法维修。盒装标本内应放入樟脑、硅胶等防虫防潮药品。其它 化石标本要防止震动和碰撞,损坏时用石膏填补和聚醋酸乙烯胶(乳白胶水)粘接。鸟卵标本卵壳损坏,可分块取下粘贴。循环系统干制标本是用赛璐珞作填充物的,脆性大,要防震,如果损坏,可以用毛笔蘸丙酮液粘接。浸制标本和材料浸制标本和实验材料都应有标签,标签要贴实,外面涂蜡,按编号平稳地放入生物橱中保存。标本瓶不能震动,以免打碎,并且不宜放在有阳光直接照射、高温或0℃以下的地放,以防封蜡熔化和玻璃瓶冻裂。植物实验材料也可以不用药液浸制,标本瓶底放些浸有20%福尔马林的药棉,上盖白纸,再封口材料多时可以在塑料袋里放少量20%福尔马林液体,再放入实验材料,扎紧袋口。也能长期保存。要用登记簿按记号记下每瓶标本的制作日期和药液配方,便于日后检查处理。原色标本要放在有板门的生物橱内,防止因阳光照射而退色。溶液发黄浑浊和标本露出液面,要及时更换和补充新液(加10%福尔马林等)。如果保存的实验材料将要变质,可增加保存液浓度。浸制透明标本会产生许多气泡,可用注射器抽出。标本上贴字号等如果落下,可用药棉吸干脱落部位,用明胶液(明胶克,浸在50毫升水中泡一天后,再隔水加热到溶化)粘贴。如果固定标本的玻璃板打碎,用钻石刀划好玻璃,用砂轮奖四边磨平,重新固定放入。加换溶液和封瓶宜在夏季进行,因为夏季瓶盖容易开启,转动盖上的玻璃球,然后拨出瓶盖。也可用刀尖除去封蜡后开瓶。剥制标本剥制标本应按号放在生物橱中,过大的要自制玻璃橱箱存放,要防潮、防腐、防尘、防虫、防鼠。橱内用硅胶或生石灰(用两层纱布包好)作干燥剂,用樟脑制剂驱虫防霉(用纱布包好)。剥制标本不能长期裸露放在橱顶上积尘。新剥制的未干标本不要放入生物橱。可以用烟熏剂消灭害虫,在春季,把标本放在消毒箱里,箱里放碟子,上面放碗,碗里放硫磺,碗上放铁片条,点着硫磺,密封箱盖。两日后打开箱盖,拿出标本放入生物橱中保存。脊椎动物标本如果损坏,要选用种类、性别、大小相似的动物,切下损坏的相应部分,用大头针固定,涂上40%福尔马林液防腐,干后作修补用材料。修补后再整形涂色。如鱼的鳍条、爬行动物的趾骨等断裂,可切成两个斜面,用聚醋酸乙烯胶帖。大型哺乳动物缺损可用油灰填补,再拔下腋窝、腹部等处毛,用聚醋酸乙烯胶帖在油灰上。