液相色谱微量

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液相色谱微量相关的厂商

  • 深圳通瑞色谱仪器有限公司
    深圳通瑞色谱仪器有限公司是一家专业从事液相色谱仪研发、设计、生产与销售的高科技企业， 开发了具有先进水平的GI-3000液相色谱系统、GI-3000XY血药浓度分析仪、GI-5200多功能离子色谱仪系统，产品已在医疗、食品、制药、环境环保、科研、高校科研实训、生物、石油化工等多行业领域使用。通瑞仪器注重于技术创新，紧盯国际新技术，推出了高性能双直线电机驱动精密滚珠丝杆的恒流泵输液系统（第三代技术，与waters,2695、安捷伦1260方案相同），达到国际先进技术水平。目前研发完成GI-3000XY血药浓度分析仪（全智能二维液相色谱系统），系统集成了，医院多科室上百种药物成分及其浓度的测定方法，为儿童的健康成长发育以及需要长期治疗、精准治疗的大病与慢性病患者，制定精准医疗方案，提供了科学支持，本系统也适用于常见药物的临床药物分析研究。 公司主要产品：GI-3000高效液相色谱仪系列产品，研发完成四元低压梯度液相色谱仪，目前是国率先家采用直线电机驱动滚珠丝杆的恒流泵输液系统（同waters2695方案），技术先进，具有完全自主知识产权。
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  • 北京英伟达科技有限公司 铜牌2年
    北京英伟达科技有限公司作为专业的实验仪器设备与耗材供应商，一直秉承“客户为本”的宗旨，为全国的用户提供优质的产品及专业及时的技术服务。公司员工主要由多年从事检测分析和技术服务的专业工程师组成，在多年的客户服务过程中，积累了丰富的专业技能和经验，可提供完整专业的售前技术咨询、售后安装调试、用户培训及维修等技术服务。专业代理销售以下产品： - 德国FUNKE-GERBER：牛奶冰点仪、牛奶成份分析仪、啤酒成份分析仪、盖勃乳脂离心机、菌落计数器等 - 保加利亚SCOPE ELECTRIC：牛奶成份分析仪系列产品 - 韩国AUTOCLAVE：超临界CO2萃取仪、超临界造粒 / 微粒化、实验室高压均质机（纳米分散） - 德国SPECTRO：手持式X射线荧光光谱仪 - 美国BRANSON：超声波细胞破碎仪、台式超声波清洗器 - 日本YAMAZEN：中压制备色谱（Flash快速色谱） - 奥地利ANTON PARR：微波样品制备仪（微波消解、微波萃取、微波氧燃烧、微波紫外消解） - 美国ORGANOMATION：氮吹仪系列产品 - 瑞士HAMILTON：微量注射器 / 微量进样针、气相色谱柱、液相色谱柱、稀释仪 / 配液仪 - 德国LA-PHA-PACK：色谱样品瓶、样品瓶盖垫、封盖器与启盖器、一次性针式过滤器 - 美国ALLTECH：固相萃取富集装置、固相萃取SPE小柱、气相色谱柱、液相色谱柱 - 美国AGILENT：气相色谱柱、液相色谱柱、微量进样针、色谱样品瓶、固相萃取SPE小柱、常用色谱耗材 - 希波氏XIBOSHI：一次性针式过滤器、圆片微孔滤膜、固相萃取SPE小柱 - 化学试剂与标准品：化学试剂、标准物质……
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  • 无锡加莱克色谱科技有限公司.
    无锡加莱克色谱科技有限公司成立于2009年，是由美籍华人色谱专家和中科院科技管理人员共同创立的高科技企业，位于无锡（马山）国家生命科学园，致力于生产生物工程、制药、食品安全和环境检测等领域所急需的以聚合物和硅胶为基质的专用色谱填料，色谱柱、装柱系统、纯化设备以及分离纯化工艺和检测方法开发；是一家专业提供完整的生物医药分离纯化解决方案及设备、产线的集成商。加莱克公司拥有在美国知名企业从事20余年液相色谱填料研发和产业化的资深色谱专家团队，具有很强实战和创新能力，加莱克公司经过十多年的深耕细作，形成蛋白与抗体纯化、天然产物纯化和硅胶色谱填料三大技术平台，拥有10项发明专利、8项实用新型专利和近百种产品；并向市场推出四十余种产品，逐渐在生物医药纯化领域崭露头角；产品与技术已在国内众多药企广泛使用，并出口美国、俄罗斯、日本、印度和台湾地区等地区。为更好的解决客户需求，无锡加莱克色谱科技有限公司牵头国内知名厂商，大学研究机构，多个国内知名研究团队组成了战略合作联盟，为客户提供完整的生物医药解决方案，涵盖生物医药产品的工艺开发与优化、中试放大、工业级生产线设计等不同阶段、自动化控制、公用工程需求等方案的设计，相应生产设备提供、生产线的安装施工等，同时提供配套相关符合GMP要求的认证文件的制作和编写。希望通过加莱克的专业知识和技能，以及始终秉承“创新、专注、高效、诚信、责任、奉献”的企业理念，力求服务再多一点，质量再高一点，给客户和企业带来更优质的产品和服务，为我国生物医药产业的健康快速发展贡献一份力量。
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液相色谱微量相关的仪器

  • 岛津微流量液相色谱质谱联用系统 400-612-9980
    作为岛津LC家族新成员，Nexera Mikros在流量范围（1 - 500 μL/min）上完美补充了现有产品线。相比半微流量液相色谱（流速100 μL/min至500 μL/min范围），Nexera Mikros在与LCMS联用检测目标化合物时可以获得更高的灵敏度；与纳流LCMS系统（流量范围在100 nL/min至1 μL/min范围）相比，可以获得更短的分析时间和更好的稳定性。另外，Nexera Mikros提升了可操作性，同时通过更小的系统死体积实现更高的灵敏度。便捷的UF-Link技术，可以一键连接和断开LCMS离子源接口和分析色谱柱。在低浓度成分的药代动力学分析、血液中的激素及其他痕量组分分析中，用于微流量液相色谱LCMS联用系统的Shim-pack MC分析柱和Shim-pack MCT捕集柱可以抑制样品吸附和色谱峰拖尾现象，提高检测灵敏度。Nexera Mikros满足各种用户需求，例如节省新药研发周期及成本，缩短分析时间，便捷维护。同时，与LCMS联用时，还能展现良好的灵敏度和便捷性。 产品特点： 1. 卓越的灵敏度相比半微量系统，该产品提供了高达数倍至数十倍的灵敏度，通过优化适用于低流速下的ESI喷针相对于进样部分（脱溶剂管，DL）的位置，将离子化效率和离子通过率最大化。CTO-Mikros设计为可以安装在MS主机单元上，色谱柱和ESI喷针直接相连以减少死体积，以及由于峰展宽带来的灵敏度损失。2. 良好的耐用性和稳定性优化后的喷针和DL夹角提高了离子的通过效率，同时去除了过量的溶剂分子。这样可以减少污染的影响，并能进行稳定的分析。3. 优异的可操作性该产品是基于现有的离子源的设计，由于其便于更换、拆卸附件和维护，已经受到用户的好评。我们还开发了UF-Link，可以零死体积一键连接色谱柱和ESI毛细管。与常规半微流量液相色谱相比，在微流量液相色谱中，样品在管路连接等处的死体积中会出现显著的样品扩散。由于这个原因，没有死体积的连接是必要的，这样可以稳定地提供高灵敏度。使用UFLink，用户可以通过简单的倾斜来连接色谱柱和ESI毛细管，确保无死体积。UF-Link可以广泛用于岛津和其他公司的多种色谱柱。通过高分辨率的相机，可以方便地从电脑上检查喷雾状态和位置，必要时可以通过简单的程序进行优化。 4. 宽的流速设定范围由于精确的压力反馈控制、内置的主动入口单向阀和溶剂输送管路的自动切换控制，脉动流量值显著降低。因此，溶剂流速范围可以在1 μL/min到500 μL/min之间广泛地设置。 5. 在微流量区域的高通量分析该系统可以从进样过程带来的压力下降中快速恢复，从而提高了微流量区域的分析通量。 6. 追求分析稳定性通过自动压缩算法可以自动测量溶剂的压缩性，并在压力波动过程中提供修正函数来优化流量。此外，在分析开始时，LC-Mikros柱塞操作是同步的，因此分析总是从相同的柱塞位置开始，从而提高分析稳定性。
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    厂商： 岛津企业管理（中国）有限公司
    品牌： 岛津/Shimadzu
    型号： Nexera Mikros
    价格： 500万 - 750万元
  • 纳升级/毛细管液相色谱 400-611-9236
    仪器简介：纳升(Nl)进样的NanoLC--适用于与质谱联机的液相色谱 随着现代分析水平的发展，对分析仪器的要求越来越向着微量、准确、快速发展，对仪器的检测手段及结果的要求越来越严格，对液相色谱来说，其检测器从紫外、视差、荧光发展到二极管阵列，而与质谱联机则是目前的时尚。色-质联机集高效分离、多组分同时定性和定量为一体，是分析混合物（主要是有机物）最为有效的工具，但由于液/质衔接的技术较为复杂，主要是高压液相和低压气相之间的矛盾，随着窄孔柱、毛细管柱等技术的出现，LC流量加给MS的负担有所减轻，但对于常规的液相，如何去掉液相的流动相仍然是液/质的主要问题。赛默飞向您介绍两种最新的技术，可以轻松地解决您的液相与质谱的联机问题。1、 如果您的实验室还没有液相色谱，请考虑戴安公司的UltMateTM技术。UltMate是一台集微量、毛细和纳升（Micro、Capillary and Nano）为一体的具有GLP功能的液相色谱，由微量泵、Famos自动进样器、柱箱（可选温控式）、带扫描能力的高灵敏度紫外检测器组成。2、 如果您的实验室已有了常规的液相色谱，希望与质谱联机使用，可选用戴安公司的LC/MS TOOLS，包括：①各种分流器，有用于Micro、Capillary 和 Nano HPLC的柱前分流器，有用于直接与MS、NMR和ELSD等检测器连接使用的柱后分流器。②具有双波长、Z型毛细流通池的高灵敏度UV/VIS检测器。③适用于Micro、Capillary 和 Nano HPLC的U型或Z型流通池，可用在多种标准HPLC紫外检测器上，④升级套件，可将标准流量的HPLC升级至Micro、Capillary 和 Nano HPLC，套件包括分流器、进样环、进样器、微孔柱、U-Z型流通池部分应用文献目录LC Packings毛细管/纳升级液相技术AN01LCP 用毛细管液相/质谱/质谱对药物代谢产物的快速确定AN02LCP 用超高流速的毛细管液相/质谱/质谱对血浆中的药物进行直接分析主要特点：1.提供各种惰性流路，试用于敏感生物样品分析2.是HTS理想设备,并适用于各种质谱二级质谱3.自动在线进行样品前处理脱气、消解、浓缩等4.适用于药物分析基因分析
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    厂商： 赛默飞色谱与质谱
    品牌： 赛默飞/Thermo Fisher
    型号： Ultimate
    价格： 20万 - 50万元
  • 安捷伦 1260 Infinity II 单元液相色谱系统 400-629-8889
    信心十足地实现每日高效分析 连续稳定运行的液相色谱平台，值得您的信赖。 Agilent 1260 Infinity II 液相色谱拥有满足您期望的性能，以及稳定性和可靠性，让您的分析、仪器和实验室效率迈上一个新台阶，带给您信心十足的日常分析结果。该仪器十分可靠，将最新色谱柱技术与先进备件完美结合，确保实现稳定的分离和稳健的检测性能。轻松的色谱柱操作，出色的样品流程，从样品提交到数据分析都能确保快速的周转时间和最高的仪器利用率。无缝的方法转移和逐步升级的方式有助于对现有架构进行零风险整合，在预算范围之内实现无干扰的方法转移，并获得最高的性能。产品特点：● 兼容传统和超高性能的液相色谱 – 操作压力高达 600 bar，1260 Infinity II 四元泵是 Poroshell 120 色谱柱的理想之选。 ● 超低的残留 — 1260 Infinity II Multisampler 的多重清洗功能可在多次运行间清洁所有相关的进样部件。此复杂、集成功能用三种溶剂由内而外冲洗进样针，采用针座反冲程序，能成功将残留降至 10 ppm 以下。● 缩短循环时间 — 得益于安捷伦独特的双针头设计，您可以通过两个进样通道交替运行样品。将循环时间缩短至数秒钟，基本消除了传统的等待时间，不论对大体积上样还是冲洗步骤，均是如此。● 高效的样品处理和流程 — 1260 Infinity Multisampler 采用浅孔板抽取器，最多可容纳 16 个微量滴定板和 6144 个样品，是容量最高的单一系统。● 高效的色谱柱操作和温度控制 — 1260 Infinity II 高容量柱温箱通过一个快速切换阀直接连接每根色谱柱，可最多容纳四根色谱柱，极具灵活性，无需断开和重新连接色谱柱。● 快速连接，轻松方便 — 采用 InfinityLab Quick-Connect 接头节省时间并减少故障。● 更高质量的数据 — 1260 Infinity II 二极管阵列检测器 HS 能够信心十足地提供更低的检测限和更高质量的数据。 ● 高效的控制、采集和报告 — 安捷伦的仪器控制体系 (ICF) 可以通过第三方色谱数据系统平稳控制安捷伦液相色谱仪器。
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    厂商： 安捷伦科技(中国)有限公司
    品牌： 安捷伦/Agilent Technologies
    型号： 1260 Infinity II 单元
    价格： 面议
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液相色谱微量相关的资讯

  • 二维液相色谱丨含碘造影剂，你的微量手性杂质我来查
    导读最近看到一则新闻，某患者因为肺部感染、哮喘，到医院放射科做了CT平扫，发现有一肺部肿块，医生建议再做个增强CT来进一步确定疾病的性质。那么，新闻中所说的增强CT究竟是什么呢？其实，增强CT就是指在CT平扫基础上，对发现的可疑部位，在经静脉注入含碘造影剂后，进行有重点的检查。也许您有疑问，为什么要注入含碘造影剂呢？它的安全性又如何控制呢？ 为什么要注入含碘造影剂呢？含碘造影剂具有密度大的特点，经静脉注射进入体内后，因为病变组织内或血管丰富或血流缓慢而在病理组织中停滞、积蓄，使病变组织与邻近正常组织间的密度对比增加（即影像上黑白对比增加），CT图像能够更加清楚地显示组织血流和病变情况，以帮助鉴别疾病的良、恶性，提高病灶的定性能力，从而提高诊断准确率。 含碘造影剂小科普l 含碘造影剂的变迁自20世纪50年代被发现后，含碘造影剂经历了第一代的离子型造影剂飞跃到非离子型单体造影剂，再次飞跃到非离子型二聚体造影剂的过程。 图1 4种碘化CT造影剂的化学结构：离子单体、离子二聚体、非离子单体和非离子二聚体 目前被广泛用于临床的非离子型造影剂，如碘帕醇、碘海醇、碘普罗胺、碘曲轮、碘克沙醇等，具有毒性低、性能稳定、低渗等渗、耐受性好等优点。 l 碘帕醇的手性构型碘帕醇是一种非离子型水溶性碘造影剂，具有良好的显影作用，对血管壁及神经组织毒性低，化学性质稳定，不良反应较少，适应范围广。 碘帕醇（CAS号：66166-93-0）有1个手性中心，两个异构体（S-构型、R-构型），结构式见图2。碘帕醇中的R-碘帕醇含量增加会使碘帕醇注射液黏度升高，进而导致碘帕醇注射液的不良反应增加。因此控制不良构型的含量是碘帕醇及其他含碘造影剂质量控制的关键步骤。 图2 碘帕醇的S构型（左）和R构型(右) l 碘帕醇的一维手性分离探索利用色谱柱中手性固定相对异构体的吸附速度不同实现的色谱分离是常用手段。以Chiralpak MA（＋）色谱柱和硫酸铜溶液为流动相建立碘帕醇的分离，R/S-碘帕醇分离结果如图3所示。 图3 250 mg/L浓度的R-碘帕醇样品溶液 (1)和S-碘帕醇样品溶液(2) 的1stD LC色谱图 通过分离结果可以看到，该手性分离体系能在20 min内实现碘帕醇两种构型的手性分离，但和多数液相手性分离的色谱行为相似，存在柱效较低的问题，因此在定量分析中对于含量较低的待测物的检出存在不足。 岛津解决方案对于类似碘帕醇这样的分子结构提示其可在反相色谱上有良好保留，因此考虑构建手性色谱体系和反相色谱体系的二维液相色谱系统，对已获分离的异构体杂质再次进行反相色谱分离以提高检测的灵敏度。 l 手性构型的二维分离 l 分离结果解析R-碘帕醇溶液（0.5 mg/L）2D LC 分析色谱图 5-10min间为R碘帕醇在1维液相上的保留，可以看到该浓度下无明显色谱峰，无法进行定量分析。经过阀切换将R碘帕醇在1维液相上的组分切入二维后，通过反相色谱作用，可以在16.5min左右发现明显的色谱峰同手性分离的 1 stD LC 结果相比，经过二维液相色谱分离的 R-碘帕醇灵敏度较之有 10 倍的提升。 结语药物杂质的高灵敏检查是控制药物纯度，提高药品质量的一个非常重要的环节。为了让含碘造影剂更加安全的为患者服务，岛津的二维液相色谱系统可发挥作用，弥补手性色谱柱效不足的缺点，既获得两种异构体的有效分离，又在经过反相色谱分离中获得良好响应。 撰稿人：李月琪 本文内容非商业广告，仅供专业人士参考。
    时间： 2022-04-22
    作者： 岛津
  • 【质谱文献】超高效液相色谱-串联质谱法同时快速检测微量血清中6种脂溶性维生素
    本文来源： 柯瑞斯质谱平台摘 要目的　 建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时快速检测微量血清中维生素A、维生素D(25-OH-VD2、25-OH-VD3)、维生素E(α-、β-和γ-生育酚)的方法。 方法　 血清中脂溶性维生素经甲醇-乙腈(50:50, v/v)沉淀蛋白、正己烷萃取，以Phenomenex Kinetex F5色谱柱为分离柱，2.5mmol/L甲酸铵-0.1%甲酸水溶液和甲醇为流动相，梯度洗脱，电喷雾电离(ESI~+)、多反应监测(MRM)模式下检测，同位素内标法定量。结果　 血清中6种脂溶性维生素线性范围内线性关系良好，相关系数r0.995；6种脂溶性维生素的检测限为0.20～1.25ng/mL，定量限为0.39～3.88ng/mL；加标回收率为86.6%～107.7%，日内精密度9.6%，日间精密度9.3%。NIST标准参照品SRM 968f验证方法准确度，结果偏差均在5%以内。结论　 本方法准确度高、重现性好、用血量少，适于婴幼儿等采血困难者微量血样中多种脂溶性维生素的同时快速检测。正 文维生素在人体生长代谢过程中发挥着重要作用，是人体必须的微量营养素，缺乏或过量都会对人体健康产生不利影响。维生素A、D、E是脂溶性维生素，研究表明缺乏这些维生素会增加患夜盲症、骨质疏松、心血管疾病及免疫系统相关疾病的风险[1],婴幼儿及未成年人缺乏其对生长发育的影响则更为明显[2-4]。目前维生素检测的方法主要有高效液相色谱法[5-7]、液相色谱-串联质谱法[8-14]等，其中液相色谱-串联质谱法因其灵敏度高、重现性好、可同时快速检测多种维生素已成为很多临床实验室的首选方法。但是目前的液相色谱-串联质谱方法血液需求量较大[10,13],检测项目单一[8-9,14]或检测时间较长[11],不能满足临床同时快速检测多个项目的需求，特别是婴幼儿采血困难采血量很难满足需求。虽然已有部分学者建立微量检测方法用于维生素检测，但是这些方法需要衍生化过程，前处理复杂耗时较长[8-9,14]。因此，建立能够用微量血液同时快速检测多种维生素的方法满足临床不同年龄段的检测需求显得尤为必要。此外，视黄醇，维生素D的代谢产物25-OH-VD2、25-OH-VD3,α-生育酚是脂溶性维生素A、D、E在血液循环中的主要存在形式，常作为脂溶性维生素检测的首选指标[15-18]。γ-生育酚是维生素E主要的饮食摄入形式，但其与α-生育酚转移蛋白(α-TTP)的亲和力较低，在体内含量较α-生育酚低，但是，近年来文献报道其在人体健康活动中也扮演着重要角色[19]。本文建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时快速检测微量血清中视黄醇，维生素D(25-OH-VD2、25-OH-VD3)和α-、β-、γ-生育酚的方法，满足临床各年龄段尤其是对婴幼儿同时快速检测多种维生素的需求。１实验部分１.１　 仪器与试剂　液质联用仪；高速冷冻离心机；涡旋振荡仪；超声波振荡器；氮吹仪(Agela)；紫外分光光度计。视黄醇、25-OH-VD2、25-OH-VD3、α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚均购自美国Sigma-Aldrich；视黄醇-d6标准品购自上海谱芬生物；25-OH-VD2-d3购自美国IsoSciences、25-OH-VD3-d6、α-生育酚-d6标准品购自加拿大TRC 血清质控样品购自美国NIST 收集安徽省第二人民医院近期健康体检正常儿童血液样本17份，避光保存。LC-MS级甲醇，色谱级乙腈、正已烷及甲酸均购自美国Fisher；甲酸铵、牛血清白蛋白(BSA)购自美国Sigma-Aldrich；色谱级乙醇购自国药集团。实验用水由Milipore纯水仪(美国密理博)提供。１.２　 标准溶液和内标溶液的配制　 用无水乙醇配制视黄醇标准品储备液100μg/mL；α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚标准品储备液各1000μg/mL，并用紫外分光光度计对其浓度进行校正[18,20]。用甲醇配制25-OH-VD2标准品储备液25μg/mL和25-OH-VD3标准品储备液100μg/mL，视黄醇-d6标准品储备液100μg/mL，25-OH-VD2-d3标准品储备液50μg/mL，25-OH-VD3-d6标准品储备液50μg/mL，α-生育酚-d6标准品储备液1000μg/mL。将各目标化合物标准储备液用复溶液(初始流动相)稀释混匀，配制成混合标准溶液(视黄醇2.50μg/mL、25-OH-VD2 0.20μg/mL、25-OH-VD3 0.40μg/mL、α-生育酚50.00μg/mL、β-生育酚5.00μg/mL、γ-生育酚 5.00μg/mL)；将各同位素标品储备液用甲醇稀释混匀，配制成混合内标工作液(视黄醇-d6 2.00μg/mL、25-OH-VD2-d3 0.10μg/mL、25-OH-VD3 0.20μg/mL、α-生育酚-d6 20.0μg/mL)。取4g BSA溶解于100mL水中配成4% BSA溶液。１.３　 样本前处理　 取血清样品20μL至2mL离心管中，加入10μL同位素内标工作液，80μL水，2000r/min涡旋振荡30s后加入200μL甲醇-乙腈(50∶50,v/v)，2000r/min混匀60s；加入800μL正己烷，2000r/min，混匀5min，然后4℃，12000r/min离心5min；吸取600μL上清液至1.5mL离心管中，室温下氮气吹干；加100μL初始流动相复溶，涡旋振荡60s，4℃，12000r/min离心5min，上清液转移至进样瓶中待分析。１.４　 色谱 － 质谱条件　 采用Phenomenex Kinetex F5(100mm × 2.1mm, 2.6μm)色谱柱，柱温35℃，流动相A含2.5mmol/L甲酸铵和0.1%甲酸的水溶液；流动相B含2.5mmol/L甲酸铵和0.1%甲酸的甲醇溶液，梯度洗脱程序：0～2.0min，70%B，2.0～2.5min，70%～88% B，2.5～3.5min，88% B，3.5～3.51min，88%～81%B，3.51～11.0min，81% B，11.0～12.0min，81%～70%B，流速0.5mL/min。进样量：20μL。采用多反应监测(MRM)、电喷雾正离子模式(ESI+)，离子源温度 150℃，脱溶剂温度500℃，毛细管电压3kV，脱溶剂气流速1000L/h；6种脂溶性维生素的MRM 离子参数见表1。２　 结果与讨论２.１　 前处理条件优化　 对血清前处理过程中蛋白沉淀剂(甲醇、乙腈、乙醇)的选择及萃取溶剂正己烷的用量(400μL、600μL、800μL)进行了优化，结果表明，甲醇-乙腈(50∶50,v/v)，沉淀效果最好，色谱图杂峰明显减少；正己烷用量较大时萃取更完全，信号值更高。另外，考察了不同复溶液体系：甲醇-水(50∶50,v/v)、甲醇-水(70∶30,v/v)、甲醇均含2.5mmol/L甲酸铵和0.1%甲酸对色谱分离的影响，结果如图1所示，使用b组复溶液即初始流动相时视黄醇响应值较a组增加1倍以上，c组视黄醇峰宽变大且峰形不对称。同时b组中25-OH-VD3和25-OH-VD2响应值是a组的2倍、c组的4倍以上，且峰形明显改善有利于25-OH-VD3和 25-OH-VD2的分离检测。最终，采用血清样加水混匀后用200μL沉淀剂(甲醇：乙腈(50∶50,v/v)沉淀蛋白，800μL正已烷液液萃取，取600μL上清液氮吹，初始流动相复溶进样。２.２ 　 液 相 色 谱 条 件 优 化 　 Kinetex F5色谱柱可以实现所有组分包括β、γ-生育酚的分离。此外，25-OH-VD3同分异构体3-epi-25-OH-VD3在婴幼儿体内含量较高，对维生素D含量测定影响较大[21]，该色谱柱可以实现25-OH-VD3和3-epi-25-OH-VD3的分离，减少3-epi-25-OH-VD3对检测结果的影响。故采用Kinetex F5色谱柱进行所有组分的分离(见图2)。研究发现在流动相中加入甲酸铵后其促进目标化合物离子化的效果较加入乙酸铵好，响应值增加明显，故在水相和有机相中均加入2.5mmol/L甲酸铵。２.３　 线性范围、检出限和定量限　 将混合标准溶液用复溶液逐级稀释，得到一系列标准工作液，各取20μL，分别加入10μL内标工作液和80μL 4% BSA溶液，其余操作同样本前处理。由于人血中存在内源性脂溶性维生素，故在标曲制作中加入4% BSA。以各目标化合物的色谱峰与其相对应的同位素内标色谱峰的峰面积比值-浓度比值作图，得到各目标化合物的标准系列工作溶液的直线拟合方程，并计算相应的线性相关系数。6种脂溶性维生素的标准曲线和线性范围见表2。结果表明，6种脂溶性维生素在对应的浓度范围内线性关系良好，相关系数0.995，标准溶液色谱图如图3所示。每个浓度重复检测6次，满足相对标准偏差20%且信噪比S/N≥3的最低浓度值定为检测限，满足相对标准偏差20%且信噪比S/N≥10的最低浓度值定为定量限。6种脂溶性维生素检测限为0.20～1.25ng/mL，定量限为0.39～3.88ng/mL(见表2)。２.４　 方法精密度　将低、中、高三个浓度标准品溶液加入4% BSA混合血清样本经本法处理后进行检测，每个浓度重复6次，连续检测三天，计算日内精密度为0.9%～9.6%，日间精密度为3.0%～9.3%(见表3)。该方法同时测定6种脂溶性维生素的日内精密度和日间精密度均在15%以内，方法精密度满足检测需求。２.５　 方法准确度　 将低、中、高浓度的标准品溶液加入混合血清样本中按本法进行前处理后进行检测，每个浓度重复6次，计算加标回收率，3个水平的加标回收率为86.6%～107.7%，相对标准偏差(RSD)为1.46%～9.39%(见表4)。该方法加标回收率均在80%～120%以内，方法准确度高满足检测需求。２.６　 方法验证　 采用建立的UPLC-MS/MS方法对美国国家标准技术研究所(NIST)制定的标准参照品SRM 968f进行检测，每个水平重复2次取平均值，验证方法准确度。结果表明，除25-OH-VD2含量较低未能检出外，其它检测结果与靶值偏差均在5%以内，该方法检测结果准确可靠(表5)。２.７　 实际样品测定　 使用本方法对17份健康儿童血液样本进行检测，其中视黄醇含量为0.22～0.43μg/mL，25-OH-VD2含量为未检出～5.19ng/mL，25-OH-VD3含量为6.83～49.21ng/mL，α-生育酚含量为5.63～12.73μg/mL，β-生育酚含量为0.03～1.37μg/mL，γ-生育酚含量为0.11～1.68μg/mL。本法适用于微量临床血液样本6种脂溶性维生素的同时快速检测。３结　 论本研究建立了超高效液相色谱串联质谱法同时测定微量血清样本中多种脂溶性维生素的方法，并对前处理过程中的蛋白沉淀试剂、萃取液用量，复溶液等进行了优化，以减少色谱图中噪音干扰，改善色谱峰形，提高检测灵敏度。并比较了不同色谱柱对多种脂溶性维生素尤其是不同类型维生素E的分离效果，最终选择Phenomenex Kinetex F5色谱柱，该色谱柱可以实现β-生育酚和γ-生育酚的有效分离。本研究中只需20μL血清就能够快速完成6种脂溶性维生素的测定。该方法测定样本需求量少、操作简单、检测结果准确快速可实现大量临床样本的同时检测，尤其对采血较为困难的婴幼儿可以实现少量血液样本检测多数项目的需求。参考文献（略）本文引用来源： 李雪梅,吴慧慧,陈竞,赵盼,唐玉菲.超高效液相色谱-串联质谱法同时快速检测微量血清中6种脂溶性维生素[J].现代预防医学,2022,49(07):1297-1302.
    时间： 2024-01-16
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    时间： 2012-10-19
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    上头给了一篇“液相色谱法同时测定微量全血中维生素A和E”，说要我们按这个文献用液相来做生物分析，无奈啊。但是只给了摘要，想全面的评估一下是否可行，也请各位大侠帮忙评估一下可行性，谢谢！摘要如下：摘要： 建立反相高效液相色譜法(RP-HPLC)同時測定微量全血樣品中維生素A和E的方法. 取全血50μl,用無水乙醇沉淀蛋白,再加入正已烷漩渦提取維生素A和E,取一定量正己烷層經氮氣流揮干,殘渣加甲醇溶解后用高效液相色譜法分析,標準曲線法定量.對血樣的提取條件和色譜柱選擇、流動相比例、流速、柱溫等實驗條件進行了優化,確定了最佳分析條件.本法色譜分離條件為:分離柱為Zorbax C8色譜柱(4.6 mm×15 cm,5μm);流動相為甲醇-水(98+2);流速為0.70ml/min;柱溫為50℃;紫外檢測波長:維生素A為325 nm,維生素E為292 nm. 維生素A和E標準曲線的相關系數均大于0.999;相對標準偏差(RSD)＜5%.對于50μl全血,本法的檢出限維生素A為0.02μg/ml;維生素E為0.08μg/ml.維生素A和E的加標回收率分別為93.2%～104%和80.4%～84.9%. 所建立的方法快速、簡便、靈敏、準確,已成功地測定了微量全血中維生素A和E.

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Removable NDL, 22s ga, 2 in, point style 38027525 μL, Model 1702 N SYR, Cemented NDL, 22s ga, 2 in, point style 38026525 μL, Model 1702 RN SYR, Small Removable NDL, 22s ga, 2 in, point style 38046525 μL, Model 702 N SYR, Cemented NDL, 22s ga, 2 in, point style 381185250 μL, Model 1725 LTN SYR, Cemented NDL, 22 ga, 2 in, point style 381175250 μL, Model 1725 LTN SYR, Cemented NDL, 22s ga, 2 in, point style 381165250 μL, Model 1725 RN SYR, Large Removable NDL, 22 ga, 2 in, point style 380765250 μL, Model 725 N SYR, Cemented NDL, 22 ga, 2 in, point style 3879435 μL, Model 65 RN SYR, Small Removable NDL, 22s ga, 2 in, point style 38098550 μL, Model 1705 N SYR, Cemented NDL, 22 ga, 2 in, point style 38097550 μL, Model 1705 N SYR, Cemented NDL, 22s ga, 2 in, point style 38096550 μL, Model 1705 RN SYR, Small Removable NDL, 22s ga, 2 in, point style 38056550 μL, Model 705 N SYR, Cemented NDL, 22s ga, 2 in, point style 381216500 μL, Model 1750 LTN SYR, Cemented NDL, 22 ga, 2 in, point style 381265500 μL, Model 1750 RN, SYR Large Removable NDL, 22 ga, 2 in, point style 380865500 μL, Model 750 N SYR, Cemented NDL, 22 ga, 2 in, point style 3TEL: 010-64271852 / 186-1048-6053 / QQ: 2890633688 Valco VISF-1 Injection ValvesSyringes for Valco VISF-1 Injection Valves813311 mL, Model 1001 RN Valco VISF-1 SYR, Large Removable NDL, 22 ga, 0.75 in, point style 38163110 mL, Model 1010 RN Valco VISF-1 SYR, Large Removable NDL, 22 ga, 0.75 in, point style 381031100 μL, Model 1710 RN Valco VISF-1 SYR, Small Removable NDL, 22s ga, 0.75 in, point style 3814312.5 mL, Model 1002 RN Valco VISF-1 SYR, Large Removable NDL, 22 ga, 0.75 in, point style 38023125 μL, Model 1702 RN Valco VISF-1 SYR, Small Removable NDL, 22s ga, 0.75 in, point style 381131250 μL, Model 1725 RN Valco VISF-1 SYR, Large Removable NDL, 22s ga, 0.75 in, point style 3815315 mL, Model 1005 RN Valco VISF-1 SYR, Large Removable NDL, 22 ga, 0.75 in, point style 38093150 μL, Model 1705 RN Valco VISF-1 SYR, Small Removable NDL, 22s ga, 0.75 in, point style 381231500 μL, Model 1750 RN Valco VISF-1 SYR, Large Removable NDL, 22 ga, 0.75 in, point style 3 Waters Manual SyringesSyringes for U6K valve come with a 25s gauge needle specifically designed for this valve.- 16 Syringes for Waters U6K Injection Valve- One priming syringe for Waters 510 HPLC pump8481510 μL, Model 801 RN Waters U6K SYR, Small Removable NDL, 25s ga, 1.97 in, point style 38161010 mL, Model 1010 TLL Waters SYR, Waters HPLC Pump Priming Syringe8489110, 25, 50, 100, and 250 μL, Model RN Waters U6K SYR, 5 Pack, Removable NDL, 25s ga, 1.97 in, point style 381038100 μL, Model 1710 RN Waters U6K SYR, Small Removable NDL, 25s ga, 1.97 in, point style 384986100 μL, Model 1810 RN Waters U6K SYR, Small Removable NDL, 25s ga, 1.97 in, point style 384818100 μL, Model 810 RN Waters U6K SYR, Small Removable NDL, 25s ga, 1.97 in, point style 38023825 μL, Model 1702 RN Waters U6K SYR, Small Removable NDL, 25s ga, 1.97 in, point style 38498025 μL, Model 1802 RN Waters U6K SYR, Small Removable NDL, 25s ga, 1.97 in, point style 38481625 μL, Model 802 RN Waters U6K SYR, Small Removable NDL, 25s ga, 1.97 in, point style 381138250 μL, Model 1725 RN Waters U6K SYR, Large Removable NDL, 25s ga, 1.97 in, point style 384989250 μL, Model 1825 RN Waters U6K SYR, Large Removable NDL, 25s ga, 1.97 in, point style 384819250 μL, Model 825 RN Waters U6K SYR, Large Removable NDL, 25s ga, 1.97 in, point style 39014925s gauge, Kel-F Hub NDL, 1.97 in, point style 3, 6/PK9004925s gauge, Metal Hub NDL, 1.97 in, point style 3, 6/PK8093850 μL, Model 1705 RN Waters U6K SYR, Small Removable NDL, 25s ga, 1.97 in, point style 38498350 μL, Model 1805 RN Waters U6K SYR, Small Removable NDL, 25s ga, 1.97 in, point style 38481750 μL, Model 805 RN Waters U6K SYR, Small Removable NDL, 25s ga, 1.97 in, point style 3订货信息： 类别订货信息针长(mm)容量2.5μL容量5μL型号62型号65针号22s针号22sRN型进样针RN型可换针头pst3518794287943RN型(不带针头)7632-017633-01附件和备用组件RN型螺母3090230902标准RN型针头7770-017770-01产品编号 产品名称规格80365 Hamilton 10ul液相手动进样针/10ul微量进样器（22S/2"/3#平头针头）80465 Hamilton 25ul液相手动进样针/25ul微量进样器（22S/2"/3#平头针头）80565 Hamilton 50ul液相手动进样针/50ul微量进样器（22S/2"/3#平头针头）80665 Hamilton 100ul液相手动进样针/100ul微量进样器（22S/2"/3#平头针头）80765 Hamilton 250ul液相手动进样针/250ul微量进样器（22S/2"/3#平头针头）80865 Hamilton 500ul液相手动进样针/500ul微量进样器（22S/2"/3#平头针头）产品编号规 格液相进样针8036510ul,普通固定针头8046525ul,普通固定针头8056550ul,普通固定针头80665100ul,普通固定针头80765250ul,普通固定针头80865500ul,普通固定针头适用于WATERS U6K8481510ul,针头可换8481625ul,针头可换8481750ul,针头可换84818100ul,针头可换84819250ul,针头可换适用于Rheodyne Valve8006510ul,针头可换,加粗杆8026525ul,针头可换,加粗杆8096550ul,针头可换,加粗杆81065100ul,针头可换,加粗杆81165250ul,针头可换,加粗杆81265500ul,针头可换,加粗杆8027525ul,针头固定,加粗杆8097550ul,针头固定,加粗杆81075100ul,针头固定,加粗杆81175250ul,针头固定,加粗杆81216500ul,针头固定,加粗杆 用于PE Pen-Elmer液相色谱的手动进样针 备注：手动进样器型号：Series 200货号系列号进样体积809621705CX50ul811621725CX250ul812621750CX500ul813601001C1.0ml814601002C2.5ml 用于Shimadzu液相色谱的手动进样针 备注：手动进样器型号：SIL-6A货号系列号进样体积7656-011710RN w/o Needle100ul 用于Waters液相色谱的手动进样针 备注：手动进样器型号：WISP货号系列号进样体积800201702WISP25ul800241725WISP250ul812621750CX500ul816101010W10ml 用于Spectra-Physics/ Themo Finnigan液相色谱的手动进样针货号系列号进样体积812621750CX500ul814601002C2.5ml811621725CX250ul812621750CX500ul813601001C1ml814601002C2.5ml 用于Varian液相色谱的手动进样针 备注：手动进样器型号：9100货号系列号进样体积01599021710C100ul 用于Koon液相色谱的手动进样针 备注：手动进样器型号：360, 460, 465货号系列号进样体积2010501710AD100ul 用于Gynkotek Gina Dionex液相色谱的手动进样针 备注：手动进样器型号：ASI-100LC货号系列号进样体积7654-011702RN (w/o needle)25ul2021341725RN (w/o needle)250ul 用于Hitachi/LaChrom液相色谱的手动进样针 备注：手动进样器型号：L-7200/L-7250/L-2200/L-8800/L-8900AS1000/AS2000/AS42000货号系列号进样体积01603101750 Special500ul 用于CTC液相色谱的手动进样针货号系列号进样体积可换推杆针头规格203073701N10ul22s/32031941701N10ul203229-1/pk 203239-6/pk22s/32030751702N25ul203045-1/pk 203245-6/pk22s/32032741702N25ul203045-1/pk 203245-6/pk22s/32030771710N100ul203096-1/pk 203246-6/pk22s/32032351710N100ul203096-1/pk 203246-6/pk22/32026681710RN100ul203096-1/pk 203246-6/pk不带针头2030791725N250ul203098-1/pk 203249-6/pk22/32033491750N500ul203061-1/pk 203254-6/pk22/32030811001N1ml203255-1/pk22/32030831002N2.5ml203256-1/pk22/32030851005N5ml203066-1/pk22/32035601701N10ul203562-1/pk22s/32035631702N25ul203565-1/pk22s/32035661710N100ul203569-1/pk22s/3 用于Agilent液相色谱仪HPLC 1090A的手动进样针货号系列进样体积产品描述802301702RN w/o Needle25ul不带针头811301725RN w/o Needle250ul不带针头Hamilton液相色谱手动进样针汉密尔顿微量注射器瑞士Hamilton公司成立于1947 年，是一家大型跨国公司。瑞士Hamilton设计和生产制造了世界上第一支精密的进样器。从质的材料到最严密的生产控制，对细节的精准把控已成为Hamilton产品的标志。每一支进样针都要经过严格的质量控制和流程测试，以保证其高度的准确性及精密度。Hamilton的产品通以下认证：ISO 9001、 ISO 13485、FDA/GMP、ATEX。
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