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[align=center][b]浅谈超高效液相色谱柱和液相色谱柱的区别[/b][/align]从色谱柱填料的发展大趋势来讲,色谱柱填料一直是超更小粒径微粒的方向发展的,2004年超高效液相色谱应运而生。更小的粒径,意味着更高的泵压。在色谱柱的发展历程中,泵压、粒度、柱长、柱效这四个因素是相互制约的。随着技术的发展超高效液相色谱可以提供的泵压为140Mpa,而大多数液相色谱仪的最大压强仅为40Mpa。泵技术的突破为超高效液相色谱的产生奠定了基础。两者的区别如下:1、UPLC比HPLC有更好的分离度;我们不难理解填料粒径变小以后,分离度会变好。1.8um颗粒的分离度比5um颗粒提高了70%;2、UPLC比HPLC有更高的分析速度;常规的液相色谱通常在20分钟内完成分离,而超高效液相通常情况下5分钟内就可以完成分析;3、UPLC比HPLC有更高的灵敏度。分析过程中峰展宽变窄,峰高会更高,提升了色谱检测的灵敏度。单纯从色谱柱填料来讲,主要有三个方面的区别 1、Kromasil提供给超高效液相色谱柱的填料粒径为1.8um,普通色谱柱通常填料的粒径为5um。作为液相色谱来说,填料硅胶球的尺寸分布要求非常严格,填料的粒径越小,实际上对硅胶球的要求更高。所以超高效液相色谱柱的填料成本也是高于液相色谱柱的。2、超高效液相的柱压更高,要求填料的抗压性更强,这就要求在填料合成过程中要考虑抗压性的影响,无疑增加了合成难度。3、色谱柱的装填也更加严苛,超高效液相对装填工程师的要求也更高。超高效液相的柱管和柱塞板也是升级和优化过的。
[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]用水必须尽可能纯净新鲜,特别是梯度洗脱时。水中最常见的污染来自于微生物的污染。水相的滤吸头如果没有注意及时更换或者清洗,那么这种高比表面的多孔部件将成为微生物繁殖的温床,即使换上新鲜的水相,也会因为其繁殖而产生各种代谢的有机物,当这些物质进入色谱体系就可能成为鬼峰。在各种微生物中,最主要的是革兰氏阴性菌,它们可以在纯水中生存和繁殖,当水中存在如磷酸盐或者乙酸盐时生命活动更加旺盛。在20-35℃时,它们可以迅速繁殖,只需几天就可以在HPLC中检测到它们的存在,而且有研究表明即使pH到9都无法抑制它们的繁殖。建议在水相中至少添加15%的甲醇来抑菌,也有建议至少添加5%的乙腈来达到类似的效果。另外,水相的溶剂瓶也应该经常用有机溶剂清洗并充分干燥,而不是只是简单用水清洗后接着用。除此之外,有些仪器上配置的泵头密封垫清洗装置(seal-wash)中的清洗液如果没有考虑到抑菌操作(如经常更换或者加入有机相)也会引入微生物污染。另外还有一个需要特别注意的事项,那就是千万不要使用洗瓶来补充用于HPLC流动相的水,因为来自洗瓶中的水不仅含有从洗瓶塑料中溶解出来的有机物(如塑化剂),而且往往含有不少的微生物及其代谢物!
液相色谱正常情况下,色谱柱上到液相后用纯甲醇冲柱时压力很低,只有1是怎么回事