鲎试剂三肽

某食品的清液中，加入水合茚三酮试剂后呈兰色，证明含有()。 A、蔗糖 B、维生素Vc C、葡萄糖 D、α-氨基酸

鲎试剂分类及选购-内毒素检测新手必看显色基质鲎试剂、凝胶法鲎试剂、特异性鲎试剂、动态浊度法鲎试剂、比色法鲎试剂、显色法鲎试剂、动态显色法鲎试剂、浊度法鲎试剂 、动态比浊法鲎试剂、弃G因子鲎试剂、终点显色法鲎试剂...。如果你是一位刚准备做细菌内毒素检测的实验人员，看到有这么多种鲎试剂，是不是有个疑问：“这么多种鲎试剂，我该怎么选择呢？”别急，不要被这么多名字吓到了，以下为您详细分类介绍；首先，知道什么是鲎试剂。鲎试剂是从栖生于海洋的节肢动物“鲎”的兰色血液中提取变形细胞溶解物，经低温冷冻干燥而成的生物试剂，专用于细菌内毒素检测。按原料来源分：全世界有5个种属的鲎，其中仅有中国鲎(又名三刺鲎）Tachypleus tridentatus Leach和美洲鲎Limulus polyphemus Linnaeus可制造鲎试剂，对应生产出来的鲎试剂分别为中国鲎鲎试剂（Tachypleus Amebocyte Lysate），缩写为TAL；美洲鲎鲎试剂（Limulus Amebocyte Lysate），缩写为LAL。TAL与LAL有相同的功效。按方法分：中国药典2005年版中收录了2种细菌内毒素检查法，即凝胶法和光度测定法，后者包括浊度法和显色基质法。供试品检测时，可使用其中任何一种方法进行试验。当测定结果有争议时，除另有规定外，以凝胶法结果为准。05年中国药典附录细菌内毒素检查法详见http://www.houshiji.com/newslist.asp?newsid=135&sort=2凝胶法系通过鲎试剂与内毒素产生凝集反应的原理来定性检测或半定量内毒素的方法。凝胶法鲎试剂常见规格为0.1ml/支或0.5ml/支或者更大装量，使用时应加无热原水（细菌内毒素检查用水）复溶后使用。2005年版药典中凝胶法鲎试剂结果的判断：保温60分钟±2分钟后观察结果。部分商家所说的半小时出结果的快速凝胶法鲎试剂是没有依据的，没到时间就观察结果可能导致假阴性。特异性鲎试剂（又叫弃G因子鲎试剂）是凝胶法鲎试剂的一种，细菌内毒素及β-葡聚糖均能与鲎试剂发生凝聚反应。特异性鲎试剂就是屏蔽β-葡聚糖引起的鲎试剂凝聚反应，使鲎试剂仅与内毒素起反应。一般中草药注射液成份复杂，干扰因素较多，常含有β-葡聚糖或内毒素类似物。用特异性鲎试剂能减少或消除假阳性反应。（应做对比及干扰试验）。光度测定法分为浊度法和显色基质法，这2种方法都是定量检测内毒素的。浊度法系利用检测鲎试剂与内毒素反应过程过程中的浊度变化而测定内毒素含量的方法。根据检测原理，可分为终点浊度法和动态浊度法。终点浊度法未见与商品化产品，不再赘述。动态浊度（比浊）法是检测反应混合物的浊度到达某一预先设定的吸光度所需要的反应时间，或是检测浊度增加速度的方法。显色基质法系利用鲎试剂与内毒素反应过程中产生的凝固酶使特定底物显色释放出的呈色团的多少而测定内毒素含量的方法，因使用分光光度计或酶标仪器，又称为比色法。根据检测原理，分为终点显色法和动态显色法。国内已有显色基质鲎试剂盒(终点法)，早期有上海伊华以鲎三肽为原料做成的鲎试剂盒，厦门鲎试剂厂于2005推出以鲎四肽为原料的鲎试剂盒，也有少量国外产品，但到货周期长，价格远高于国产试剂。动态比色法与终点比色基本原理差不多。国产暂无动态比色法，相信很快就会面市。如果您是药厂、医院、医疗器械厂商等单位的实验人员，仅需要检测样品的内毒素限量，则应选择凝胶法鲎试剂，通过确定内毒素限值及最大有效稀释倍数，做样品的干扰试验从而确定使用的鲎试剂的灵敏度。如果您需要定量测定样品中内毒素含量则应选择显色基质鲎试剂或动态浊度法鲎试剂。动态浊度法鲎试剂一般需要配备专用的动态浊度仪或带有特定软件的酶标仪，比较适合样品量较多的用户（。显色基质鲎试剂用酶标仪或分光光度计检测。是样品数较少（少于200-300个），设备比较简陋的用户。如果已有内毒素检测专用酶标仪，则可选择显色基质鲎试剂盒或动态浊度法鲎试剂。简单的说，鲎试剂就2种：定性和定量，定性就选凝胶法（特殊产品用特异性鲎试剂）。定量就是显色法鲎试剂盒或动态浊度法鲎试剂（根据已有仪器定）。如果有动态比色法鲎试剂那就多一种选择（当然要看成本）。相信通过以上介绍您对鲎试剂已经有一定了解，聪明的你一定知道如何去选择鲎试剂了吧！特别说明：由于环境污染等原因，鲎的数量在不断减少。台湾澎湖海洋生物研究中心黄丁士副研究员正在做养殖鲎的研究，他培育出12000尾刚孵化的“一龄鲎”， 60天后有250尾脱壳成“二龄鲎”，仅有少部分“二龄鲎”再经历2周成为“三龄鲎”。“二龄鲎”到“三龄鲎”的阶段存活率只有5%，人工繁殖技术上一直未能突破“三龄鲎”的瓶頸而停滯。日本也曾经划出鲎保护区，专门用来进行人工养殖鲎，但经过多年实验以失败告终。鲎的产卵量很大，但是能活到成年的比例很小。一只鲎必需脱壳15到16次，需要15年达到成年，只有成年鲎才可以采血，因此人工养殖鲎基本上不太可能。部分酒家所谓的人工养殖大多是将成年鲎圈养起来。部分保护动物是可以经营利用的，前提是，被经营利用的必须是这些野生动物经人工养殖繁殖的后代。 因此所有酒家经营的鲎都是非法的。目前日本等国由于鲎的数量减少不得不进口美洲鲎及中国鲎原料来生产鲎试剂。因此，请看到此文的朋友不要吃鲎，也请转告您身边的亲朋好友保护它。

[em09503]三聚氰胺现场快速检测试剂盒说明书【简 介】三聚氰胺是一种合成有机含氮杂环化合物，含氮量很高（66％），加之其生产工艺简单、成本很低，在采用凯氏定氮法测定粗蛋白时，可提高表观粗蛋白含量；不法生产商为了降低生产成本，提高经济效益，在原料奶及其它生产加工环节中非法加入三聚氰胺。一次大量摄入或长期摄入三聚氰胺会造成生殖、泌尿系统的损害，膀胱、肾部结石，并可进一步诱发膀胱癌。【检测原理】 样品中的三聚氰胺经特异性层析柱富集、净化，然后与试剂盒中的试剂发生反应，最终生成红色物质。【检测范围】 1、固体样品：饲料、饲料原料、奶粉、蛋糕、奶茶粉等固态样品。2、液体样品：液态生鲜奶、酸奶、巧克力奶、咖啡奶等液态奶制品。3、生鲜蛋类等。【特 点】 检测速度快，测量一个样品只需15分钟左右；操作简便，无需专业技术人员及化学实验室设备。【技术指标】 最低检测限：1.5~2.0mg/kg【操作过程】1、样品处理 固体样品处理 向三聚氰胺试剂A瓶中加入2.0ml纯净水或蒸馏水，称取粉碎的样品1.0 g于三聚氰胺试剂A瓶中，摇动至少1min后，静置分层，取2ml上清液到5ml离心管中，加2ml三聚氰胺试剂B，混匀，待过固相萃取柱A柱。液体样品处理 向试剂A瓶中加入0.5ml纯净水或蒸馏水，吸取液体样品约1ml于三聚氰胺试剂A瓶中，摇动至少1min后，静置分层，取2ml上清液到5ml离心管中，加2ml三聚氰胺试剂B，混匀，待过固相萃取柱A柱。生鲜蛋类样品处理 向三聚氰胺试剂A瓶中加入0.5ml纯净水或蒸馏水，将待测定的生鲜鸡蛋蛋清打入玻璃杯内搅匀，用盒内吸管吸取约1ml样品于三聚氰胺试剂A瓶中，摇动至少1min后，静置分层，取2ml上清液到5ml离心管中，加2ml三聚氰胺试剂B，混匀，待过固相萃取柱A柱。2、固相萃取柱处理A柱： 取出一支三聚氰胺固相萃取柱A柱，用吸管向A柱中加入2ml三聚氰胺试剂B，用洗耳球在A柱上端加压使液体呈滴状自下端出液口匀速流出，流出液弃去。（注意：不要将A柱内填料层的液体挤干，应使A柱内填料层保持湿润状态）B柱： 取出一支三聚氰胺固相萃取柱B柱，用吸管加入2ml盐酸水溶液，用洗耳球在B柱上端加压使液体呈滴状自下端出液口匀速流出，流出液弃去。（注意：不要将B柱内填料层的液体挤干，应使B柱内填料层保持湿润状态）3、净化将步骤1中的待检液分次加入已处理好的A柱中，用洗耳球加压，使液体呈滴状自下端出液口匀速流出，将A柱用洗耳球挤干，然后用吸管向A柱中加2.5 ml三聚氰胺试剂C，洗耳球加压使三聚氰胺试剂C呈滴状自下端出液口匀速流出，用5 ml离心管接收流出液。然后用吸管向5 ml离心管中加0.5 ml纯净水，再用吸管向5 ml离心管中加1.75 ml三聚氰胺试剂D，压紧离心管盖子，上下用力震荡50次以上，静置2min，待其自然分层。4、显色用一次性注射器吸取离心管中下层液体约1 ml（注意：不可带入上层液体），注入到已经过纯净水活化的固相萃取柱B柱中，取出三聚氰胺试剂E，迅速向B柱中滴加4滴，用洗耳球加压使液体流出，流出液弃去。然后向B柱中滴加10滴三聚氰胺试剂F，用洗耳球加压挤干，5min内观察柱体内填料颜色。5、判断含三聚氰胺的样品可见有砖红色物质生成，未含三聚氰胺的样品层析柱内上层填料呈浅黄色或黄绿色。【注意事项】 在使用试剂时，必须注意安全，若不小心将试剂溅到皮肤上时，要立即用清水冲洗。 由于该方法为显色判断的方式，因此对颜色观察的光线要求以白天自然光线或晚上照明不会引起明显色差为准。不可在光线昏暗或采用普通照明外杂色光源的环境下判断。 三聚氰胺试剂B、C和D可固定使用对应的吸管，切忌交叉使用。5mL离心管、注射器、固相萃取柱A柱和固相萃取柱B柱不可重复使用，附带的纯净水为实验过程中的用水，仅限本盒使用，用后立即盖好瓶盖，剩余水不得饮用，应视为废弃物处理。废液参照化学废弃物处理。 液体在过固相萃取柱时，若发现堵柱现象时，相应的萃取柱作废。 按“步骤1”吸取上清液时，吸管头位于液面表层，以避免沉淀物吸入，从而导致A柱堵塞。 固相萃取净化的过程中液体流速控制很重要，不可过快，应控制好在出口处液滴匀速下落。 生鲜奶在常温下易酸败，初筛应尽快进行。4℃冰箱保存的生鲜奶48小时内应完成检测。若产生局部结块、发泡的变化，不可用于进行初筛。 可进行多样品的同时初筛，但“步骤4”需独立连续操作，B柱加三聚氰胺试剂E加压液体流出后，应立即加三聚氰胺试剂F进行显色反应。 提取和萃取时使用漩涡混合器，提取和萃取效果会更好。 如果检测出疑是阳性样品，建议在实验室用仪器方法进一步确认。【保存条件】 试剂在4-30℃阴凉干燥处常温保存，有效期为1年。【三聚氰胺标准品配置方法】 三聚氰胺标准贮备溶液的配置：准确称取100mg三聚氰胺标准品，用甲醇定溶到100ml容量瓶中，既是1000ppm三聚氰胺标准贮备溶液。 三聚氰胺标准工作溶液的配置：取适量三聚氰胺储备溶液用蒸馏水稀释既得三聚氰胺标准工作溶液。