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配制標準曲線產生的不確定度是用的一個特定的公式計算的那麼,在配製溶液的過程中,產生的不確定度怎嚜計算呢?0151.40.57691.2115511231284.6346361.9比如這樣一組數據,由擬合曲線的不確定度計算公式可以算出擬合曲線產生的不確定度,那麼在配製這一系列標準溶液時產生的不確定度還需要考慮嗎?如果要考慮,是不是把每個濃度標準溶液的相對不確定度來進行合成?
一、背景信息 近日,据美国食品安全新闻网消息,由美国墨西哥风味连锁餐厅Chipotle食物中毒引发的产志贺毒素大肠杆菌O26疫情在美国蔓延,导致20人住院。美国疾病预防和控制中心(CDC)称,近两年来由产志贺毒素大肠杆菌O26引发的食物中毒事件明显增多,在未来可能引发更多的疫情,尤其是引发溶血性尿毒综合症的病例数量可能会远超过产志贺毒素大肠杆菌O157。二、专家解读 (一)产志贺毒素大肠杆菌是全球最重要的新发高致病性食源性病原菌。 产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,简称STEC)是一类携带了前噬菌体编码一种或两种志贺毒素基因的新发高致病性食源性病原菌,包括大肠杆菌O26,以及O157、O45、O103、O104、O111、O121、O145等150多种其它血清型的大肠杆菌。该菌为革兰氏阴性杆菌,无芽胞,有鞭毛。可以在10—65℃生长,最适生长温度为33—42℃,具有较强的耐酸性(pH 2.5—3.0),可以抵抗胃酸的消化作用。 据不完全统计,美国1983—2002年发生的非O157的STEC感染者中,70%是由O26、O45、O103、O121、O111 和O145血清型所致;2011年9月,美国农业部食品安全检验局曾发布通告,强调大肠杆菌O26是美国最常见的非O157 STEC。爱尔兰对肉和乳制品中非O157 STEC的分布特征研究发现,血清型O26也是引起人类食源性疾病最主要的非O157血清型。STEC O26已逐渐成为美国、日本及部分欧盟发达国家引起暴发事件的主要病原菌。 (二)肉制品是引发食源性STEC感染的主要高危食品。 牛、羊等经济型动物是STEC的天然宿主,国际相关研究发现牛和羊中STEC携带率可高达71%甚至以上。美国农业部(USDA)和欧盟食品安全局(EFSA)也证实养殖场中存在高风险污染的STEC,并且可以通过环境、粪便、野生动物、土壤等在一定范围内循环存在,最终造成肉制品等污染。1982—2006年多个国家STEC暴发事件的归因分析表明,最主要原因是肉制品污染(42.2%),其次是乳制品(12.2%)。除此之外,生鲜果蔬及其制品等也可能是STEC O26重要的传播介质。通过对美国1992—2002年期间24起STEC暴发事件统计发现,67%的疫情是由牛肉制品导致的,其中O26是最主要致病血清型。 (三)国际组织及部分国家和地区已对肉制品中STEC污染给予高度重视。 1999年第32届食品卫生法典委员会(CCFH)会议上,各国政府对食品中的微生物风险应按“食品—病原”组合进行风险管理达成共识,其中就包括“牛肉中大肠杆菌O157”。联合国粮农组织/世界卫生组织(FAO/WHO)食品微生物风险评估联合专家组(JEMRA)于2011年发布了风险评估会议报告(Enterohaemorrhagic Escherichia coli in raw beef and beef products: approaches for the provision of scientific advice),为如何控制生牛肉及牛肉制品中的出血性大肠杆菌提供了科学建议。但是,迄今CCFH尚未对如何应用食品卫生通则控制牛肉中的出血性大肠杆菌制定相关科学导则,也未制定相关产品的限量标准。 2012年3月,USDA宣布强制执行在初加工的牛肉制品中不得检出六大类非O157 STEC(O26、O45、O103、O121、O111 和O145)。2011年德国发生STEC O104暴发事件后,欧盟也加强了对STEC的监测和评估工作,已连续5年对食品和病人中的STEC进行监测。
[b][b]一、杜氏小管产气试验和糖发酵试验[/b][/b] 杜氏小管,一种玻璃小导管。一端封闭,另一端开口,可以插入到试管中。 这两个试验中都需要用到杜氏小管,也都是为了观察产气情况。但糖发酵试验中同时还要加入指示剂观察产酸情况。操作上类似。 [b][b]二、试验原理[/b][/b] 杜氏小管产气试验目的在于检测某些微生物在代谢过程中是否产生气体,气体摸不着看不清,产气量又微弱,在试验中通过在试验试管中放置一个倒置的杜氏小管,微生物一旦产气,气体便会收集到杜氏小管中,就可以直观地观察到微生物(尤其是细菌)是否产气以及产气的量。 [b][b]三、操作步骤[/b][/b] 1.菌种活化 选择合适的培养基活化菌种。 2.培养基制备 配制培养基,分装到合适的试管中,编号,灭菌。 3.接种 待冷却后,用接种环挑取活化好的菌种或菌液转移至试管培养基中,混匀,对照组不接种。 4.放置杜氏小管 首先,用无菌医用注射器吸取培养液,针头朝上排空其中空气,然后将针头伸到杜氏小管底部,慢慢将培养液推入杜氏小管内直到液面凸起,再至过量以至培养液润湿杜氏小管外表。 或者将试管内壁湿润后,用镊子夹起杜氏小管,轻轻放置在试管内壁,让其自动慢慢滑入试管底部。如果不行,可以助推。盖上试管盖。 5.孵育培养 将准备好的试管放置于适宜的恒温培养箱中培养。 6.观察记录 培养结束后,观察杜氏小管内是否有气泡产生。如果有气泡产生,则记录为“+”;如果没有气泡,则记录为“-”。 [b][b]四、注意事项[/b][/b] 1.杜氏小管放置时间 在有关教材中,培养基灭菌前将杜氏小管放入试管中,跟试管一起灭菌。这种方法既不容易染菌也方便操作。但这种方法特别容易有气泡,影响试验结果。 本试验采用杜氏小管跟培养基一起灭菌,接种后将杜氏小管放入试管中,基本不会因为气泡影响实验结果。 2.无菌操作 实验过程中,严格按照无菌操作技术进行。 3.培养条件 这里主要指温度,当然也要考虑湿度、光照等培养条件。这些需要根据微生物种类严格控制,以免影响实验结果。 4.观察记录 在培养之前要观察杜氏小管内是否有气泡,如果有气泡,重新放置杜氏小管,或重新做实验。如果没有气泡再进行培养。