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超临界流体萃取法——毛细管[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法分析牡丹皮及制剂中丹皮酚的含量第二军医大学长征医院药材科 (上海 200003) 缪海均 柳正良* 李云华* 邵元福*第二军医大学药学院[B]摘要[/B] 本文采用超临界流体萃取法(supercritical fluid extraction,SFE)提取中药牡丹皮及其成方制剂中丹皮酚,以氯仿作改性剂,在温度90℃,压力4000 psi下,二氧化碳动态萃取体积3 ml 静脉萃取时间5 min为最佳。该法简便快速,萃取完全。用大孔径毛细管柱[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法作含量监测,结果:相关性好(r=0.9999),中药与制剂的回收率分别为97.8%,RSD=2.35%(n=3);100.3%,RSD=1.89%(n=3)。结果准确,灵敏,分辨率好。为中药有效成分的提取和质量控制提供了有效可靠的方法。[B]关键词[/B] 超临界流体萃取法; 牡丹皮; 丹皮酚; 毛细管柱[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法中药的成分极其复杂,在定量分析中,样品的提取是非常关键的,超临界流体萃取是近代分离领域中出现的先进的样品制备技术,将传统的蒸馏和有机溶剂萃取结合在一起,利用超临界流体的优良溶解能力,达到分离、纯化的目的。丹皮酚(paeonol)是毛茛科植物牡丹(Paeonia suffruticosa Andr)的主要挥发性有效成分,具有祛风镇痛、降压、止血、抗炎症、抗菌、抑制血小板凝集等多种药理作用 [1] 。本文用超临界二氧化碳流体对牡丹皮及其成方制剂中丹皮酚的萃取条件进行了系统的研究,筛选出压力、温度、CO 2动态萃取量、静态萃取时间和改性剂加入量等五变量的最佳条件,用大孔径毛细管柱[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]测定了丹皮酚的含量,其结果准确、灵敏,分辨率好。[B]1 实验部分[/B]仪器、试剂和药品 仪器:100DX、100DM注射泵,SFX210超临界萃取器(美国ISCO公司),HP5890series II[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url](美国HP公司),NEC Pewermate 325(日本)。试剂:二氧化碳(99%)(上海酒精总厂),其余试剂均为分析纯。药品:丹皮酚标准品(中国药品生物制品检定所),药材及成方制剂购于长海医院。
六味地黄丸是常用中成药,在实际生产中有直接打粉加入的,有用提取液加入的,还有提取丹皮酚加入的。到底该如何加入才更合理呢?
[b][size=15px][color=#595959]原发性痛经[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]是女性最常见的妇科疾病,严重者可出现恶心、呕吐、脚臭、出汗,甚至晕厥,影响女性患者的生活和工作质量。目前治疗原发性痛经的一线药物是非甾体类抗炎药和激素治疗,包括口服避孕药或黄体酮。然而这些药物需要定期服用,并有常见的[b]不良反应[/b],包括[/color][/size][b][size=15px][color=#595959]消化[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]不良、恶心和头痛。因此,迫切需要寻找一种低毒的替代药物来缓解原发性痛经的症状。[/color][/size] [size=15px][color=#595959]中医基础理论认为,原发性痛经以[b]气滞血瘀[/b]为病机,可采用[b]活血化瘀[/b]的治疗方法。[b]牡丹皮[/b]是牡丹的干燥根皮,广泛用于原发性痛经、子宫内膜异位症等妇科疾病。[b]牡丹花粉[/b]采自牡丹花,其黄酮、多酚、激素、有机酸等成分与牡丹皮相似,作为中药使用历史悠久。据记载,牡丹花粉还具有活血化瘀的功效,药食同源,被用于预防和治疗经期疼痛,但其治疗原发性痛经的效果尚不清楚。[/color][/size] [size=15px][color=#595959]该研究旨在探讨牡丹花粉对小鼠原发性痛经的治疗作用及其可能机制。[/color][/size] [size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size] [size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959]采用体外子宫收缩模型和原发性痛经小鼠,观察牡丹花粉对原发性痛经的治疗作用。以62.5 mg/kg、125 mg/kg、250 mg/kg牡丹花粉处理原发性痛经小鼠,观察其扭转反应、潜伏期、子宫组织病理变化、前列腺素E2 (PGE2)、前列腺素F2α (PGF2α)水平及中性粒细胞和巨噬细胞的浸润情况。Western blot检测白细胞介素1β (IL-1β)、白细胞介素6 (IL-6)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3 (NLRP3)、环氧化酶-2 (COX-2)、微体前列腺素e合成酶1 (mPGEs-1)、BCL2-相关X (Bax)、B细胞[/color][/size][b][size=15px][color=#595959]淋巴瘤[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]-2 (BCL-2)、caspase-3、cleaved caspase-3的蛋白表达,以及[b]氧化应激[/b]相关标志物丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、和活性氧(ROS)。[/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size] [align=center][font=mp-quote, -apple-system-font, BlinkMacSystemFont, &][color=#3573b9]结[/color][/font][font=mp-quote, -apple-system-font, BlinkMacSystemFont, &][color=#3573b9]果[/color][/font][/align][size=16px][color=#3573b9][/color][/size] [size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959]牡丹花粉能减弱子宫自发或催产素引起的子宫收缩。牡丹花粉可减少大鼠扭体次数,延长扭体潜伏期,减轻子宫组织病理损伤。[b]炎症细胞[/b]浸润减少,IL-1β、IL-6、NLRP3蛋白表达减少。COX-2/PGE2通路被抑制;原发性痛经小鼠子宫的氧化应激和细胞凋亡也有所改善。[/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size] [align=center][size=16px][color=#3573b9]结论[/color][/size][/align] [b][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959]牡丹花粉通过调节COX-2/PGE2通路,抑制炎症反应,调节氧化应激和细胞凋亡,对原发性痛经有积极治疗作用。[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959][/color][/size]