衣原体抗原检测

为进一步规范新型冠状病毒相关检测试剂的管理，国家药监局器审中心组织制定了《新型冠状病毒（2019-nCoV）核酸检测试剂注册审查指导原则》《新型冠状病毒（2019-nCoV）抗体检测试剂注册审查指导原则》和《新型冠状病毒（2019-nCoV）抗原检测试剂注册审查指导原则》现予发布。特此通告。国家药品监督管理局医疗器械技术审评中心2022年4月27日新型冠状病毒（2019-nCoV）核酸检测试剂注册审查指导原则本指导原则旨在指导注册申请人对新型冠状病毒（2019-nCoV）核酸检测试剂（以下简称“新冠病毒核酸检测试剂”）注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门提供参考。本指导原则是对新冠病毒核酸检测试剂的一般要求，申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用。若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。本指导原则是供注册申请人和技术审评人员使用的指导性文件，但不包括审评审批所涉及的行政事项，亦不作为法规强制执行，应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。如果有能够满足相关法规要求的其他方法，也可以采用，但是需要提供详细的研究资料和验证资料。本指导原则是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下制定，随着法规和标准的不断完善，以及科学技术的不断发展，相关内容也将适时进行调整。一、适用范围新型冠状病毒（2019-nCoV）属于β属冠状病毒，有包膜，颗粒呈圆形或椭圆形，直径约为60~140nm。具有5个必需基因，分别针对核蛋白（N）、病毒包膜（E）、基质蛋白（M）和刺突蛋白（S）4种结构蛋白及RNA依赖性的RNA聚合酶（RdRp）。核蛋白（N）包裹RNA基因组构成核衣壳，外面围绕着病毒包膜（E）,病毒包膜包埋有基质蛋白（M）和刺突蛋白（S）等蛋白。实验室检查包括一般检查，病原学及血清学检查，胸部影像学检查等。病原学检查又包括核酸检测和抗原检测。核酸检测主要采用逆转录PCR，二代测序等方法，在鼻、口咽拭子、痰液和其他下呼吸道分泌物等标本中均可检测出新型冠状病毒核酸。新型冠状病毒在流行过程中基因组不断发生变异，新的变异株可能在传播力、致病性、免疫逃逸能力等方面发生改变。变异株可能影响检测试剂的性能，甚至出现漏检。本指导原则适用于采用逆转录实时荧光 PCR法，对咽拭子、鼻咽拭子、肺泡灌洗液或痰液等呼吸道样本中的新型冠状病毒(2019-nCoV )核酸进行体外定性的检测试剂。对于采用其他方法学的新冠病毒核酸检测试剂，可能部分要求不完全适用或本文所述内容不够全面，申请人应参照本指导原则，根据产品特性对适用部分进行评价，并补充其他的评价资料。本指导原则适用于新冠病毒核酸检测试剂注册申请和变更注册申请的情形。本指导原则针对新冠病毒核酸检测试剂注册申报资料中的部分内容进行撰写，其他未尽事宜应当符合《关于公布体外诊断试剂注册申报资料要求和批准证明文件格式的公告》（国家药品监督管理局公告2021年第122号）等相关法规要求。二、注册审查要点（一）监管信息1. 产品名称及分类编码产品名称应符合《体外诊断试剂注册与备案管理办法》（国家市场监督管理总局令第48号）及相关法规的要求，如新型冠状病毒（2019-nCoV）核酸检测试剂盒（荧光PCR法）。根据《体外诊断试剂分类规则》，该产品按照第三类体外诊断试剂管理，分类编码为6840。2. 其他信息还包括产品列表、关联文件、申报前与监管机构的联系情况和沟通记录以及符合性声明等文件。（二）综述资料综述资料主要包括概述、产品描述、预期用途、申报产品上市历史及其他需说明的内容。应详细说明产品所采用的技术原理及检测流程。提供不同适用机型的检测通量，即一次检测最多可检测的样本数。提供核酸提取（手工和自动提取方式应分别明确）和PCR扩增的时间，以及检测全过程所需的时间。不同检测流程，分别提供最少和最多检测样本量下的检测时间。与已上市同类产品进行比较，比较内容包括样本类型，检测原理，检测靶基因，组成成分，内标，质控品，判读规则，分析性能和临床性能等。预期用途中明确产品检测的靶基因，需选择保守性和特异性相对较高的基因，同时还应考虑基因的扩增效率。具体检测基因一般为ORF1ab和N基因，如果检测其他基因，应提供相关指南或文献，并分析所检测基因的灵敏度和特异性是否符合临床需求。（三）非临床资料1. 产品技术要求及检验报告注册申请人应当在原材料质量和生产工艺稳定的前提下，根据产品研制、前期评价等结果，依据国家标准、行业标准及有关文献资料，结合产品特性按照《医疗器械产品技术要求编写指导原则》（ 2022 年第 8 号） 的要求编写。该类产品作为第三类体外诊断试剂，应当以附录形式明确主要原材料以及生产工艺要求。新冠病毒核酸检测试剂已有国家标准品，技术要求中应体现国家标准品的相关要求，并使用国家标准品对三批产品进行检验。新冠病毒核酸检测试剂的检出限水平应符合国家相关指南文件规定，申报产品对国家灵敏度标准品的检测结果应与声称的检出限水平相当。如有适用的国家标准、行业标准，产品技术要求的相关要求应不低于相应的要求。2. 分析性能研究注册申请人应采用在符合质量管理体系的环境下生产的试剂盒进行所有分析性能研究，提交具体研究方法、试验方案、试验数据、统计分析等详细资料。如申报产品适用不同的机型，需要提交采用不同机型进行性能评估的资料。如申报产品包含不同的包装规格，需要对各包装规格进行分析或验证。适用的不同样本类型应分别进行分析性能研究。分析性能评估所用样本的基本信息均需明确，例如样本来源、样本类型、采集和处理方式、稀释方式、定值过程及数据等。研究中采用的新冠病毒阳性样本，应采用科学合理的方法确定其阴阳性和浓度水平，提交具体的试验资料。分析性能评估用样本一般应为真实样本，如涉及稀释后检测，应采用与适用样本类型一致的阴性基质。不可采用质粒进行分析性能评估。对于各项性能中采用的样本，在下述各项性能研究资料中分别提供样本信息列表。2.1样本稳定性考虑到病毒RNA极易被降解的特性，应对样本稳定性进行详细研究，包括采集后未经处理的样本，加入不同裂解液/消化液的样本，灭活处理后的样本，研究内容包括冷藏保存时间，冷冻保存时间，冻融次数等。如产品适用拭子、痰液等不同的样本类型，因其中干扰物质存在较大差异，可能对病毒RNA降解的影响不同，建议对每种样本类型均进行稳定性研究。如核酸提取液可不立即进行检测，还需对核酸提取液的保存条件和稳定性进行研究。2.2适用的样本类型列明产品适用的样本类型。2.3企业参考品验证根据主要原材料研究资料中的企业参考品设置情况，采用三批产品对企业参考品进行检验并提供详细的试验数据。2.4精密度应对精密度指标，如标准差或变异系数等的评价标准做出合理要求。应考虑运行、时间、操作者、仪器、试剂批次和地点等影响精密度的条件，设计合理的精密度试验方案进行评价。精密度评价试验应包含核酸提取步骤。设定合理的精密度评价周期，例如为期至少20天的检测。对检测数据进行统计分析，获得重复性、实验室内精密度、实验室间精密度、批间精密度等结果。采用临床样本进行精密度评价，应至少包含3个水平：阴性样本、临界阳性样本、中/强阳性样本，并根据产品特性设定适当的精密度要求，例如：阴性样本：待测物浓度低于检出限或为零浓度，阴性检出率应为100%（n≥20）。临界阳性样本：待测物浓度略高于试剂盒的检出限，阳性检出率应≥95%（n≥20）。中/强阳性样本：待测物浓度呈中度到强阳性，阳性检出率为100%且Ct值的CV≤5%（n≥20）。2.5包容性2.5.1病毒样本的验证验证具有时间和区域特征性的至少20个不同来源的阳性样本（临床样本或病毒培养物），应包括检出限和重复性的验证。样本应覆盖目前国内流行的变异株型别，并适当纳入其他代表性的变异株。注意包容性研究样本和检出限研究样本不能重复。2.5.2生物信息学分析及人工合成样本的验证按照器审中心另行公布的变异株验证相关要求进行评价。2.6检出限2.6.1检出限的确定将不同来源的至少5个新冠病毒样本梯度稀释于与适用样本一致的基质中，进行检出限的确定。每个浓度梯度最少重复3次检测，以100%可检出的最低浓度水平作为估计检出限，在此浓度附近制备若干梯度浓度样本，每个浓度至少重复20次检测，将具有95%阳性检出率的最低浓度水平作为确定的检出限。2.6.2检出限的验证选择另外5个不同来源的新冠病毒样本在检出限浓度水平进行验证，应达到95%阳性检出率。2.7分析特异性2.7.1交叉反应需验证相关病原体和多例人类基因组DNA（表1）的交叉反应。除SARS冠状病毒和MERS冠状病毒可采用假病毒外，各病原体均应采用临床样本或培养物进行验证。建议在病毒和细菌感染的医学相关水平进行交叉反应的验证。通常，细菌感染的浓度水平为106CFU/mL或更高，病毒为105PFU/mL或更高，提供所有用于交叉反应验证的病原体样本的来源、阴阳性、种属/型别和浓度确认等试验资料。表1 需进行交叉反应验证的物质地方性人类冠状病毒（HKU1，OC43，NL63和229E）、SARS冠状病毒、MERS冠状病毒H1N1（新型甲型H1N1流感病毒（2009）、季节性H1N1流感病毒、H3N2、H5N1、H7N9，乙型流感Yamagata、Victoria，呼吸道合胞病毒A、B型，副流感病毒1、2、3型，鼻病毒A、B、C组，腺病毒1、2、3、4、5、7、55型，肠道病毒A、B、C、D组，人偏肺病毒、EB病毒、麻疹病毒、人巨细胞病毒、轮状病毒、诺如病毒、腮腺炎病毒、水痘-带状疱疹病毒肺炎支原体、肺炎衣原体军团菌、百日咳杆菌、流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、化脓性链球菌、肺炎克雷伯菌、结核分枝杆菌烟曲霉、白色念珠菌、光滑念珠菌、新生隐球菌等高浓度人类基因组DNA2.7.2竞争性干扰申请人应充分考虑临床上容易与新冠病毒合并感染的病原体，在高浓度的情况下对低浓度（例如检出限浓度）新冠病毒核酸检测的影响，进行竞争性干扰研究。2.7.3干扰试验应根据所采集样本类型，针对可能存在的内源/外源物质干扰情况进行验证。建议申请人在每种干扰物质的潜在最大浓度（“最差条件”）条件下进行试验，检测包含临界阳性水平在内的新冠病毒样本。对结果进行合理的统计分析，对比添加干扰物质前后的 Ct 值差异。检测的潜在干扰物包括样本中的原有物质及在样本采集和处理期间引入的物质。表2 用于干扰试验的物质类别具体物质粘蛋白血液（人类）鼻腔喷雾剂或滴鼻剂苯福林、羟甲唑啉、氯化钠（含防腐剂）鼻用皮肤类固醇倍氯美松、地塞米松、氟尼缩松、曲安奈德、布地奈德、莫米松、氟替卡松缓解咽部症状的药物相关含片、喷剂等过敏性症状缓解药物盐酸组胺抗病毒药物α-干扰素、扎那米韦、利巴韦林、奥司他韦、帕拉米韦、洛匹那韦、利托那韦、阿比多尔抗生素左氧氟沙星、阿奇霉素、头孢曲松、美罗培南全身性抗菌药物妥布霉素样本采集和处理期间引入的物质2.8核酸（RNA）提取/纯化性能在进行核酸检测之前，建议有核酸（RNA）提取/纯化步骤。该步骤的目的除最大量分离出目的RNA外，还应有相应的纯化作用，尽可能去除PCR抑制物。对配合使用的所有核酸提取试剂进行提取核酸纯度、浓度、提取效率的研究，并与质量较好的核酸提取试剂进行平行比对。若产品适用两种或以上核酸提取试剂，则每一种核酸提取试剂均需配合检测试剂进行抗干扰、精密度和检出限的验证。2.9反应体系2.9.1样本采集和处理2.9.1.1样本采集方式的选择2.9.1.2样本采集时间点的选择：是否受病程、临床症状、用药情况等因素的影响。2.9.1.3采样拭子及样本保存液的选择：对拭子头和拭子杆的材质要求。明确保存液或裂解液的成分、浓度、使用量的要求等。配套的不同保存液或裂解液需验证检出限和重复性。2.9.1.4样本处理方式的选择：研究产品适用的灭活方式，包括热灭活和化学灭活，研究内容包括胍盐的使用浓度及用量、样本用量。如适用，对痰液消化方式及消化液进行研究。2.9.2核酸提取和反应体系研究确定最佳核酸提取和反应体系，包括核酸提取用的样本体积、洗脱体积和PCR加样体积、各种酶浓度、引物/探针浓度、dNTP浓度、阳离子浓度及反应各阶段温度、时间、循环数等。建议在保证核酸提取质量的情况下尽量扩大总反应体系和加样量，以提高检测灵敏度。反应体系研究应确保不同基因的检测能力具有一致性，对于结果为单基因阳性时需要复测的试剂，需使用至少10例临床样本梯度稀释，观察各基因检出情况是否存在显著差异，避免过高的复测率。提交不同适用机型基线和阈值循环数的确定资料。不同适用机型的反应条件如果有差异应分别详述，并提交验证资料。3. 稳定性研究申报试剂的稳定性主要包括实时稳定性（有效期）、开瓶稳定性及冻融次数限制等研究，申请人可根据实际需要选择合理的稳定性研究方案。稳定性研究资料应包括具体的实施方案、详细的研究数据以及统计分析结论。对于实时稳定性研究，应提供至少三批产品在实际储存条件下保存至成品有效期后的研究资料。4. 阳性判断值研究阳性判断值一般为申报产品检测病毒核酸阳性的Ct值。阳性判断值研究用样本来源应具有多样性和代表性，考虑不同时间、地域、不同的感染阶段和生理状态等因素，尽量纳入较多弱阳性和高阴性水平的样本。在条件允许的情况下，建议覆盖目前的流行株进行阳性判断值研究。采用ROC曲线分析建立每个检测靶基因的阳性判断值，然后确定产品的判读规则（单基因阳性、双基因阳性等）。对于结果为单基因阳性时需要复测的试剂，建议对阳性判断值研究数据进行复测率的统计分析。如判定值存在灰区，应提供灰区的确认资料。如果产品适用不同样本类型，需要对各样本类型进行阳性判断值的验证。提交阳性判断值研究所用样本的背景信息列表，至少包括性别、年龄、临床诊断信息、样本来源机构、检测结果等信息。提供内标检测结果范围的确定方法和研究资料。5. 其他资料5.1主要原材料研究资料该类产品的主要原材料包括引物、探针、酶、dNTP、核酸分离/纯化组分（如有）、质控品、参考品等。应提供主要原材料的选择与来源、制备过程、质量控制标准等相关研究资料、质控品的定值试验资料等。如主要原材料为企业自制，应提供其详细制备过程；如主要原材料源于外购，应提供资料包括：选择该原材料的依据及对比筛选试验资料、供货方提供的质量标准、出厂检验报告，以及该原材料到货后的质量检验资料。供应商应固定，不得随意更换。5.1.1引物和探针：应详述引物和探针的设计原则，提供引物、探针核酸序列、靶序列的基因位点及两者的对应情况。建议每种病毒设计两套或多套引物、探针以供筛选，通过序列比对和功能性试验等方式，对病毒进行包容性和特异性（如交叉反应）的评价，其中序列比对包括与已公布新冠病毒序列的比对，及与易产生交叉反应的其他病原体的序列比对；功能性试验包括对不同来源、不同滴度的新冠病毒核酸阳性样本，和不同的近缘病原体的检测。通过筛选确定最佳的引物和探针组合。引物、探针的质量标准应至少包括序列准确性、纯度、浓度及功能性实验等。5.1.2脱氧三磷酸核苷（dNTP）：包括dATP、dGTP、dCTP、dTTP、dUTP，应提供对其纯度、浓度、功能性等的详细验证资料。5.1.3酶：需要的酶主要包括DNA聚合酶、逆转录酶、尿嘧啶DNA糖基化酶等，应分别对酶活性、功能性等进行评价和验证。5.1.4质控品试剂盒一般包含阴性质控品和阳性质控品。阳性质控品应包含试剂盒检测的靶序列，可采用假病毒制备。质控品需参与样本处理、核酸的平行提取和检测的全过程，以对整个提取和PCR扩增过程、试剂/设备、交叉污染等环节进行合理质量控制。提交试剂盒质控品有关原料选择、制备、定值过程、浓度范围等试验资料，对质控品的检测结果Ct值范围做出明确的要求。5.1.5内标内标，又称内对照，可对管内抑制导致的假阴性结果进行质量控制，应与靶核酸一同提取及扩增。申请人需对内标的引物、探针设计和相关反应体系的浓度做精确验证，既要保证内标荧光通道呈明显的阳性曲线又要尽量降低对靶基因检测造成的抑制。明确内标的检测结果Ct值范围。建议科学设置内标，对待测样本的取样质量、试剂的反应体系进行监控。5.1.6企业参考品该类产品的企业参考品一般包括阳性参考品、阴性参考品、检出限参考品和重复性参考品。应根据产品性能验证的实际需要设置企业参考品。应提交企业参考品的原料来源、选择、制备、阴阳性及浓度确认方法或试剂等相关验证资料。企业参考品应采用临床样本，或者使用病毒培养物加入阴性基质。企业参考品的设置建议如下：阳性参考品：应着重考虑不同来源的病毒样本和滴度要求，应至少选取不同来源的5个病毒样本。阴性参考品：主要涉及对交叉反应的验证情况，建议包括冠状病毒（HKU1、OC43、NL63、229E）、SARS冠状病毒（可采用假病毒）、MERS冠状病毒（可采用假病毒）、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒等。检出限参考品：可采用95%阳性检出水平或略高于检出限的水平，如100%阳性检出水平。重复性参考品：建议包括高、低两个浓度的样本，其中一个浓度应为检出限附近的浓度。5.2生产工艺研究资料介绍产品主要生产工艺，可用流程图结合文字的方式表述。提交主要生产工艺的确定及优化研究资料。（四）临床评价资料该类试剂应通过临床试验路径进行临床评价。临床试验应满足《体外诊断试剂临床试验技术指导原则》（国家药品监督管理局通告2021年第72号）的要求，如相关法规、文件有更新，临床试验应符合更新后的要求。下面仅说明该类试剂临床试验中应关注的重点问题。该类试剂临床试验应按要求在三家以上临床试验机构进行，开展临床试验的机构应按要求经国家药品监督管理局医疗器械临床试验机构备案系统备案。1. 试验设计采用试验体外诊断试剂与已上市同类产品及临床参考标准进行比较研究，从而对产品临床性能进行确认。2. 受试者选择临床试验的入组人群应为产品的预期适用人群，该产品的适用人群包括：新型冠状病毒感染的疑似病例，以及根据国家卫生健康委员会相关规定需到临床试验机构就诊并进行新冠病毒核酸检测的其他人群。临床试验入组人群应以新冠疑似病例为主，并能代表适用人群的各种情形，如：最终确诊病例应包括不同病毒载量（根据对比试剂核酸检测结果确定）的病例，最终排除病例应适当纳入有疑似症状的其他呼吸道病原体感染病例。应注意，排除病例应绝大部分来源于疑似病例，也可适量纳入部分出院排除病例和其他疾病患者。国家卫生健康委员会发布了《新型冠状病毒肺炎诊疗方案》《新型冠状病毒肺炎防控方案》和其他相关诊疗指南，申请人在进行临床试验时应考虑现行方案对疑似病例和其他适用人群的规定，按照规定入组病例进行临床试验。3. 临床试验样本要求试验体外诊断试剂可同时适用于上呼吸道样本和下呼吸道样本，也可仅适用于上呼吸道样本。建议按照《新冠病毒样本采集和检测技术指南》进行样本采集。应采用临床原始样本进行临床试验。临床试验所用样本类型、样本采集、样本处理、样本稳定性、核酸提取纯化及结果判读等应分别满足试验体外诊断试剂与对比试剂产品说明书的要求，并在临床试验小结和报告中明确上述内容。临床试验前应对上述内容进行充分的性能评估。4. 临床试验样本量应基于与对比试剂的比较研究估算临床试验样本量。根据已有研究数据进行初步估算，建议对比试剂（核酸检测试剂）检测阳性样本不少于200例，阴性样本不少于3002019-nCoV）xx基因。有关“疑似病例”等人群的定义参照《新型冠状病毒肺炎诊疗方案》《新型冠状病毒肺炎防控方案》等文件执行。该产品在使用上应当遵守《新型冠状病毒肺炎诊疗方案》《新型冠状病毒肺炎防控方案》等文件的相关要求。开展新型冠状病毒核酸检测，应符合《新冠病毒样本采集和检测技术指南》等的要求，做好生物安全工作。本试剂盒检测结果仅供临床参考，不得作为临床诊断的唯一标准。建议结合患者临床表现和其他实验室检测对病情进行综合分析。2.【检验原理】简述产品的核酸提取和RT-PCR原理。明确内标基因名称及其作用。如采用了防污染措施，进行简要描述。性别样本类型受试者临床诊断背景信息新冠确诊/排除

LEX Diagnostics是一家总部位于英国的初创公司，目前正在开发一种用于传染病诊断的超快速实时PCR即时检测平台，该平台可在5分钟内提供结果，单次测试的价格与目前的抗原测试相似，为9.5美元。这家公司是英国技术开发公司TTP集团的衍生公司，于2020年初在COVID-19大流行的高峰期成立，总部位于剑桥以南几英里的Melbourn科技园。去年，GenMark Diagnostics对该公司进行了投资，但投资金额并未披露。在11月2日举办的分子病理学协会年会（Association for Molecular Pathology annual meeting）上，作为‘低资源诊断’的代表，LEX公司的试剂开发主管Andrew Anyakwo在LGC生物研究技术公司（LEX的试剂开发合作伙伴）主办的研讨会上发表了演讲，对其技术进行了概述，并阐述了其对快速、低成本、高准确度诊断的愿景。Anyakwo表示，目前市场上的即时检测设备有几个缺点。首先，许多设备对用户不那么友好，需要各种步骤，可能导致错误。因此，LEX公司开发了一种只需要用户添加样本的试剂盒，这有助于避免人为错误。其次，现有的测试，如COVID-19抗原测试，可能成本低，但并不灵敏，或者，它们可能与PCR法的灵敏度相似，但成本很高。Anyakwo说：“我们希望以低成本获得准确性，LEX的第一个测试将具有与传统实时PCR相当的检测限。”最后，尽管现有的PCR即时检测已经能在30分钟左右给出结果，但更快的速度仍将是一个优势。例如，在英国，一次初级保健访问只持续10分钟。为了达到这个目标，LEX公司将赌注押在直接从人体样本中进行超快速PCR扩增上。据Anyakwo说，犹他大学的Carl Wittwer及其同事在近10年前就已经为这种‘极速PCR’奠定了基础，他们于2015年在《Clinical Chemistry》上发表的一篇文献中证明，PCR可以通过仅持续数秒的温度循环进行，从而使DNA在1分钟或更短时间内被扩增。Wittwer也是BioFire诊断公司（现在是生物梅里埃的一部分）的联合创始人，并且是Scope Fluidics公司的顾问，Scope Fluidics位于波兰，是Curiosity Diagnostics的子公司，目前正在开发一种只需要15分钟就能样品到结果的PCR系统，而Curiosity今年也被Bio-Rad公司以1.7亿美元收购。LEX一直致力于减少超快速PCR反应室的尺寸，其反应室薄而平，制造成本低，可在几秒钟内改变温度。这是基于母公司TTP在2018年作为内部开发项目的一部分进行的工作。据其网站介绍，LEX公司已就该技术申请了多项专利，并于今年早些时候在美国获得了一项核心专利。该公司已经开发出一种试剂盒，该试剂盒已经生产了数万个，并在内部进行测试。试剂盒的侧面有一个开口，可以插入样本，例如鼻拭子。从那里，样本进入一个加热室，在不到一分钟的时间内被裂解，试剂盒中还有一个充满缓冲液的泡室和冻干的实时PCR试剂。虽然LEX公司最初的目标是开发一种快速流感检验，但它目前计划将流感和SARS-CoV-2联合检验作为其第一个产品推向市场。该测试已经进入开发阶段，根据该公司的网站，它在一年前已经展示了该检测的性能。Anyakwo说，一个挑战是流感和COVID-19病毒是包膜的，因此传统的裂解法需要大约5分钟才能将其打开，但LEX公司已经能够将这一时间缩短到1分钟。另一个挑战是人类样本含有可能干扰PCR反应的分子。例如，鼻液中的粘液是一种主要的PCR抑制剂，传统上需要长时间的PCR前清理。然而，LEX公司已经提出了新的化合物，使PCR反应对抑制剂具有耐受性，与冻干兼容，并且与现成的耐受抑制剂的RT-PCR混合物相比更有优势。在传统的热循环仪上开发和测试这些试剂后，LEX公司在自己的试剂盒和平台上对其进行了测试，并在三分钟内实现了扩增，这是一个创纪录的时间。虽然LEX计划首先开发一种呼吸道检验，但其平台也适用于其他快速传染病检验，如A型链球菌检验或沙眼衣原体/淋病奈瑟菌（CT/NG）检验。同样的基础技术原则上也可用于加强中央实验室的高通量测试。Anyakwo没有提供LEX平台商业化的时间表，但该公司负责商业开发的副总裁Chris Hole表示，其目标是首先获得美国食品和药物管理局的许可，这可能需要一些时间，另外该公司没有计划发布该平台的科研用版本。

新冠抗原检测的第一只靴子落地。山东专项、津冀等多个集采结果的出炉，平均中标被压至更合理区间，让市场竞争一夜之间进入白热化。过去2周，关于新冠抗原检测的一切都被按下快进键，信息量爆炸。就在国家卫健委发布《新冠病毒抗原检测应用方案（试行）》（以下简称《应用方案》），一举打开国内新冠抗原检测及居家自测想象空间的当晚，诺唯赞新冠抗原自测试剂盒获批上市，国家药监局火线审批北京金沃夫、华大因源、万孚生物、北京华科泰等4家先前取得了专业版资质企业的变更申请。至次日清早，国内首批共5款新冠抗原自测试剂获批上市。几乎是同步地，各大品牌纷纷与大参林、老百姓、京东健康、百度健康、苏宁易购等线上线下渠道网络建立战略合作，开卖枪响在即，足见各家有备而来、粮草充足。一天后，万泰生物、热景生物、博奥赛斯、明道捷测、乐普诊断等5家公司也拿到国家药监局的新冠抗原自测试剂注册资质。巨头们一骑绝尘，新冠抗原检测市场仅历时一个周末，就从市场准入之争跃迁至产品之争，甚至渠道之争。此后，明德生物、东方生物、艾康生物、中元汇吉、奥德生物、康华生物、奥泰生物、亚辉龙、易瑞生物等海外市场的活跃参与者陆续拿下国家药监局批转的新冠抗原自测资质，巨头环伺、19张产品注册证围猎，竞争一触即发。（统计时间截至2022年3月23日）而各省紧锣密鼓拉开的集采大幕，直接将巨头们的角逐推向高潮。3月15日，广东、河南、山东相继发布关于新冠抗原检测试剂集采实施方案的通知，明确开展新冠病毒抗原检测试剂产品集中采购。到16日晚间，山东新冠病毒抗原检测试剂专项集采一锤定音，华大因源、万泰生物、明德生物、东方生物、博奥赛斯首批进入政府集采名单，20日，天津医药采购中心也公布了第一批津冀新冠抗原检测试剂挂网价格，15家企业入围。1天后，国家医保局正式发文，要求各省将新冠抗原检测临时性纳入本身的基本医保目录。转眼之间，国内新冠抗原检测行业从无到有，从品牌活跃度、监管规则到渠道构建，后发优势被彰显到极致。新冠抗原检测有多火？面对全球最热医疗单品，国内用户热情出人意料的高涨。新冠抗原检测落地很快。早在今年的3月13日，被新冠疫情围困在吉林大学的师生，就成为国内第一批新冠抗原自测产品用户。这批累计1200万人份的新冠抗原检测试剂，由吉林省工信厅在第一时间采购，被志愿者免费分发到第一批终端用户手中，这是实实在在的需求。社区居民的应用场景下，新冠抗原检测落地稍慢，但消费者尝鲜热情更一浪高过一浪。由于售卖资质和采购、配送周期限制，大多数线下药店的新冠抗原自测试剂只能接受预定，到货时间不确定。但这些零售单价30元左右的产品，却大受消费者追捧。“14日以来的下单量很大，不少人直接下单了50盒。”某药店的店员说。而在另外一家药店，来自金沃夫、万孚生物等品牌的新冠抗原检测试剂，在填写身份信息预约后拉的微信群，已经超过10个。新冠抗原自测试剂在电商平台上的行情同样火爆。3月14日以来，京东、天猫、苏宁易购等多家电商平台陆续开放首批新冠病毒抗原检测试剂盒预售。短短数日，基本上在售的网上药店，新冠抗原自测试剂的月销量都在5000以上，并且大多是以一大盒，即20-30支一并打包售卖。“产品才上市发布，很多商家都在预售，库存非常紧张。”网站客服证实了新冠抗原自测试剂的高热度。这股消费热的背后，是新冠抗原检测海量的潜在市场。有研究认为，在长期视角下，新冠抗原检测市场规模可能超过千亿元，这其中包括由居家新冠抗原自测形成的静态市场，和由实现大规模新冠排查形成的动态市场。让子弹飞一会儿硬币的另一面，在国内的“动态清零”防疫策略之下，新冠抗原检测的进与退，主要由政策变化牵动。这意味着，新冠抗原检测渗透到应用场景中，将是个渐进的过程，不妨让子弹飞一会儿。实际上，新冠抗原检测在国内推广，是在变了疫情防控环境下，应运而生的事。新冠疫情纪元的第三年，国内的防疫策略悄然在调整。时隔一年，国家卫健委发布《新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第九版）》（以下简称《方案》），从病毒特征、检测手段，到诊断方式、诊治方法，都发生了显著变化。一方面，从新冠原始毒株，到德尔塔、奥密克戎变异毒株，甚至各种变异组合形成的鸡尾酒毒株，新冠病毒传播力已经扩大数倍。于是，《方案》指出，要对疑似病例要尽可能采取快速抗原检测、多重 PCR 核酸检测等方法，对常见呼吸道病原体进行检测，这与此前的《应用方案》不谋而合。尽管第八版也有提及抗原检测，但限于医疗机构内使用，新版方案提到可以居家、个人使用，再次确认了抗原检测的价值。另一方面，随着新冠疫苗的广泛接种，和新冠特效药相继上市，新冠重症、致死的可能性越来越小，为此，《方案》降低轻症集中隔离和出院标准。根据《方案》，轻型病例实行集中隔离管理，而不用在定点医院集中隔离。同时，轻型病例连续两次新型冠状病毒核酸检测N基因和ORF 基因Ct值均≥35，或连续两次新型冠状病毒核酸检测阴性，即可解除隔离管理，而此前要求CT值≥40才能出院。新冠病毒传播能力的增强，和院外管理需求的叠加，让更大规模人群新冠筛查成为必要。与诊断不同，筛查的对象往往没有出现任何新冠患病症状，或者疑似接触，即以中高风险地区居民、旅行者、某些封闭或半封闭场所等人员为主，更侧重检测手段的经济性、时效性、方便性，目的在于识别体内有足够高病毒负荷的病例，而非诊断新冠患者。这时，新冠抗原检测需要样品中的病毒水平达到培养阈值才会显示阳性结果的方法学特征，具备了更好的卫生经济价值。背后的“隐形冠军”值得注意的是，尽管关注点聚焦在产品和品牌争夺，抗原检测技术本身已经相对成熟，不可忽略的是，大规模筛查的经济逻辑，其实伴随着对新冠抗原检测技术属性的更高要求。新冠抗原检测市场的开闸，无异于一场突袭国内IVD品牌商的压力测试。目前获批的产品中，以胶体金免疫层析法技术为主流。这种工具采用高度特异性的抗原抗体反应及免疫层析技术，样品含在NC膜上流动，并与预先固定于检测区的抗原/抗体和包被在标记垫上的抗原/抗体彩色标记物发生反应，当检测线T和质控线C都显色，即可以判定阳性。新冠抗原检测试剂制作过程这种显色来定性地判读结果的方法，对检测区抗体活性、样本流经检测区速度等要求相当高，这就对试剂核心原料的品质提出了更高的要求。对于试剂原料厂商而言，这既是产能能力的考验，也是对服务能力的挑战。比如抗体如何选择、灵敏度如何控制等抗原检测试剂开发中的细节确定，形成了原料供应商的核心技术壁垒，他们通常需要经过大量筛选、反复验证，才能确定提供最优解决方案。而如何快速响应用户不断变化的需求，第一时间提供必要的技术支持，则要求原料厂商具备丰富的实践经验和持续的学习能力。实际上，直到新冠疫情暴发前夕，IVD试剂原料长期被海外品牌高度垄断。据统计，2019年，国内IVD原料市场的进口产品市场份额高达88%。而疫情期间IVD核心原料出现短缺、断供和涨价现象，既暴露出供应链安全问题，更锤炼了国内供应商的产品能力，一大批经验丰富的国产品牌涌现出来。比如，提供核心生物活性原料的菲鹏生物、诺唯赞等。数据显示，在奥密克戎变异株导致新冠病毒加快全球传播之际，中国成为新冠抗原快速检测重要的出口市场。据中华人民共和国海关总署官网数据显示，仅2021年，就有价值超过700亿元的新冠检测试剂盒被卖往全世界；2022年1月份抗原检测试剂出口额为164.8亿，2月为180.2亿，1月和2月已累计有345亿元出口额。而作为深耕IVD上游多年的品牌，菲鹏生物算得上新冠抗原检测试剂畅销全球背后的隐形冠军。他们自新冠疫情暴发之初即开展抗原检测核心原料——新冠抗体的快速攻关，是行业内较早推出该产品的企业，目前已经成为该领域原料的头部供应商。菲鹏生物产品负责人介绍，菲鹏生物之所以能成为全球主要供应商，得益于拥有强大的底层生物技术平台、技术服务及供货能力。过往所搭建的鼠杂交瘤技术平台、兔单抗开发平台、行业先进的抗体亲和力成熟及抗体工程改造技术平台、完善的理化质控平台等使得菲鹏新冠产品持续迭代，性能不断提升，保持产品在行业的持续竞争力，目前已经持续升级四代，产品处于当期最优水平。其次，新冠病毒不断变异，菲鹏生物为保证灵敏度和特异性，密切关注毒株演化，由专业的团队及时跟踪新发变异株的流行情况并对氨基酸变异频率进行分析，定位变异株流行区域及扩散范围，判断变异带来的影响，预警识别后，迅速启动重组抗原开发，评估抗原检测产品对变异株的检出风险。“我们已经相继做出200多种突变组合抗原。”菲鹏生物产品负责人表示。此外，抗体生产按照生物大分子药的思路构建高产稳定的细胞系，利用哺乳动物细胞发酵技术进行放大生产，工艺开发按照制药的标准进行，最终产品用质谱进行结构表征并进行全面、规范、稳定的理化性质分析，用于产品质控放行，为产品批间差控制打下坚实的基础，同时菲鹏拥有满足不同产能需求的大规模生产资源及设备，可根据需求灵活使用，客户粘性高，备货及时充足。在产品服务方面，我们拥有专业的技术支持团队，能给客户提供全套原料使用方案，协助客户加快产品开发速度，满足不同客户需求。经过新冠疫情洗礼的国内IVD原料厂商，在技术上具备了更快的反应速度，产能也积累了足够的张力，更关键是能够为用户提供及时的本地化服务，“菲鹏生物抗体开发经验丰富，这次快速开发出适合新冠抗原检测的抗体，并且安排技术团队快速到用户企业做支持，配合用户适应市场的快节奏变化。”菲鹏生物产品负责人表示，此外，在市场骤然暴发之际，保持稳定的供货能力，也是菲鹏生物从大量IVD原料企业中脱颖而出的关键，“这其实非常考验企业产能管理的能力，也是用户在市场趋于稳定之后，最为看重的供应商特质。”国内放开抗原检测使用后，监管层、品牌方正全力以赴审批、生产、投放，菲鹏生物位于广东东莞的研发生产总部比以往更加忙碌。新冠抗原市场头部效应加剧之际，真正好的的解决方案，无关其他，正是在于这些试剂和原料国产者的细节把控之中。诚然，无论巨头入局、一盒难求，还是产能考验，都是国内新冠抗原检测行业成长的阶段性特征，我们有理由相信，国产厂商能够抗住这场压力测试，为国内新冠防疫提供更多元的解决方案。