样品混匀器

[align=center]【前处理分享】关于样品混匀的探讨[/align] 国庆节过后，我们收到上级部门的能力验证样品，两个笋瓜样品，其中一个为空白样品，两个苹果样品，其中一个为空白样品，样品量为200g，取样时，发样人员一再交待，让混匀后再称样品，自己称取平行样。 拿来的能力验证样品均为冷冻样品，我们先化冻，放温水盆里解冻，解冻后采用在混匀器上混匀5min，在超声波里超声10min，然后称取样品25g，按照NY/T761-2008方法进行前处理。[align=center][img=,464,465]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310843224704_2148_1645480_3.jpg!w464x465.jpg[/img][/align] 图1：能力验证样品混匀 结果发现笋瓜样品平行性很好，苹果样品平行性不好，询问同行，认为混匀方式应该用均质器混匀，到底是样品混匀方式不对，还是前处理有问题，我做了以下试验。[color=red] 一、[/color][color=red]不同的混匀方式[/color] 1、 加标 1.1配制标液 标液敌敌畏、甲基对硫磷、异菌脲、氟氯氰菊酯为100ug/mL，用丙酮或正已烷配制为10ug/mL单标。 1.2加入标液 从超市买来苹果，苹果选取的是与能力验证的相近的品种，红牛苹果，破碎装进塑料盒里，每盒里准确称取200g，标注为A1、A2，然后加入敌敌畏2.8mL，甲基对硫磷2.0mL，异菌脲、氟氯氰菊酯2.0mL等。用封口膜将盖子四周粘住，不做任何混匀，直接放冰箱里冷冻。[align=center][img=,462,466]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310843521004_2412_1645480_3.jpg!w462x466.jpg[/img][/align] 图2：制作加标样品 2、 混匀方式 2.1 混匀器+超声波超声 把加标过的A1样品放温水盆里解冻，然后在混匀器上5min，放超声波里超声25min，然后用玻璃棒充分搅匀2min，称取平行样品25.0g，按NY/T761-2008方法进行前处理。[align=center][img=,554,326]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310844362414_8608_1645480_3.jpg!w554x326.jpg[/img][/align] 图3：混匀器+超声波超声 2.2 匀质器混匀 把加标过的A2样品放温水盆里解冻，然后用匀质器匀浆25min，匀浆时样品粘在刀头上，用干净的玻璃棒刮进样品中，再用玻璃棒充分搅匀2min，称取平行样品25.0g，按NY/T761-2008方法进行前处理。[align=center][img=,554,326]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310844589013_3455_1645480_3.jpg!w554x326.jpg[/img][/align] 图4：匀质器混匀[color=red] 二、[/color][color=red]测定出现的问题[/color] 1、 前处理 1.1 提取出现的问题 用均质器匀浆过的样品，细度比较细，成糊状，在匀浆时粘在刀头上，不容易清洗，在静置分层时，因为含糖量高，样品不分层，需要加入纯水，重新振荡静置，分层时速度很慢，需要由原来的静置时间30min延长到1h，才能彻底分层。 用混匀器+超声波超声的样品，在静置分层时，与匀浆混匀的样品，在颜色上有明显差别，分层速度比较快，30min可以分层。[align=center][img=,553,625]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310845211654_8176_1645480_3.jpg!w553x625.jpg[/img][/align] 图5：要延长静置时间 1.2 净化出现的问题 A1两个样品，A2两个样品，按NY/T761-2008方法进行前处理，有机磷类分析步骤为提取与净化，净化需要氮吹近干，但在氮吹过程中有氮吹干的情况，当时没有记录哪个吹干了，直接上机测定。 有机氯类、拟除虫菊酯类分析步骤为提取与净化，净化时先氮吹近干，再过弗罗里析柱，50℃氮吹至小于5mL，再用正已烷定容至5.0mL。[align=center][img=,464,465]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310845471931_5294_1645480_3.jpg!w464x465.jpg[/img][/align] 图6：氮吹及氮吹后过小柱净化。 2、 测定结果 敌敌畏的加标量为0.14mg/kg，甲基对硫磷的加标量为0.10mg/kg，异菌脲的加标量为0.10mg/kg，氟氯氰菊酯的加标量为0.10mg/kg。上机时用苹果基质配制浓度与加标浓度一样，用基质配的标液计算样品含量，测定结果见表1。[align=center]表1：第一次苹果中农残测定结果（mg/kg） [table][tr][td][align=center]样品名称[/align][/td][td]敌敌畏[/td][td]甲基对硫磷[/td][td]异菌脲[/td][td]氟氯氰菊酯[/td][/tr][tr][td]A1-1[/td][td]0.10[/td][td]0.079[/td][td]0.084[/td][td]0.085[/td][/tr][tr][td]A1-2[/td][td]0.12[/td][td]0.078[/td][td]0.080[/td][td]0.082[/td][/tr][tr][td]A2-1[/td][td]0.059[/td][td]0.069[/td][td]0.081[/td][td]0.090[/td][/tr][tr][td]A2-2[/td][td]0.12[/td][td]0.075[/td][td]0.093[/td][td]0.090[/td][/tr][/table][/align][align=center][img=,553,244]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310846140644_1681_1645480_3.jpg!w553x244.jpg[/img][/align] 图7：混匀器+超声波超声的样品[align=center][img=,553,241]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310846388883_4302_1645480_3.jpg!w553x241.jpg[/img][/align] 图8：匀浆机混匀的样品 从上表与图谱可以看出，不论是混匀器+超声波超声还是匀质器混匀，都存在着平行样品不平行的现象，在前处理过程中，氮吹时有氮吹干了情况，但当时没有记录样品号，所以把加标样品拿出来重新测定。 3、 重新测定 重新称取加标样品A1与A2，按上述步骤进行前处理，在氮吹时与同事说话，一不留神吹干了A1-2有机磷样品，只好重新再氮吹，结果见表2. 表2：第二次苹果中农残测定结果（mg/kg）[table][tr][td]样品名称[/td][td]敌敌畏[/td][td]甲基对硫磷[/td][td]异菌脲[/td][td]氟氯氰菊酯[/td][/tr][tr][td]A1-1[/td][td]0.14[/td][td]0.086[/td][td]0.088[/td][td]0.089[/td][/tr][tr][td]A1-2[/td][td][color=red]0.071[/color][color=red]氮吹干了[/color][/td][td][color=red]0.049[/color][color=red]氮吹干了[/color][/td][td]0.084[/td][td]0.091[/td][/tr][tr][td]A1-2[/td][td][color=red]0.13[/color][color=red]重做[/color][/td][td][color=red]0.080[/color][color=red]重做[/color][/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td]A2-1[/td][td]0.14[/td][td]0.083[/td][td]0.087[/td][td]0.093[/td][/tr][tr][td]A2-2[/td][td]0.14[/td][td]0.088[/td][td]0.090[/td][td]0.096[/td][/tr][/table] 通过表2可以看出，氮吹时对有机磷的结果影响是明显的，如果氮吹时不是近干，而完全干了，测定结果会小一半，回收率减少一半，而有机氯如果第一次氮吹干了，会有影响，但影响不会这么大，回收率也不会减少的这么多，可能与农药本身性质有关。[align=center][img=,553,117]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310847095744_5371_1645480_3.jpg!w553x117.jpg[/img][/align] 图9：氮吹干与近干的图谱[color=red] 三、[/color][color=red]总结[/color] 从以上试验可以得出以下结论： 1、制作加标样品时，可以用高浓度标液，这样加标体积较小，不会影响到样品质量，但要充分混匀，让农药充分渗透到样品里，比如苹果样品比较粘稠，如果加了100-200uL标液，标液只会停留在样品表面某个点上，此时直接用匀浆机混匀，这个标液点就直接粘在刀头上，无法洗脱，也达不到混匀效果，会造成样品的不平行，像这种粘稠样品，有没有快速混匀的方法，希望高手们提供一些供参考。 2、样品混匀不论哪种方式，要有足够的时间，30min后应该可以混匀，称样前还需要用玻璃棒不停搅拌5min，再次混匀样品。 3、苹果样品如果用匀浆机混匀，前处理时还有匀浆的步骤，这时样品细度比较细，过滤静置时，液体比较混浊，需要加水或加氯化钠，还需要延长静置时间，才能彻底分层。 4、平行样品不平行，相差一半时，有很大可能是前处理过程出现问题，农药的性质不同，结果也不同，比如敌敌畏与甲基对硫磷的沸点不同，敌敌畏沸点74℃，甲基对硫磷的[url=https://baike.so.com/doc/5567907-5783065.html][color=windowtext]沸点[/color][/url]158℃，氮吹时水浴温度80℃，如果氮吹完全干，甲基对硫磷的回收率有70%以上，而敌敌畏的回收率只有50%，；其它如异菌脲、氟氯氰菊酯等农残，因为沸点和分子结构不同，损失没有敌敌畏的损失大。